男性相关参数与精子顶体酶活性关系分析

陆文昊 陈雪君 杨欢利 诸溢扬★

近些年研究发现精子总量和活力并不能完全反映精子受精能力，精子顶体酶活性与精卵结合的受精率呈现了正相关性，所以精子的顶体酶活性也应作为评判男性生育能力的一个重要指标。本资料将从不同年龄、不同活力、不同形态回顾性分析相应的顶体酶活性，现将结果报道如下。

1 临床资料

1.1 一般资料 2015年2月至2017年2月期间在台州医院不孕与优生科就诊的217例男性患者，年龄18～50岁。婚后正常性生活＞1年未育，无外伤及遗传性疾病家族史，无性功能障碍病史，体检未发现有明显睾丸、附睾及输精管异常。另外排除女方不孕因素以及由男女双方因素造成的不育。

1.2 精液标本收集及检查 禁欲2～7 d 后手淫取精液置于干燥无菌的取精杯中，置37℃水浴箱内液化，采用计算机辅助精子分析系统（CASA），检查结果参照世界卫生组织精液分析标准第五版。

1.3 精子形态分析 采用改良巴氏染色法进行染色，采用人工在光镜下计数200个精子重复计数两次分析精子形态。根据世界卫生组织精液分析标准第五版评估，以正常形态精子率≥4%为正常组，正常形态精子率＜4%为异常组。

1.4 顶体酶测定 按照深圳华康生物医学工程有限公司顶体酶试剂盒的检查方法进行。判断标准：正常值为48.2～218.7μIU／106精子。

1.5 研究方法 按年龄分为＜31、31～35、＞35 岁三组，分别测定每组的顶体酶活性；按照世界卫生组织精液分析标准第五版PR精子＜32%为弱精症，分别测定PR＜10、10＜PR＜32、精液检查正常组的顶体酶活性；结合世界卫生组织精液分析标准第四和第五版的标准，设立形态＜4%、4%～15%、＞15%三组，比较三者的顶体酶活性。

1.6 统计学方法 采用SPSS 13.0统计软件。计量资料以（±s）表示，组间差异采用t检验，计数资料采用χ2检验。P＜0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 各年龄组顶体酶活性比较 按年龄分为＜31岁、31～35岁、＞35岁三组的顶体酶活性的平均值分别为（65.48±15.38）μIU/106精 子、（58.76±16.65）μIU/106精子、（59.83±16.25）μIU/106精子，各组间差异不显著（P＞0.05）。

2.2 不同活力组顶体酶活性比较 按精子PR＜10、10＜PR＜32、精液检查正常组的顶体酶活性三组的顶体酶活性的平均值分别为（39.06±14.01）μIU/106精子、（58.26±17.22）μIU/106精 子、（61.60±16.69）μIU/106精子，其中PR＜10与10＜PR＜32组和正常组差异显著（P＜0.05），PR＜10与 10＜PR＜32 组和正常组组间差异不显著（P＞0.05）。

2.3 不同染色形态组顶体酶活性比较 形态＜4%、4%～15%、＞15%三组顶体酶活性的平均值分别为（41.77±14.48）μIU/106精 子、（56.71±17.65）μIU/106精 子、（57.91.±18.03）μIU/106精 子， 其中形态＜4%组与4%～15%组和＞15%组差异显著（P＜0.05），4%～15%组和 ＞15% 组组间差异不显著（P＞0.05）。

3 讨论

研究数据表明，育龄夫妇的不孕不育症发病率为10%～15%，且有逐年递增的趋势。其中30%～40%为男性原因导致［1］。导致男性不育的原因有药物、烟草、毒品等外部因素以及遗传、分子突变、禁欲时间等内部因素［2-3］。精子顶体酶为特化溶解酶，相连于顶体膜，属于胰蛋白酶样丝氨酸蛋白酶，其活性高低与精子对卵母细胞的穿透能力相关［4］。顶体酶活性较低时不但会导致卵母细胞卵丘复合物分解受到影响，也会对精子穿透卵母细胞透明带产生一定影响，最终诱发男性不育［4］。临床上常采用CASA来评估男性的精液质量，但该技术并不能全面地评估男性的生育能力，尤其是无法解释不明原因的男性不育［5-6］。因此，将精子顶体酶活性测定作为评估精子质量的一项重要指标是值得推广的。

Langlois等［7］报道顶体酶活性越低，IVF受精率也越低。随后，Sharma等［8］认为，精子顶体酶活性的测定，在判定精子受精能力方面比传统的精子数量和运动能力更具客观性，而且发现了顶体酶活性与受精率之间具有正相关性。作者按年龄分为＜31、31～35、＞35岁三组检测其顶体酶活性发现各组间差异不显著（P＞0.05），这与邴晏如等［9］精子顶体酶活性在 36～50岁年龄段显著降低（P＜0.05）研究不一致。这可能与其高龄组的样本量的较少有关，随着二孩政策的放开样本量的扩充，或者更具有统计学意义。作者发现精PR＜10与10＜PR＜32组的和正常组顶体酶活性差异显著（P＜0.05），PR＜10 与 10＜PR＜32组和正常组顶体酶活性组间差异不显著（P＞0.05），这与丁锦丽等［10］、黄世若等［11］研究的结果是一致的，证明了精子质量与精子顶体酶是有正相关性的。作者同时发现形态＜4%组与4%～15%组和 ＞15% 组差异显著（P＜0.05），这与黄永汉等［12］、刘锦宏等［13］的研究是一致的，顶体酶活性与精子畸形率呈负相关，畸形率数值降低顶体酶活性亦会随之降低。

关如意等［13］发现顶体酶的低下极有可能存在精卵结合障碍，这与孙琴等［14］的研究是一致的，孙琴等发现不明原因的男方精子顶体酶活性＜36IU/106精子时，受精率仅为47.7%，鉴于较低的受精率，可避免IUI治疗，建议首选IVF。而王钦［15］等在研究中发现，当精子顶体酶活性低于＜30μIU/106时可能会出现受精率较低甚至完全不受精的情况，此时应该选择行单精子显微注射（ICSI）来避免此类现象发生。

综上所述，精子顶体酶是评估男性生育能力的一个重要指标，对男性不育症的诊断和治疗都有较高的应用价值，因此有必要将精子顶体酶活性的测定作为男性不育症的常规项目来检测，从而给临床更多的诊疗思路和参考价值。

［1］ Check JH．Treatment of male infertility．Clin Exp Obst Gynecol,2007,34(4):201．

［2］ 刘睿智,董乃屹,高元奇,等．禁欲时间对人精子顶体酶活性精子密度和精子数的影响． 中国妇幼保健,2005,20(24):3306-3307．

［3］ Chaudhury K, Das T, Chakravarty B, et al． Acrosin activity as a potential marker for sperm membrane characteristics inunexplainedmale infertility．Fertil Steril,2005,83(1):104-109．

［4］ Howes L, Jones R． Interactions between zona pellucida glycoproteins and sperm proacrosin /acrosin during fertilization． J Reprod Immunol, 2002,53(1-2):181．

［5］ 蒲江波,高建,唐雪莲．少、弱、畸形精子症患者体外精子的PR、PR+NP以及顶体酶活性在不同时间段的下降速率比较．中华男科学杂志,2015,21(8):733-736．

［6］ Chaudhury K, Das T, Chakravarty B, et al． Acrosin activity as a potential marker for sperm membrane characteristics in unexplainedmale infertility． Fertil Steril,2005,83(1):104-109．

［7］ Langlois MR, Oorlynck L, Vandekerckhove F, et al． Discrepancy between sperm crosin activity and sperm morphology: Significance for fertilization in vitro．Clin Chim Acta, 2005, 351(1-2): 121-129．［8］ Sharma R,Hogg J,Bromham DR,et al．Is spermatozoan acrosin a predictor of fertilization and embryo quality in the human．FertilSteril,2012, 60(5):881-884．

［9］ 邴晏如,莫和国,黄健云．男性不育患者精子形态与精浆锌和精子顶体酶活性关系的研究．国际检验医学杂志,2014,35(13):1708-1709．

［10］ 丁锦丽,杨菁,张怡,等．男性精子顶体酶活性与精液常规参数的相关性分析．中国性科学,2015,24(8):95-97．

［11］ 黄世若．精液多项检测参数对男性不育症的探讨．医学理论与实践,2017,30(9):1368．

［12］ 黄永汉,邓天勤,李颖嫦,等．精子形态与顶体酶活性关系分析．检验医学与临床,2009,6(9):677-680．

［13］ 刘锦宏,李小珍．男性不育症患者精液质量与精子顶体酶活性关系分析．长治医学院学报,2013,27(2):125-127．

［13］ 关如意,史中娜,任新玲,等．辅助生殖技术中原因不明性不孕患者的病因分析．中国妇幼保健,2013,28(32):5324-5327．

［14］ 孙琴,李鸿儒,梁元姣,等．精子顶体酶检测对不明原因不孕夫妇助孕治疗方案选择的临床意义．中华男科学杂志,2017,23(2):152-156．

［15］ 王钦,牛焕付,刘庄．体外短时受精周期中第二极体排出率与精子顶体酶活性关系的探讨．中国优生与遗传杂志,2015,23(5):104-106．