咽拭子肺炎支原体-DNA检测用于诊断儿童肺炎支原体肺炎的应用价值

杨芬莲 罗家怡 温海鹏 陈惠敏

（1高明区人民医院检验科 广东 佛山 528500）

（2高明区人民医院输血科 广东 佛山 528500）

肺炎支原体是导致小儿出现急性呼吸道感染的主要病原体，对患儿的身体健康造成较大威胁。支原体肺炎的早期表现多不典型，临床诊断难度较大，往往需要进行实验室检验，其中咽拭子肺炎支原体-DNA检测是近年来较为常用的方法[1]。本研究以本院2015年1月-2017年2月收治的120例儿童肺炎支原体肺炎患儿为研究对象，探析咽拭子肺炎支原体-DNA检测用于诊断儿童肺炎支原体肺炎的应用价值，现将结果作如下报道。

1.资料与方法

1.1 一般资料

将本院2015年1月-2017年2月间收治的120例儿童肺炎支原体肺炎患儿作为研究对象，120例患儿均实施咽拭子肺炎支原体-DNA检测以及肺炎支原体-IgM检测，男66例，女54例，年龄6个月～14岁（5.7±1.2）岁；33例年龄＜1岁，29例1～2岁，30例3～5岁，28例6-14岁。

1.2 方法

咽拭子肺炎支原体-DNA检测方法：于清晨患儿尚未进行口腔清洁、未进食、未饮水前（对于哺乳期的婴儿要停止纳奶2h以上）进行检验，使用无菌拭子对患儿咽部的分泌物进行采集并送检。试剂盒均由中山大学达安基因股份有限公司提供，具体检验操作方法均要依据相关说明书严格进行：向采集分泌物中加入4倍体积的灭菌生理盐水，震荡2～3次，混匀后吸取1.5ml置入离心管中进行离心处理，转速控制为12000r/min，处理时间为5min，离心完成后将上清液去除，并向沉淀中加入50μL的DNA提取液混匀后进行100℃恒温处理，时间控制在10min左右，进行离心处理，转速与时间同之前相同，取2μl进行RCR扩增。

肺炎支原体-IgM检测方法：取患儿静脉血2～3ml，以37℃保存1h，进行低速离心处理，离心时间为10min，将血清分离后进行检验。使用低效价颗粒凝集实验试剂盒，依据说明书进行操作，均设阴性、阳性对照，以滴度≥1∶80判定为阳性。

1.3 统计学处理

采用SPSS 19.0软件进行数据处理，计数资料（%）行χ2检验，显著性水平为P＜0.05。

2.结果

2.1 咽拭子肺炎支原体-DNA检测组检出阳性率87.5%（105/120）明显高于肺炎支原体-IgM检测组71.7%（86/120），（P＜0.05）。

2.2 咽拭子肺炎支原体-DNA检测不同年龄组中3～5岁组患儿的阳性检出率最高，见表1。

表1 咽拭子肺炎支原体-DNA检测不同年龄组支原体肺炎检出阳性率的比较

3.讨论

支原体肺炎患儿的临床表现多不具有典型性，临床诊断多需要进行实验室检验，目前临床应用较多的检验方法有支原体分离培养、特异性抗体检验等等，其中支原体分离培养的时间较长，在常规检验中应用并不十分广泛；冷凝集检验方法虽较为简便，但敏感性以及特异性相对较差，其阳性检验结果也可能是由流行性感冒、传染性单核细胞增多症等引发[2-3]。近年来随着临床医疗水平的不断提高，咽拭子肺炎支原体-DNA检测得以在临床推广应用，该种检验方法利用荧光定量PCR技术，不仅有效减少可扩增产物污染风险，提高检验特异性，而且也不会受到患儿年龄、病程以及用药情况的影响，临床具有较高的诊断准确性[3]。

本研究中，对120例儿童肺炎支原体肺炎患儿实施了咽拭子肺炎支原体-DNA检测以及肺炎支原体-IgM检测，结果显示前者的检验阳性率显著高于后者，另外对不同年龄段患儿咽拭子肺炎支原体-DNA检测，结果可发现3～5岁组患儿的阳性检出率最高，其次为6～14岁组。究其原因，可能与学龄前儿童在学校集体生活以及其自身免疫系统尚未发育完全等因素有关，6～14岁组患儿阳性率低于3～5岁组，可能是因为该年龄组患儿年龄增长，免疫力有所提高。

综上所述，应用咽拭子肺炎支原体-DNA检测诊断儿童肺炎支原体肺炎，准确率较高，具有较好的应用价值，可作为早期诊断小儿肺炎支原体肺炎的方法。

【参考资料】

[1]杨丽娟,许美善. 咽拭子肺炎支原体-DNA检测诊断儿童肺炎支原体肺炎的价值[J]. 中国妇幼保健,2017,32(8):1671-1673.

[2]刘香花,穆义英,赵玥,等.肺炎支原体DNA检测对儿童肺炎的诊断价值[J]. 中国卫生检验杂志,2016,26(22):3248-3249.

[3]杨文青,吕晓丽,李锐成,等.实时荧光定量PCR检测肺炎支原体DNA在小儿肺炎诊断中的应用价值[J].国际检验医学杂志，2014,35(4):416-418.