何首乌二苯乙烯苷类成分研究进展

张 雪

（本溪市化学工业学校，辽宁 本溪 117004）

何首乌为廖科植物何首乌干燥的根，是传统的药食同源天然植物，具有补肝肾、益精血、乌须发、强筋骨等功效。现代研究表明，何首乌中的二苯乙烯类是一种植物抗毒素，是何首乌中的有效成分之一，具有显著的抗衰老、降血脂、抗骨质疏松等作用。近年来，国内外专家针对何首乌二苯乙烯类成分的提取工艺和含量测定做了大量的研究和应用，并取得了很多有价值的研究成果。在查阅收集大量文献的基础上，综述近几年来何首乌二苯乙烯类成分的研究进展，旨在为何首乌的开发利用提供理论参考。

1 何首乌二苯乙烯苷类成分提取工艺

1.1 传统提取方法

何首乌二苯乙烯苷类成分的传统提取方法为溶剂提取法，常用介质为水、乙醇等，常用方法有煎煮法、渗漉法、回流提取法等。

唐静等通过响应面法优化何首乌二苯乙烯苷类化合物提取工艺。根据中心组合设计方法，选取温度、液料比、乙醇体积分数为自变量，二苯乙烯苷提取率为响应值，利用响应面分析方法得到回归方程的预测模型。由此确定的二苯乙烯苷提取工艺的最佳条件为：温度54℃、液料比18∶1、乙醇体积分数72%，此条件下的提取率达2.75%。

杨劝生等采用高效液相色谱法（HPLC）分析测定何首乌渗漉提取、75℃回流提取、89℃回流提取的提取液中二苯乙烯苷、蒽醌类化合物含量，并考察取液化学成分指纹图谱相似度及所得干物质。结果表明：3种提取方法的二苯乙烯苷、蒽醌类化合物含量基本接近；就蒽醌含量而言，89℃回流提取略高于渗漉提取，75℃回流提取略低于渗漉提取；供试品溶液的特征指纹图谱与共有模式的相似度均大于0.95，符合国家对药材指纹图谱研究的技术要求（大于0.9）。

1.2 现代提取方法

何首乌二苯乙烯苷类成分提取工艺包括超声波提取法、微波提取法、超临界CO2萃取法和半仿生提取法等，均具有较好的提取效果。

吴狄等采用超声波辅助乙醇提取何首乌中的二苯乙烯苷类物质，考察乙醇浓度、料液比、提取温度、提取时间和提取功率对提取率的影响。结果表明，最佳提取工艺条件为：乙醇浓度60%，料液比1∶25，提取温度65℃，提取时间1.5 h和提取功率800 W。在此条件下，二苯乙烯苷类物质的提取率达7.19%。

李敏等以何首乌为原料，采用超临界CO2萃取技术提取二苯乙烯苷，考察萃取温度、萃取压强、萃取时间和料液比等单因素对提取效率的影响，通过正交试验设计优化提取工艺条件。确定最佳工艺参数为：萃取温度 55 ℃，萃取压强 25 MPa，萃取时间 2.5 h，料液比1∶4。在此条件下进行试验验证，何首乌中二苯乙烯苷的提取效率达7.08%。

曹聘等以二苯乙烯苷提取率为评价指标，在提取温度、提取次数，提取溶剂相同的条件下，考察pH值、提取时间对何首乌半仿生提取效果的影响。用L9（34）正交试验确定的最佳提取工艺条件为：第1煎液pH 6，第2煎液pH 10，提取时间 2 h。

2 何首中乌二苯乙烯苷含量测定技术

何首乌中的二苯乙烯苷含量的测定方法有高效液相色谱法、紫外光谱法、近红外光谱法、超高效液相色谱三重四级杆串联质谱法、高效液相色谱协同指纹图谱法等。

2.1 高效液相色谱法

高效液相色谱法是中药材有效成分含量测定的常用方法，具有精密度高、分离效能高、分析速度快、检测灵敏度高等优点。

兰婷等建立以高效液相法测定何首乌水提液中二苯乙烯苷含量的方法，色谱柱为Agilent Eclipse Plus C18（100 mm×4.6 mm，3.5 μm），柱温为 25 ℃，流动相为乙腈∶水＝18∶82，流速为 1.0 ml／min，检测波长为320 nm，进样量为8 μ。二苯乙烯苷在38～237.5 μg／ml （r＝0.999 4）范围内线性关系良好，回收率为98.32%，RSD＝1.59%。

2.2 紫外光谱法

冯彦钦等用紫外分光光度法和高效液相色谱法测定何首乌中二苯乙烯苷含量，比较两种方法的准确度。UV法的检测波长为321.0 nm。HPLC法选用Symmetry C18（250 mm×4.6 mm，5 μm）色谱柱，以乙腈-水（24.3∶75.7）为流动相，流速 1.0 mL ／min，检测波长320 nm，柱温30℃。用UV法测定时，二苯乙烯苷在 5～70μg／mL 范围内线性关系良好 （r＝0.999 8），回收率 98.67%，RSD＝1.17%（n＝6）。 用 HPLC 法测定时，二苯乙烯苷在 20.30～406.40 μg／mL 范围内线性关系良好 （r＝0.999 6）， 回收率为 98.85%，RSD 为 1.71%（n＝6）。对比结果表明，这两种方法均可作为何首乌中二苯乙烯苷含量测定的方法。

2.3 近红外光谱法

近红外光谱是介于可见光和中红外之间的一种电磁波，波数范围为12 500～4 000 cm-1，该区域的光谱包含丰富的物质信息。NIRS是一种物理检测技术，具有快速、准确、简便、样品无损等特点。

贾灿潮等以近红外光谱（NIRS）法测定何首乌中的 2，3，5，4’-二苯乙烯葡萄糖苷，以 HPLC 法测定何首乌中 2，3，5，4’-二苯乙烯葡萄糖苷的含量，以TQ8.0分析软件结合化学计量学方法建立何首乌中2，3，5，4’-二苯乙烯葡萄糖苷的近红外定量分析模型。模型的内部交叉验证决定系数（R2）为0.996 65，校正均方差 （RMSEC）为 0.068 8，预测均方差（RMSEP） 为 0.074 9， 内部交叉验证均方差（RMSECV）为 0.093 67。

2.4 超高效液相色谱三重四级杆串联质谱法

超高效液相色谱-串联质谱法采用多重反应监测模式进行定量分析，对目标物质做中性碎片扫描，可解决高效液相色谱难以分离复杂体系的问题。此法具有分离效率高、峰容量大及灵敏度高等优点。

余意等建立超高效液相色谱三重四级杆串联质谱法同时测定不同产地何首乌中10种二苯乙烯苷类成分的方法，比较不同产地何首乌的成分含量差异。采用 ACQUITY UPLC BEH C18色谱柱 （2.1 mm×100 mm，1.8μm），以 0.1%甲酸水（A）-0.1%甲酸乙腈（B）溶液为流动相梯度洗脱，流速 0.5 m L／min，柱温 40℃；采用电喷雾离子源负离子检测，得到相应的提取离子流图，以峰面积进行定量。何首乌中白藜芦醇，虎杖苷，2，3，5，4’-四羟基二苯乙烯-2-O-葡萄糖苷，2，3，5，4’-四羟基二苯乙烯-2，3-O-二葡萄糖苷，2，3，5，4’-四羟基二苯乙烯-2-O-葡萄糖基-（1→6）-葡萄糖苷，2，3，5，4’-四羟基二苯乙烯-2-O-（2″-O-没食子酰基）-葡萄糖苷，2，3，5，4’-四羟基二苯乙烯-2-O-（6″-O-乙酰基）-葡萄糖苷，2，3，5，4’-四羟基二苯乙烯-2-O-（2″-O-阿魏酰基）-葡萄糖苷和2，3，5，4’-四羟基二苯乙烯-2-O-（2″-O-香豆酰基）-葡萄糖苷具有良好的线性关系（r均≥0.998 7），平均加样回收率为 96.5%～06.3%，RSD 均≤3.5%。

2.5 高效液相色谱协同指纹图谱法

李燕等采用高效液相色谱仪，在指纹图谱条件下测定20批何首乌药材中二苯乙烯苷的含量。选用色用谱柱 Ag-ilent SB-C18（5 μm，4.6 mm×250 mm），检测波长280 nm，流动相乙腈-0.4%磷酸水溶液梯度洗脱，流速 1.0 mL／min，柱温 25 ℃，分析时间 60 min。经精密度、稳定性、重复性试验考察，RSD均小于3%，平均回收率为 100.33%。

3 结语

研究者对何首乌中二苯乙烯苷类成分提取工艺和含量测定做了大量研究。二苯乙烯类成分作为何首乌的主要有效成分，其药用价值、保健价值和合理应用等需进一步深入研究，以期为何首乌资源的进一步开发利用提供理论参考。