血清淀粉样蛋白A和基质金属蛋白酶3与强直性脊柱炎疾病活动相关性的研究

马 丹，侯睿宏，高晋芳，张莉芸，许 珂，张改连

（山西大医院风湿免疫科，山西 太原 030032）

血清淀粉样蛋白A和基质金属蛋白酶3与强直性脊柱炎疾病活动相关性的研究

马 丹，侯睿宏，高晋芳，张莉芸，许 珂，张改连

（山西大医院风湿免疫科，山西 太原 030032）

目的通过检测强直性脊柱炎（AS）患者血清中的淀粉样蛋白A（SAA）和基质金属蛋白酶-3（MMP-3）的表达水平，分析其与AS疾病活动的相关性。方法 纳入AS患者72例、健康对照者20例，采用酶联免疫吸附试验法（ELISA）检测入选者血清中的SAA和MMP-3表达水平。将AS患者分为活动期（54例）与非活动期（18例），比较其SAA和MMP-3的表达差异；分析SAA、MMP-3表达水平与各疾病活动指标之间的相关性。结果 AS患者血清SAA水平显著高于健康对照组（P=0.001），MMP-3水平与健康对照组比较无显著差异（P=0.053）。活动期AS患者SAA、MMP-3检测水平明显高于非活动期（P＜0.001）及健康对照组（P＜0.001）。AS患者血清SAA水平与AS疾病活动指数（BASDAI）、AS功能指数（BASFI）、病人总体评估（pga）、脊柱炎症、AS测量指数（BASMI）、扩胸度、ESR、CRP及MMP-3呈正相关。AS患者血清MMP-3水平与basdai、basfi、ESR、CRP呈正相关。结论 AS患者血清中的SAA和MMP-3可能参与AS的发病过程，可作为预测AS疾病活动的潜在生物学标志物。

强直性脊柱炎；血清淀粉样蛋白A；基质金属蛋白酶3

强直性脊柱炎（ankylosing spondylitis，AS）是一种主要侵犯脊柱、骶髂关节及外周关节的慢性炎性疾病，准确评估病情活动对于治疗具有重要的指导意义。目前研究发现血清淀粉样蛋白A（serum amyloid A protein，SAA）和基质金属蛋白酶（matrix metalloproteinases，MMPs）广泛参与关节软骨和骨破坏[1]，可作为反映类风湿关节炎（rheumatoid arthritis，RA）疾病活动的生物标志物[2]，但是否可反映AS疾病活动，此类研究较少，且结果不尽相同。本课题采用酶联免疫吸附试验方法（ELISA）检测AS患者血清中的SAA和MMP-3水平，探讨其是否可以判断AS疾病活动，从而为预测疾病进展、评估疗效及预后提供理论依据。

1 资料与方法

1.1 一般资料

收集2015年1月～2016年1月就诊于山西大医院风湿免疫科，符合1984年修订的纽约分类标准的AS患者72例，男性58例，年龄30.99±10.32岁，病程4.15±3.74年。按照BASDAI和脊柱痛评分均≥4将AS患者分为：活动期54例，其中男性44例，年龄31.11±11.02岁，病程4.30±4.00年。非活动期18例，其中男性14例，年龄30.61±8.08岁，病程3.69±2.87年。健康对照者（NC）：20例，来自山西大医院体检中心，年龄30.21±2.14岁，男性13例。均签署知情同意书。

1.2 研究方法

1.2.1 标本采集。采集入选者静脉血2～4 ml，静置30 min后2000 r/min离心10 min，分离出血清，置-80℃保存备用。

1.2.2 实验方法。采用ELISA方法检测所有研究对象血清SAA及MMP-3水平，试剂盒购自于上海森雄科技实业有限公司，实验步骤按说明书进行。

1.3 统计学方法

2 结 果

2.1 AS患者与健康对照组血清SAA、MMP-3比较

如表1，AS患者血清SAA水平显著高于健康对照组。如表2，AS患者与健康对照组的血清MMP-3水平无显著差异。

表1 AS患者与健康对照组的血清SAA（mg/L）水平比较

表2 AS患者与健康对照组血清MMP-3（ng/ml）水平比较

2.2 活动期、非活动期AS患者与健康对照组的血清SAA、MMP-3比较

如表3，活动期AS患者的SAA水平显著高于非活动期与健康对照组（P＜0.001），而非活动期与健康对照组中的表达无显著差异（P=0.051）。

表3 活动期、非活动期AS患者与健康对照组血清SAA（mg/L）水平比较

如表4，活动期AS患者的MMP-3水平显著高于非活动期（P＜0.05）与健康对照组（P＜0.05），而非活动期与健康对照组比较无显著差异（P＞0.05）。

2.3 AS患者血清MMP-3、SAA水平与疾病活动性指标的相关性分析

如表5，血清MMP-3水平与basdai、bas fi、ESR、CRP及 SAA呈正相关。

表4 活动期、非活动期AS患者与健康对照组血清MMP-3（ng/ml）水平比较

表5 AS患者血清MMP-3（ng/ml）水平与疾病活动性指标及SAA的相关性分析

3 讨 论

MMPs在细胞外基质的降解和重塑过程中发挥重要作用，而细胞外基质成分降解是慢性炎性关节炎的病理特点。在炎症反应时，巨噬细胞和单核细胞诱导肝脏和滑膜产生如CRP、SAA等急性时相蛋白，目前临床上应用的最多的反映疾病病情活动的为CRP，而研究发现SAA与CRP比较更为敏感[2]，其在关节炎的软骨破坏中起主要作用。Gao JW[3]、武树鹏[4]发现AS患者血清MMP-3水平明显高于正常对照组。杨春花[5]却发现AS患者血清MMP-3水平与健康对照组表达相当，但其表达情况与ESR及BASDAI高度相关。Jung[6]发现AS患者的血清SAA水平明显高于正常对照组，且与basMI、ESR和CRP密切相关。

本研究发现AS患者血清MMP-3与正常对照组比较无显著差异，与杨春华报道一致，分析其原因，MMP-3至少存在着3种生物活性形式：活性MMP-3、MMP-3前体和MMP-3/组织金属蛋白酶抑制剂（TIMPs）复合物，本实验测定的是三种形式的总体，如果分别检测则可能表现出差异。研究发现血清MMP-3表达在活动期显著高于非活动期，与basdai、basfi、ESR和CRP显著相关，证实其与AS疾病活动相关。本研究发现AS患者血清SAA水平显著高于健康对照组，活动期SAA水平明显高于非活动期，且与basdai、basfi、pga、脊柱炎症、basmi、扩胸度、ESR和CRP呈正相关，与Jung等的报道相似，说明SAA参与AS发病过程，与疾病活动相关。

综上所述，血清MMP-3、SAA参与AS发生发展，与疾病活动相关，但本研究仅检测的为初次就诊的AS患者血清MMP-3及SAA水平，后续将进一步联合检测多种生物标志物，比较疾病治疗前后这些生物标志物的表达水平，将更有利于AS疾病活动性的预测、疗效的评估和监测等。

[1]Stefania M,Ada A,Daniela B,et al.Spondyloarthritis: Matrix Metalloproteinasesas Biomarkers of Pathogenesis and Response to Tumor Necrosis Factor (TNF) Inhibitors[J].Int J Mol Sci,2017,18(4):830.

[2]穆 云,魏 蔚,张福江,等.血清淀粉样蛋白A在类风湿关节炎患者体内表达的研究[J].中华风湿病学杂志,2011,15(11):783-785.

[3]Gao JW,Zhang KF,Lu JS,et al.Serum matrix metalloproteinases-3 levels in patients with ankylosing spondylitis[J].Genet Mol Res,2015,14,17068-17078.

[4]武树鹏,王 静,李 芳,等.强制性脊柱炎患者血清MMP3和IL-15水平的表达及临床意义[J].现代生物医学进展,2017,17(14):2729-2731.

[5]杨春花,黄 烽,赵绵松,等.基质金属蛋白酶-3与强直性脊柱炎疾病活动相关性研究[J].中华风湿病学杂志,2004,8(10):577-582.

[6]Jung SY,Park MC,Park YB et al.Serum amyloid a as a useful indicator of disease activity in patients with ankylosing spondylitis[J].Yonsei Med,2007,48:218-224.

R593.23

B

ISSN.2095-8242.2017.053.10383.02

山西省卫生厅科技攻关项目（2011003）

本文编辑：吴 卫