奥美沙坦酯对冠心病并发糖尿病患者血管内皮细胞功能的影响

李 彬，晋 群

（济南军区总院心内科，济南250000）

·论著·

奥美沙坦酯对冠心病并发糖尿病患者血管内皮细胞功能的影响

李 彬，晋 群

（济南军区总院心内科，济南250000）

目的 探讨奥美沙坦酯对冠状动脉粥样硬化性心脏病（冠心病）并发糖尿病患者血管内皮细胞功能的影响。方法 选取符合条件的126例冠心病患者作为试验组。依据血糖浓度分为3组：单纯冠心病组（C，n=42）；冠心病并发糖耐量异常组（CA，n=42）；冠心病并发糖尿病组（CD，n=42）。每组均依据随机数字法均分为A、B两亚组，A亚组给予常规方法治疗；B亚组在A亚组的基础上给予奥美沙坦酯40 mg/d口服进行治疗。治疗后3个月，对比各组血管内皮细胞功能指标变化。结果 （1）药物治疗前，CA组、CD组的一氧化氮浓度均显著高于C组，差异有统计学意义（均P＜0.05）；CA组、CD组内皮素-1浓度显著低于C组，差异有统计学意义（P＜0.05，P＜0.01）。（2）药物治疗后，CA-A亚组、CD-A亚组的一氧化氮浓度较药物治疗前显著升高，差异有统计学意义（均P＜0.05）；而内皮素-1浓度较用药前均显著降低，差异有统计学意义（均P＜0.05）。（3）药物治疗前，CA组、CD组的外周血内皮祖细胞（endothelial progenitor cell，EPC）数量均显著低于C组，差异有统计学意义（均P＜0.05）；药物治疗后，CA-A亚组、CD-A亚组的EPC数量较用药前显著升高，差异有统计学意义（均P＜0.05）。结论 冠心病患者并发糖尿病或糖耐量异常会加重血管内皮的损害。奥美沙坦酯可有效提高高血糖冠心病患者外周血EPC数量，能够抑制血管内皮舒缩因子，具有血管内皮保护作用。

冠状动脉疾病；内皮素-1；一氧化氮；外周血；内皮祖细胞

随着社会经济及生活水平的快速发展，近年来我国冠状动脉粥样硬化性心脏病（coronary heart disease，CHD）的发病率也逐年增加，目前已成为威胁我国人民健康的主要疾病之一［1］。糖尿病（diabetes mellitus，DM）是临床常见的代谢性疾病，对人们健康的程度危害程度不低于CHD［2］。糖耐量异常（impaired glucose tolerance，IGT）是指患者的血糖浓度高于正常者，而低于DM的诊断标准的现象，存在很大可能发展为2型DM，是一种潜在的DM［3］。研究表明，血糖浓度较高的CHD患者较单纯CHD动脉粥样硬化病变程度更重，病情也更为严重［4］。临床研究发现，动脉粥样硬化的始动因素是血管内皮细胞损伤，而内皮细胞损伤的两个重要表现分别是血管张力调节障碍和外周血内皮祖细胞（endothelial progenitor cell，EPC）数量改变［5］。奥美沙坦酯是一种新型高选择性血管紧张素受体拮抗剂（angiotensin receptor block⁃ade，ARB），能够减轻血管内皮氧化应激以及改善DM患者的胰岛素抵抗等疗效［6］，但尚不清楚奥美沙坦酯是否能够保护并发DM的CHD患者的血管内皮功能。本研究旨在探讨奥美沙坦酯对CHD并发DM患者血管内皮细胞功能的影响，以期为临床用药提供指导意见。

1 资料和方法

1.1 一般资料

选取既往有明确心肌梗死病史或经冠状动脉计算机断层扫描（CT）及冠状动脉造影术确诊为CHD的患者126例作为试验组。所有患者均知情自愿，愿意配合本次研究，并签订知情同意书。入选标准：（1）年龄在35～75岁；（2）CHD诊断标准参照1979年世界卫生组织的CHD诊断标准［7］；（3）DM诊断标准参照1999年世界卫生组织（WHO）提出的 DM 诊断标准［8］；（3）IGT诊断标准：空腹血糖（FPG）＜7.0 mmol/L，口服糖耐量试验2 h血糖（OGTT 2 h PG）7.8～11.1 mmol/L。排除标准：（1）心功能不全经评定为纽约心脏协会（NYHA）Ⅲ～Ⅳ级的患者；（2）左心室射血分数＜40%；（3）急性心肌梗死或脑血管疾病发作时间窗在过去的3个月以内；（4）有严重的肝、肾、肺功能损害；（5）心肌炎、心肌病、感染性心内膜炎等心脏疾病；（6）妊娠；（7）低血压、高血压危象、酮症酸中毒、高血糖高渗状态；（8）恶性肿瘤；（9）严重感染、免疫性疾病、近期服用噻唑烷二酮药物（TZDs）及贝特类等药物；（10）有ARBs使用禁忌者；（11）服用干预药物后血压严重下降及依从性差的患者。

1.2 基线资料采集

采集入选患者的基本临床信息，如年龄、性别、身高、体质量、吸烟史、CHD史、DM史以及其他疾病史等，检测患者的血清三酰甘油、低密度脂蛋白胆固醇、高密度脂蛋白胆固醇、空腹血糖及餐后2 h血糖浓度。

1.3 研究分组

依据血糖浓度将患者分为3组：（1）单纯CHD组（C组，n=42）；（2）CHD并发IGT组（CA组，n=42）；（3）CHD并发DM组（CD组，n=42）。每组依据患者知情自愿原则，按随机数字法再均分为2个亚组：A亚组给予奥美沙坦酯治疗和B亚组没有给予奥美沙坦酯治疗。

1.4 主要试剂

奥美沙坦酯片（批号：国药准字H20060371，上海三共制药有限公司）；一氧化氮（nitric oxide，NO）试剂盒（批号：20061105，南京建成生物工程研究所）；内皮素 1（endothelin-1，EF-1）试剂盒（批号：国药准字S10950212，北京普尔伟业生物科技有限公司）；PerCP-Cyanine 5.5标记抗人CD45抗体；FITC标记抗人 CD34抗体；PE标记抗人CD133抗体（美国eBioscience公司）；人外周血淋巴细胞分离液（北京索莱宝科技有限公司）；磷酸盐缓冲液（PBS）。

1.5 主要仪器

湘仪离心机仪器有限公司；超低温冰箱［902-ULTS，美国Thermo（赛默飞）公司］；全自动生物化学分析仪（AU680，美国贝克曼库尔特公司）；全自动酶标仪（AMR-100，杭州奥盛仪器有限公司）；流式细胞仪（Cytomics FC 500，美国贝克曼库尔特公司）。

1.6 治疗方案

（1）基础治疗方案：入选患者均口服拜阿司匹林肠溶片（拜耳公司）100 mg/d，美托洛尔（阿斯利康公司）25 mg/d，阿托伐他汀钙（辉瑞公司）20 mg/d。（2）A亚组：口服奥美沙坦酯20 mg/d，若血压依然过高，可加用钙通道阻滞剂，若血压过低出现头晕、乏力等临床症状时则立即停药，退出试验。（3）B亚组：依据患者的血压水平及临床经验选用适量的钙通道阻滞剂使血压达标，避免应用血管紧张素转换酶抑制剂或其他ARB类药物。（4）降压目标：血压处于140/80 mmHg（1 mmHg=0.133 kPa）以下。（5）降糖目标：依据临床经验以及患者之前的降糖方案，尽量使血糖达标。

1.7 血管舒缩活性因子测定

按照酶联免疫吸附试验（ELISA）试剂盒说明书方法进行具体血管舒缩活性因子（vasomotor ac⁃tivity factor，VAC）测定的操作，分别于用药前及用药后3个月检测各组患者血清中NO和ET-1的浓度，计算NO/ET-1比值，比较用药前后两组数值变化。

1.8 外周血内皮祖细胞检测

分别于用药前及用药后3个月复查时检测各组患者外周血EPC的数量，并比较用药前后两组数值的变化。具体操作方法如下：静脉抽血分离外周血淋巴细胞，200 μL磷酸盐缓冲液重悬细胞，加入CD45、CD34、CD133三种抗体避光孵育30 min。流式细胞仪检测，通过CD45+圈选细胞群中单个核细胞散点区，分析所圈选的单个核细胞，计算EPC（CD34+和CD133+双阳性）占外周血单个核细胞的百分率。

1.9 统计学分析

本研究所得实验数据均使用SPSS 21.0软件包进行统计学分析。计量资料采用（±s）表示，不同组间同一指标的比较采用单因素方差分析；同一组样本入选时及治疗3个月后的差异采用配对样本t检验。以P＜0.05表示差异有统计学意义。

2 结果

2.1 各组临床资料比较

各组患者的基本信息比较，均差异无统计学意义（P＞0.05）；各组性别比较，差异无统计学意义（男：52.4%（22/42）vs.50.0%（21/42）vs.54.8%（23/42），P＞0.05）；各组血压比较，差异无统计学意义（P＞0.05）；CA组和CD组血脂浓度显著高于C组，差异有统计学意义（P＜0.05）；CD组餐后2 h血糖浓度均显著高于C组和CA组，差异有统计学意义（P＜0.05）；详见表1。

表1 各组临床资料比较 ［n=42，±s］

表1 各组临床资料比较 ［n=42，±s］

注：与C组比较，*P＜0.05，**P＜0.01；与CA组比较，1）*P＜0.05

项目年龄（岁）体质指数（kg/m2）收缩压（mmHg）舒张压（mmHg）三酰甘油（mmol/L）低密度脂蛋白胆固醇（mmol/L）高密度脂蛋白胆固醇（mmol/L）空腹血糖（mmol/L）餐后2 h血糖（mmol/L）C组60.45±6.23 25.32±1.22 150.34±12.36 96.34±10.22 1.32±0.02 2.11±0.12 1.14±0.04 5.23±0.32 6.54±0.36 CA组61.02±6.44 26.18±1.36 152.38±13.46 98.94±9.87 1.54±0.06*2.67±0.12*1.25±0.05 6.14±0.46*9.45±0.64*CD组60.98±6.36 25.98±1.43 151.89±12.97 97.65±10.32 1.63±0.11*2.88±0.15*1.22±0.03 8.34±0.68**，1）*14.98±0.54**，1）*

2.2 各组外周血内皮祖细胞数量比较

（1）药物治疗前：CD组外周血EPC数量最少，CA组次之，C组最多，组间比较差异均具有统计学意义（均P＜0.05）；各组的亚组间外周血EPC数量比较，差异无统计学意义（均P＞0.05）。（2）药物治疗后：CA-A亚组和CD-A亚组外周血EPC数量明显高于药物治疗前，差异有统计学意义（均P＜0.05）；而C-A亚组、C-B亚组、CA-B亚组以及CDB亚组的外周血EPC数量与用药前比较，差异无统计学意义（均P＞0.05）。各组用药前、后外周血EPC数量比较，详见表2。

表2 各组用药前、后外周血EPC数量比较 ［%，n=42，±s］

表2 各组用药前、后外周血EPC数量比较 ［%，n=42，±s］

注：与C组比较，*P＜0.05，**P＜0.01；与同组A亚组比较，1）*P＜0.05；与同组用药前比较，2）*P＜0.05

时间点药物治疗前药物治疗后C组C-A亚组0.586±0.121 0.632±0.088 C-B亚组0.477±0.096 0.565±0.102 CA组CA-A亚组0.116±0.082*0.432±0.0942）*CA-B亚组0.124±0.076*0.188±0.1021）*CD组CD-A亚组0.045±0.102*0.386±0.0722）*CD-B亚组0.047±0.093*0.065±0.1021）*

2.3 各组血管内皮舒缩因子比较

（1）药物治疗前：CA组及CD组的NO浓度均显著低于C组，而EF-1浓度则显著高于C组，NO/EF-1的比值显著低于C组，CD组的以上3项指标变化较CA组更为显著，差异均有统计学意义（均P＜0.05）；各组的亚组间NO、ET-1浓度以及NO/ET-1比值比较，差异无统计学意义（均P＞0.05）。（2）药物治疗后：CD-A亚组和CA-A亚组较药物治疗前NO浓度升高，ET-1浓度降低，NO/ET-1比值升高，差异均有统计学意义（均P＜0.05）；C-A亚组、C-B亚组、CD-B亚组和CAB亚组的血管内皮舒缩因子指标与用药前比较，差异无统计学意义（均P＞0.05），数据详见表3。

表3 各组血管内皮舒缩因子比较 ［n=42，±s］

表3 各组血管内皮舒缩因子比较 ［n=42，±s］

注：与C组比较，*P＜0.05，**P＜0.01；与同组A亚组比较，1）*P＜0.05；与同组用药前比较，2）*P＜0.05

指标NO（μmol/L）EF-1（ng/L）NO/EF-1用药前用药后用药前用药后用药前用药后C组C-A亚组27.58±1.76 29.73±1.46 86.34±3.62 85.32±3.18 0.343±0.018 0.348±0.012 C-B亚组30.23±1.65 28.64±1.24 84.59±3.47 86.26±3.39 0.357±0.026 0.332±0.018 CA组CA-A亚组25.79±1.96*29.34±1.892）*92.65±3.84*86.72±3.622）*0.278±0.023*0.338±0.022c CA-B亚组25.43±1.98*25.66±2.061）*91.94±4.05*91.42±3.421）*0.277±0.032*0.281±0.0151）*CD组CD-A亚组20.75±1.75**26.58±1.492）*99.23±4.25**93.75±4.372）*0.210±0.033**0.262±0.0212）*CD-B亚组21.37±2.08**20.63±1.521）*98.87±3.34**98.37±3.591）*0.216±0.032**0.207±0.0221）*

3 讨论

血管内皮细胞是形成血管内壁的活跃的内分泌细胞，可分泌多种生物活性物质，如NO会刺激血管平滑肌形成环磷酸鸟苷，导致平滑肌松弛，血管扩张，进而调节器官的血压和血流量，能够保护血管，最终延缓动脉粥样硬化进程；ET-1会与受体结合后，引起血管平滑肌的强烈收缩，导致组织缺血缺氧，最终损伤内皮细胞［9-10］。NO和ET-1是内皮细胞分泌的一对重要的血管舒缩因子，两者具有拮抗作用，对维持血管正常的舒缩有重要的意义［4］。临床研究表明，高血糖会加重患者血管内皮的氧化应激水平，导致血管收缩、发生炎症以及形成血栓，最终加重内皮功能障碍［11-12］。内皮功能障碍是CHD患者动脉粥样硬化初期的重要病理表现，因而高血糖可能对CHD患者动脉粥样硬化起着重要的推动作用。谢振宏等［13］通过检测不同时点冠状动脉痉挛患者心肌灌注显像负荷试验的NO、ET-1浓度以及NO/ET-1比值动态变化，发现心肌血流灌注改变会导致内皮细胞功能紊乱。本研究通过对比单纯CHD与并发DM或IGT的CHD患者血清NO和ET-1浓度，发现并发高血糖患者血管舒张因子NO浓度较高，同时收缩因子EF-1浓度降低，NO/ET-1比值较高，说明高血糖会加重NO和ET-1浓度失衡，加重血管痉挛，使内皮细胞缺血缺氧，导致内皮细胞损伤，与前人研究结果一致。

EPC可促进内皮细胞修复，促进血管内皮新生，保持血管内皮的完整性，延缓CHD动脉粥样硬化进程［14］。本研究结果显示并发DM的CHD患者外周血EPC数量明显少于单纯CHD，CHD并发IGT患者的EPC数量同样少于单纯CHD患者。奥美沙坦酯是一种新型的ARB，具有较好的疗效，目前已经被广泛应用于临床治疗高血压。最近研究表明，奥美沙坦酯可以明显降低高血压患者的高敏C反应蛋白、白细胞介素-6等炎症因子，同时还可通过增加血管紧张素转换酶2的表达，促进血管紧张素（1～7）的生成，最终改善患者的心血管效应［15］。本研究结果显示，奥美沙坦酯可提高并发CHD的高血糖患者NO浓度，降低ET-1浓度，提高NO/ET-1比值，同时增加外周血EPC数量，说明奥美沙坦酯可能具有维持血管舒缩平衡，加快血管内皮修复，增加抵抗外界刺激的保护作用。但奥美沙坦酯的具体作用机制还需进一步的研究。

［1］ 白洁，孟军，蔡泽民，等.高脂蛋白（a）的冠心病患者内皮祖细胞功能受损［J］.中国动脉硬化杂志，2015，23（4）：384-388.

［2］ BĂDULESCU O，BĂDESCU C，CIOCOIU M，et al.Interleu⁃kin-1-beta and dyslipidemic syndrome as major risk factors for thrombotic complications in type 2 diabetes mellitus［J］.Medi⁃ators Inflamm，2013，2013（5）：63-72.

［3］ 吴茂红，吕玲.糖耐量异常对冠心病患者氧化应激和血管内皮功能、心率变异性的影响及阿卡波糖的干预作用［J］.中国动脉硬化杂志，2014，22（3）：287-292.

［4］ GUAN Q，LIU W，LIU Y，et al.High glucose induces the re⁃lease of endothelin-1 through the inhibition of hydrogen sulfide production i1n HUVECs［J］.Int J Molec Med，2015，35（3）：810.

［5］ BORILOVA L P，KASTOVSKY J，LUCANOVA S，et al.Inter⁃leukin-17A gene variability in patients with type 1 diabetes mellitus and chronic periodontitis：its correlation with IL-17 levels and the occurrence of periodontopathic bacteria［J］.Med Inflamm，2016，2016（4）：1-9.

［6］ 丁明超，邢辉，杨娅丽.奥美沙坦对高血压患者颈动脉内膜中层厚度及血管内皮功能的影响［J］.中国临床药理学杂志，2010，26（8）：573-576.

［7］LISTED N.The lipid research clinics coronary primary preven⁃tion trial results.I.Reduction in incidence of coronary heart dis⁃ease［J］.JAMA，1984，251（3）：351.

［8］ 钱荣立.关于糖尿病的新诊断标准与分型［J］.中国糖尿病杂志，2000，8（1）：5-6.

［9］ DU Q，WU B，WANG Y J，et al.Comparative effects of sita⁃gliptin and metformin in patients with type 2 diabetes mellitus：a meta-analysis［J］.Curr Med Res Opin，2013，29（11）：1487.

［10］ FAVERO G，PAGANELLI C，BUFFOLI B，et al.Endotheli⁃um and its alterations in cardiovascular diseases：life style in⁃tervention［J］.Biomed Res Int，2014，2014（2）：801896.

［11］ HAZMAN O.Effects of oral anti-diabetic agent sitagliptin on to⁃tal antioxidant and oxidant status in rats with type 2 diabetes mellitus［J］.J Applied Biolog Sci，2014，8（1）：31-37.

［12］ LIXANDRU D，BACANU E V，VIRGOLICI B，et al.Changes in the serum proinflammatory cytokines in patients with elevat⁃ed HOMA-IR and type 2 diabetes mellitus［J］.Farmacia，2015，63（1）：132-139.

［13］ 谢振宏，向定成，张金赫，等.冠状动脉痉挛患者201Tl心肌灌注显像反向再分布与血管内皮功能紊乱的关系［J］.中国循环杂志，2010，25（4）：263-266.

［14］ YAZDANI S K，NAKANO M，OTSUKA F，et al.Accelerating endothelialization of coronary stents by capturing circulating en⁃dothelial progenitor cells［J］.Int Cardiol，2017，4（2）：169-181.

［15］ ABDALHASEEB M M，ZAITONE S A，ABOUELELA S H，et al.Olmesartan potentiates the anti-angiogenic effect of sorafenib in mice bearing ehrlich's ascites carcinoma：role of angiotensin（1-7）［J］.PLoS ONE，2014，9（1）：e85891.

Effect of olmesartan on the function of vascular endothelial cells in patients with coronary heart disease complicated with diabetes mellitus

LI Bin，JIN Qun
（Department of Cardiology，General Hospital of Ji'nan Military Area Command ，Jinan 250000，China）

ObjectivesTo investigate the effects of olmesartan decanone on the function of vascular endothelial cells in patients with coronary heart disease complicated with diabetes mellitus.MethodsA total of 126 patients with coro⁃nary heart disease were selected as the test group.According to the blood glucose concentration，they were divided into three groups：simple coronary heart disease group（C，n=42）；coronary heart disease with impaired glucose tolerance group（CA，n=42）；coronary heart disease with diabetes group（CD，n=42）.Each group was divided into A and B subgroups according to the random number method.Patients in A subgroup were given routine treatment and patients in B subgroup

oral administration of olmesartan palmitate 40 mg/d on the base treatment of A subgroup.After treatment for 3 months，functional indexes of vascular endothelial cells in each group were compared.Results（1）Before drug treatment，concentrations of nitric oxide in CA group and CD group were significantly higher than that in C group（P＜0.05）；concentrations of endothelin-1 in CA group and CD group were significantly lower than that in C group（P＜0.05，P＜0.01）.（2）After drug treatment，concentrations of nitric oxide in CA-A subgroup and CD-A subgroup were significantly higher than those before drug treatment（P＜0.05），while concentrations of endothelin-1 were significantly lower than those before treatment（P＜0.05）.（3）Before drug treatment，numbers of endothelial progenitor cell（EPC）in peripheral blood of CA group and CD group were significantly lower than that of C group（all P＜0.05）；After drug treatment，numbers of EPC in CA-A subgroup and CD-A subgroup were significantly higher than those before treat⁃ment（all P＜0.05）.ConclusionsCoronary heart disease patients with diabetes or impaired glucose tolerance willincrease the damage of vascular endothelium.Omeansartan ester can effectively improve the number of peripheral blood EPC in patients with hyperglycemia and coronary heart disease，which can inhibit the endothelium systolic and diastolic factors and have the protective effect of vascular endothelium.

coronary heart disease；endothelin-1；nitric oxide；peripheral blood；endothelial progenitor cell

R541.4

A

1007-9688（2017）05-0516-05

10.3969/j.issn.1007-9688.2017.05.04

李彬（1986-），男，主治医师，研究方向为心血管内科诊断和治疗。

晋群，E-mail：402803978@qq.com

2017-03-15）