尿液微量蛋白4项检测对糖尿病肾病的早期诊断价值

李艳 张家明 卓少贤 黄彩云

论 著

尿液微量蛋白4项检测对糖尿病肾病的早期诊断价值

李艳 张家明 卓少贤 黄彩云

目的探讨尿微量白蛋白（MA）、尿转铁蛋白（TRF）、α1-微球蛋白（α1-MG）及β2-微球蛋白（β2-MG）的定量检测对糖尿病肾病（DN）的早期诊断价值。方法根据尿蛋白定性试验将65例2型糖尿病患者分为尿蛋白定性阳性组和阴性组，采用免疫比浊法定量检测65例2型糖尿病患者及30例健康体检人员的MA、TRF、α1-MG及β2-MG水平，并对结果进行统计和分析。结果尿蛋白定性阳性组和尿蛋白定性阴性组患者的MA（mg/L：28.6±4.4、11.3±1.9比6.9±1.1）、TRF（mg/L：3.5±0.9、1.3±0.4比1.1±0.3）、α1-MG（mg/L：28.1±6.3、9.4±2.0比8.2±1.9）及β2-MG（mg/L：4.77±0.71、1.58±0.39比0.94±0.22）均明显高于正常对照组，且尿蛋白阳性组的这4项微量蛋白水平又明显高于尿蛋白阴性组，差异均有统计学意义（均P＜0.05）；MA、TRF、α1-MG及β2-MG单项检测对2型糖尿病患者诊断的阳性率分别为41.5%、44.6%、38.5%及33.8%，联合检测这4项微量蛋白的阳性率可高达90.5%。结论尿MA、TRF、α1-MG及β2-MG是DN的早期诊断的敏感指标，联合检测这4项指标对提高DN的早期诊断以及鉴别其病变部位有重要意义。

尿微量蛋白； 糖尿病肾病； 早期诊断

糖尿病（DM）是一组以高血糖为主要特征的代谢性疾病，长期存在的高血糖容易导致各种组织特别是眼、心、肾、神经等慢性损害。糖尿病肾病（DN）是糖尿病最常见且最严重的并发症。流行病学调查表明，合并肾损害的糖尿病患者比未合并肾损害患者病死率高达30倍。DN患者早期发病较为隐匿，无明显表现，且病情进展较慢，容易被忽略，一般尿常规难以检出，一旦检测出临床蛋白尿，肾损害已经较严重，且难治愈。可见，为了尽早预防糖尿病肾损害，如能在患者尿微量蛋白（MA）阳性出现之前就能预先检测出并早期诊断、及时治疗，对延缓DN患者的病情进展及提高其生活质量意义重大。

1 资料与方法

1.1 研究对象 收集湛江中心人民医院2016年3月至2017年3月期间诊治的2型糖尿病患者65例，其中男性37例，女性28例；年龄35～78岁，平均年龄（51.3±19.2）岁；病史2～15年。所有病例均符合1999年世界卫生组织（WHO）糖尿病专家委员会提出的糖尿病诊断标准，排除其他代谢并发症和急性感染，且无肾毒性药物治疗史或其他原因引起的肾脏疾病。根据尿蛋白定性实验将65例患者分成尿蛋白阳性组（n＝33）和尿蛋白阴性组（n＝32）。另选健康体检者30例作为本研究的正常对照组，其中男性17例，女性13例；年龄29～75岁，平均年龄（50.8±18.5）岁。3组的性别和年龄比较差异无统计学意义（均P＞0.05），具有可比性。

1.2 实验方法

1.2.1 尿蛋白定性实验 留取患者晨尿，用桂林优利特-500（URIT-500）尿液分析仪和与之配套的尿11项试纸条检测尿蛋白定性试验，尿蛋白（+）～（++++）为阳性。

1.2.2 尿蛋白定量实验 留取患者晨尿，离心后取上清液；用免疫比浊法在贝克曼DXC800上检测尿蛋白四项指标的水平，使用四川新健康成生物股份有限公司的α1-微球蛋白（α1-MG）测定试剂盒、β2-微球蛋白（β2-MG）测定试剂盒、转铁蛋白（TRF）测定试剂盒及MA测定试剂盒进行检验，严格按照说明书操作。

1.3 统计学方法 所有数据用SPSS 20.0统计软件进行方差分析，计量资料用均数±标准差（x±s）表示，组间的两两比较用t检验，P＜0.05表示差异有统计学意义。

2 结果

2.1 两组患者和健康体检者的尿微量蛋白4项水平测定结果比较 2型糖尿病不论蛋白定性阴性组还是阳性组患者的MA、TRF、α1-MG及β2-MG水平都明显高于正常对照组（均P＜0.05）；而且蛋白定性阳性组患者的MA、TRF、α1-MG及β2-MG水平又显著高于蛋白定性阴性组患者（P＜0.01）。见表1。

2.2 4项尿微量蛋白单项及联合检测阳性率 单项检测MA、TRF、α1-MG及β2-MG的阳性诊断率分别为41.5%、44.6%、38.5%、33.8%，多项联合检测的阳性率比单项检测有不同程度的增高，4项指标联合检测的阳性诊断率最高，达到90.8%。见表2。

表1 尿蛋白阳性或阴性两组患者和正常对照组的尿微量蛋白4项测定结果

表1 尿蛋白阳性或阴性两组患者和正常对照组的尿微量蛋白4项测定结果

注：与正常对照组比较，aP＜0.01，bP＜0.05；与蛋白阴性组比较，cP＜0.01

表2 65例2型糖尿病患者4项尿微量蛋白单项检测及联合检测的阳性率

3 讨论

MA在早期DN的诊断中很重要且是判断DN预后的重要指标，DN、高血压肾病等会造成肾脏的固有细胞损伤，使肾脏固有细胞结构发生改变，功能随结构变化而变化，所以尿液中会检测到MA。正常时滤过膜表面覆盖一层带负电荷的蛋白多糖，使白蛋白等带负电荷的较大分子不易通过，一旦有肾小球病变，肾小球滤过膜中的电荷屏障将受到一定影响，滤出携带负电荷的蛋白质增多而出现蛋白尿。

有研究指出利用一个时间段多次筛检出患者尿白蛋白阳性，对于判断DN早期肾损伤有重要意义［1］。高科等［2］研究认为MA在早期DN组和临床DN组比在单纯糖尿病组及健康对照组均明显增高，且异常率随着患者肾脏损伤程度的加重不断升高，说明在肾损伤早期即已有尿MA经肾小球滤出。翟凯齐等［3］的研究显示尿MA可作为预测过敏性紫癜（HSP）患儿早期肾损伤的敏感指标。李东千［4］研究显示，随着糖尿病病程的增加，患者尿MA阳性检出率呈现明显上升趋势；病程长达20年以上的患者，尿MA检测的阳性率可达100%。可见随着糖尿病患者病程的延长，肾小球的损害日益加重，尿MA也不断增多。TRF的等电点高出白蛋白一个单位，故能更敏感地反映电荷屏障受损。翟玉娥等［5］应用受试者工作特征曲线（ROC曲线）对210例糖尿病患者进行研究评价，结果显示尿TRF与尿MA水平呈显著正相关，尿TRF诊断DN的曲线下面积（AUC）为0.721，认为尿TRF可作为DN的早期诊断标志物。本研究结果显示，2型糖尿病蛋白定性阴性组及阳性组患者的MA、TRF均明显高于对照组，差异比较具有统计学意义，蛋白定性阳性组患者的MA、TRF水平又显著高于蛋白定性阴性组患者，差异比较也具有统计学意义。说明2型糖尿病患者容易出现早期肾损害，而且MA、TRF的排出量随着肾小球的损害程度加重而增多。

α1-MG是肝细胞和淋巴细胞产生的一种糖蛋白，相对分子质量为26 000～33 000，α1-MG有游离型及与免疫球蛋白结合型、白蛋白结合型，结合型不能通过肾小球滤膜，而游离型可自由透过肾小球滤膜，原尿中α1-MG绝大部分被肾小管重吸收降解，正常人尿中含量极微。而糖尿病的肾小管早期由于炎症、缺血等使肾小管上皮细胞结构受到破坏，从而使近曲小管重吸收α1-MG的能力降低，尿中α1-MG含量增高。王锋等［6］检测60例DN患者（又分微量蛋白尿组、临床蛋白尿组、肾功能不全组，每组20例）尿液α1-MG对DN小管间质病变的诊断价值，并与20例正常对照组对比分析，结果显示微量蛋白尿组、临床蛋白尿组、肾功能不全组的尿液α1-MG水平均显著高于对照组（均P＜0.01），且尿液α1-MG与血肌肝（SCr）呈正相关，相关系数＝0.37（P＜0.01），提示检测尿液α1-MG水平可判断DN的小管间质损害。

β2-MG是由人体有核细胞，特别是淋巴细胞和肿瘤细胞产生的一种小分子球蛋白，相对分子质量仅为118 000，β2-MG可以从肾小球自由滤过，约99.9%被近端肾小管上皮细胞重吸收并分解破坏，故而正常情况下β2-MG由尿排出的量极低。若肾小管上皮细胞受损影响了重吸收功能，β2-MG排泄率增加，如糖尿病、急性肾小管损伤或坏死、慢性间质性肾炎、慢性肾功能衰竭（CRF）、肾移植排斥反应期等。徐泳等［7］研究认为C肽和β2-MG等肾脏相关蛋白水平可反映糖尿病肾损伤情况，且对于临床治疗的监测也具有重要价值。李孟兰等［8］通过研究多项生化指标在166例2型糖尿病患者早期肾损伤中的诊断价值，发现DN早期患者及糖尿病患者尿中的β2-MG含量均明显高于正常对照组患者，差异均有统计学意义（均P＜0.05），提示尿β2-MG是DN患者早期肾损伤的良好指标。本研究结果显示，2型糖尿病蛋白定性阴性组及阳性组患者的α1-MG、β2-MG水平均明显高于对照组，同时蛋白定性阳性组患者的α1-MG及β2-MG水平又显著高于蛋白定性阴性组患者，差异均具有统计学意义。可见在DN肾小管损害早期时，α1-MG及β2-MG水平已明显升高，尿α1-MG及β2-MG可作为诊断DN早期肾损害的敏感指标。

本研究结果显示，尿蛋白定性阳性组及阴性组患者的尿MA、TRF、α1-MG及β2-MG水平比健康对照组均明显升高，且尿蛋白定性阳性组又明显高于尿蛋白定性阴性组。可见在DN早期，肾小球及肾小管都有可能受到损害，而且患者肾脏功能受损程度越严重，其尿MA、TRF、α1-MG及β2-MG水平升高就越明显。表2结果显示，单项检测MA、TRF、α1-MG及β2-MG的阳性诊断率分别为41.5%、44.6%、38.5%、33.8%，多项联合检测的阳性率比单项检测有不同程度的增高，4项指标联合检测的阳性诊断率最高，达到90.8%。说明检测MA、TRF、α1-MG及β2-MG水平对诊断DN患者早期肾损害及判断其肾受损部位和受损程度均有一定的参考价值，联合检测这4项指标可明显提高DN患者早期肾损害的诊断率，减少漏诊。

综上所述，尿MA、TRF、α1-MG及β2-MG水平可作为诊断DN患者早期肾损伤较敏感的指标，4项指标联合检测有助于提高DN早期肾损伤的诊断率，并对患者肾脏受损部位的判断及病情监测均有一定的临床应用价值。

1 刘蕊.尿白蛋白检测的临床应用及注意的问题［J］.实用检验医师杂志，2014，6（3）：129-132.

2 高科，陶娟，范宁，等.联合检测三种生化指标对糖尿病肾病早期诊断的临床价值分析［J］.现代检验医学杂志，2016，31（4）：117-120.

3 翟凯齐，张丽娜，张汉涛.血清胱抑素C与尿微量白蛋白联合检测在儿童过敏性紫癜早期肾功能损伤中的临床价值［J］.实用检验医师杂志，2015，7（2）：97-99.

4 李东千.尿微量白蛋白检测在早期糖尿病肾病诊断中的应用价值［J］.四川医学，2013，34（7）：1083-1084.

5 翟玉娥,李慧,郑红英，等.不同尿蛋白成分测定对早期糖尿病肾病的诊断价值[J].青岛大学医学院学报，2013，49（6）：539-541.

6 王锋，高许萍，汪年松.尿液α1-微球蛋白测定对糖尿病肾病小管间质病变的诊断价值［J］.海南医学，2011，22（22）：114-115.

7 徐泳，姜大勇，毛志华.探讨C-肽及肾脏相关蛋白对糖尿病肾病患者早期诊断的临床意义［J］.实用检验医师杂志，2014，6（3）：168-172.

8 李孟兰，童华诚，沈亚芳.多项生化指标联合检测在糖尿病肾病中的诊断价值［J］.检验医学与临床，2015，12（5）：633-635.

Diagnostic value of four urinary microalbumins detection in early diabetic nephropathy

Li Yan, Zhang Jiaming, Zhuo Shaoxian, Huang Caiyun.
Central People's Hospital of Zhanjiang, Zhanjiang 524037, Guangdong, China

ObjectiveTo investigate the diagnostic value of urine mircroalbumin (MA), transferritin(TRF), α1-microglobulin (α1-MG) and β2-mircroglobulin (β2-MG) for early diabetic nephropathy (DN).MethodsThe 65 diabetic patients were divided into positive group and negative group according to the experiment of urine micro protein qualitative. The levels of urine MA, TRF, α1-MG and β2-MG in 65 diabetic patients were measured by immunoturbidimetry. Levels of 30 healthy people were compared as the control group.ResultsIn the positive group and negative group, the levels of urine MA (mg/L: 28.6±4.4, 11.3±1.9 vs. 6.9±1.1), TRF (mg/L:3.5±0.9, 1.3±0.4 vs. 1.1±0.3), α1-MG (mg/L: 28.1±6.3, 9.4±2.0 vs. 8.2±1.9) and β2-MG (mg/L: 4.77±0.71,1.58±0.39 vs. 0.94±0.22) were higher than those of the control group; and the levels of the positive group were also higher than negative group (all P ＜ 0.05). The positive rate was MA 41.5%, TRF 44.6%, α1-MG 38.5% and β2-MG 33.8%. Total positive rate of combined detection of the four indicators was 90.8%.ConclusionMA,TRF, α1-MG and β2-MG in urine were sensitive indicators for early diagnosis of DN. Diagnosis with the four together might raise the positive rate of early diagnosis and evaluate the severity of the disease.

Urinary microalbumins; Diabetic nephropathy; Early diagnosis

2017-06-17）

（本文编辑：杨程伍 李银平）

524037 广东湛江，湛江中心人民医院

李艳，Email：liyan3157213@163.com

10.3969/j.issn.1674-7151.2017.03.009

Corresponding author: Li Yan, Email: liyan3157213@163.com