市售不同产地鹅不食草挥发油成分分析

吕琦+黄星雨+杨琼梁+袁佳敏+高文雅+姜政+黄迎+李博杨+颜红

[摘要]目的 分析比较市售湖南、江苏、浙江三个不同产地鹅不食草中挥发油的化学成分。方法 采用水蒸气蒸馏法提取鹅不食草挥发油，通过气相色谱-质谱联用技术（GC-MS）对各个色谱峰定性，并用色谱峰面积归一法获得各化合物的相对含量。结果 湖南产地检测出77种化合物，其中主要成分有2，6，6-三甲基-二环[3.1.1]庚-2-烯-4-乙酸乙酯（35.05%）、2-甲基-2，3-醋酸酯-5-甲基-苯丙酸酯（16.52%）、（S）-2-甲基丁酸橙花酯（6.86%）、异丁酸香叶酯（5.77%）；江蘇产地检测出28种化合物，其中主要成分为2，6，6-三甲基二环[3.1.1]庚-2-烯-4-乙酸乙酯（48.40%）、4a-甲基十氢化萘-1-醇-乙酸酯（14.98%）、百里香酚（11.02%）、（E）-丁酸-3，7-二甲基-2，7-辛二烯酯（6.04%）；浙江产地检测出77种化合物，其中主要成分有2，3-二甲基苯（23.47%）、9，12，15-十八碳三烯酸（16.85%）、（Z，Z）-9，12-十八二烯酸（15.91%）、2-[（9Z，12Z）-9，12-十八碳二烯氧基]乙醇（6.44%）、（R）-（-）-（Z）-14-甲基-8-十六烯-1-醇（5.42%）。结论 GC-MS法能快速、简便、高效地检测鹅不食草挥发油的化学成分，市售不同产地鹅不食草挥发油所含成分和含量都有较大差别。

[关键词]鹅不食草；挥发油；气相色谱-质谱联用技术；成分分析

[中图分类号] R284.1 [文献标识码] A [文章编号] 1674-4721（2017）12（c）-0004-06

[Abstract]Objective To compare the chemical compounds of volatile oil from Centipeda minima in Hunan，Jiangsu and Zhejiang.Methods The volatile oil of Centipeda minima was extracted by steam distillation.The chromatographic peaks were qualitatively identified by gas chromatography-mass spectrometry （GC-MS），and the relative content of each compound was obtained by the method of peak area normalization.Results 77 compositions were identified from Centipeda minima in Hunan，and the main compositions were Bicyclo [3.1.1] hept-2-en-4-ol，2，6，6-trimethyl-，acetate （35.05%），Propanoic acid，2-methyl-，2-[3-[（acetyloxy） methyl] oxiranyl]-5-methylp-henyl ester（16.52%），Neryl （S）-2-methylbutanoate （6.86%），Geranyl isobutyrate （5.77%）.28 compositions were identified from Centipeda minima in Jiangsu，and the main compositions were Bicyclo [3.1.1] hept-2-en-4-ol，2，6，6-trimethyl-，acetate （48.40%），Acetic acid，4a-methyld-ecahydronaphthalen-1-yl ester （14.98%），Thymol（11.02%），Butanoic acid，2-methyl-，3，7-dimethyl-2，7-octadienyl ester，（E）-（6.04%）.77 compositions were identified from Centipeda minima in Zhejiang，and the main compositions were Benzene，（2，3-dimethyldecyl）-（23.47%），9，12，15-Octadecatrienoic acid （16.85%），（Z，Z，Z）-，9，12-Octadecadienoic acid（Z，Z）-（15.91%），Ethanol，2-（9，12-octadecadienyloxy）-（6.44%），（R）-（-）-（Z）-14-Methyl-8-hexadecen-1-ol（5.42%）.Conclusion GC-MS can be used to analysis the composition of volatil-e oil quickly and effectively.The Different area Centipeda minima have different compositions of volatile oil.

[Key words]Centipeda minima；Volatile oil；Gas chromatography-mass spectrometry；Component analysis

鹅不食草又称石胡妥、鸡肠草，系菊科植物鹅不食草[Centipeda minima（L.）A.Br.etAschers.]的干燥全草[1]，主产于印度平原和锡兰岛，我国大部分省份亦有种植。鹅不食草性温，味辛，归肺、肝经，具有通鼻窍、止咳、祛风散寒胜湿之效。研究报道，鹅不食草化学成分主要为挥发油、甾醇类、黄酮类、三萜类化合物等[2-3]，其具有广泛的药理作用，如抗过敏、抗炎、抗诱变、抗癌、抑菌等[4-9]，在临床用于治疗鼻炎、百日咳、结石症、外科、头痛、面瘫、平喘、痢疾等均有良好疗效[10-13]。研究显示，鹅不食草挥发油成分主要为反式乙酸菊烯酯等[14]，不同产地其挥发油的成分种类及其相对含量也存在较大差异。有研究报道采用薄层色谱鉴别鹅不食草油，用气相色谱测定其含量[15]。本文采用气相色谱-质谱联用技术（GC-MS）对市售三种不同产地鹅不食草挥发油成分进行分析，旨在探讨产地对鹅不食草挥发油成分、含量及木兰脂素含量的影响，以期为我国鹅不食草药材的资源开发提供参考，为鹅不食草中药制剂研发提供理论依据。endprint

1仪器与材料

1.1仪器

岛津GCMS-QP2010型本，GC-MS Solution色谱工作站，标准谱库为美国NIST质谱检索数据库；YP601N电子天平（上海恒平科学仪器有限公司）；KQ-500DE型数控超声波清洗器（昆山市超声仪器有限公司）；20～200 μl、200～1000 μl可调式移液器（大龙/DRAGONLAB）；AR11401C型电子天平（奥豪斯国际贸易有限公司）；挥发油測定器（上海玻璃仪器厂）；HDM-3000电子调温电热套（金坛市荣华仪器制造有限公司）。

1.2材料和试剂

湖南产地鹅不食草购自北京同仁堂，批号：2015 0601；江苏产地鹅不食草购自湖南中医药大学附属第一附属医院，批号：1311060012；浙江产地鹅不食草购自湖南千金大药房，批号：20150204；经湖南中医药大学药学院刘塔斯教授鉴定为菊科物鹅不食草[Centipeda minima（L.）A.Br.etAschers.]的干燥全草。无水硫酸钠（江苏强盛功能化学股份有限公司）；乙酸乙酯（国药集团化学试剂有限公司）；甲醇、乙腈均为色谱纯；其他试剂为分析纯；重蒸水（自制）。

2方法

2.1鹅不食草挥发油的提取

取粉粹后的鹅不食草药材200 g，加8倍量水，按《中华人民共和国药典》2015年版四部通则2204挥发油提取甲法进行提取，蒸馏5 h，收集挥发油，无水Na2SO4脱水，得浅黄色透明的挥发油，以乙酸乙酯为溶剂稀释即得供试液。

2.2 GC-MS条件

2.2.1 GC条件 RXI-5MS毛细管柱（30 m×0.25 mm，0.25 μm）；程序升温（初始温度为60℃，最终温度为260℃，保持5 min，升温速度为10℃/min）；载气为高纯He；载气流量为1.0 ml/min；恒流模式；进样量1 μl；进样口温度：230℃；柱温：60℃；分流比为50∶1。

2.2.2质谱条件 电离源为EI，电子能量为70 eV，倍增电压：800V，扫描质量范围：m/z为35～500，扫描间隔：0.25 s。

2.3样品测定

采用GC-MS质谱工作站，在“2.2”项色谱条件下进行检测，检索NIST 11.lib和NIST 11s.lib标准谱库，结合相似度和参阅相关文献，对样品成分进行定性分析并根据峰面积归一化法计算各成分的含量。

3结果与分析

3.1不同产地鹅不食草GC-MS分析结果

湖南、江苏、浙江三个不同产地鹅不食草挥发油的GC-MS分析结果见图1。三个不同产地的鹅不食草挥发油共鉴定出168种化合物，不同产地鹅不食草挥发油成分组成及含有量相差较大。

3.2不同产地鹅不食草样品中挥发性成分及相对百分含量分析

由图1及表1可知，湖南产地共检测出77种化合物，其中主要成分有2，6，6-三甲基-二环[3.1.1]庚-2-烯-4-乙酸乙酯（35.05%）、2-甲基-2，3-醋酸酯-5-甲基-苯丙酸酯（16.52%）、（S）-2-甲基丁酸橙花酯（6.86%）、异丁酸香叶酯（5.77%）等；江苏产地鉴定出28种化合物，其中主要成分为2，6，6-三甲基二环[3.1.1]庚-2-烯-4-乙酸乙酯（48.40%）、4a-甲基十氢化萘-1-醇-乙酸酯（14.98%）、百里香酚（11.02%）、（E）-丁酸-3，7-二甲基-2，7-辛二烯酯（6.04%）等；浙江产地检测出77种化合物，其中主要成分有2，3-二甲基苯（23.47%）、9，12，15-十八碳三烯酸（16.85%）、（Z，Z）-9，12-十八二烯酸（15.91%）、2-[（9Z，12Z）-9，12-十八碳二烯氧基]乙醇（6.44%）、（R）-（-）-（Z）-14-甲基-8-十六烯-1-醇（5.42%）等。结果显示，湖南产地与江苏产地鹅不食草挥发油成分中含量最高均为2，6，6-三甲基-二环[3.1.1]庚-2-烯-4-乙酸乙酯，此结果与文献报道结果相一致。浙江产地鹅不食草挥发油也含有2，6，6-三甲基-二环[3.1.1]庚-2-烯-4-乙酸乙酯，但是含量较低。

4讨论

通过鹅不食草挥发油成分分析发现，湖南和江苏产地的鹅不食草挥发油最主要成分均为2，6，6-三甲基-二环[3.1.1]庚-2-烯-4-乙酸乙酯，浙江产地的鹅不食草挥发油最主要成分为2，3-二甲基苯。三种产地的鹅不食草挥发油其他主要成分有较大差异，湖南产地为2-甲基-2，3-醋酸酯-5-甲基-苯丙酸酯（16.52%）、（S）-2-甲基丁酸橙花酯（6.86%）、异丁酸香叶酯（5.77%）等，江苏产地为4a-甲基十氢化萘-1-醇-乙酸酯（14.98%）、百里香酚（11.02%）、（E）-丁酸-3，7-二甲基-2，7-辛二烯酯（6.04%）等，浙江产地为2，3-二甲基苯（23.47%）、9，12，15-十八碳三烯酸（16.85%）、（Z，Z）-9，12-十八二烯酸（15.91%）、2-[（9Z，12Z）-9，12-十八碳二烯氧基]乙醇（6.44%）、（R）-（-）-（Z）-14-甲基-8-十六烯-1-醇（5.42%）等。三者共有成分仅2种，为2，6，6-三甲基-二环[3.1.1]庚-2-烯-4-乙酸乙酯、百里香酚。这些差异可能与其采收产地的温湿度、土壤性质等生态环境的不同有着极为密切的关系，也可能与药材采收的时间[16-17]、贮藏时间有关，有待进一步研究。本实验结果可为鹅不食草药材的开发利用及相关制剂的研究提供实验依据。

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