西藏藏猪血液生化指标及宰后肌肉抗氧化性能研究

徐海鹏 张 建 阿旺尼玛 加 布 格桑卓玛 李川皓 陈 伟,*曾勇庆,*

（1山东农业大学动物科技学院/山东省动物生物工程与疾病防治重点实验室，山东泰安 271000；2西藏工布江达县畜牧兽医站，西藏工布江达 860200）

藏猪是我国特有的高原型地方猪种，主要有西藏藏猪、甘孜藏猪、迪庆藏猪和合作藏猪等类群[1]；养殖区域大多位于海拔2 500 m以上的中国西藏青藏高原上的农区以及半农半林半牧区[2]。当今，因其所生长的环境以及人们的选育有所不同，藏猪的性能也有所差异；当中，西藏藏猪作为高原型原始藏猪主要分布于西藏工布江达县，其中巴河镇、朱拉乡和错高乡是西藏藏猪的中心产区[3]。因青藏高原特殊的放牧环境，适应了严酷的低温气候的藏猪具有了耐低氧、耐高寒、耐粗饲等很强的抗逆、抗氧化性能[1,4]。

动物的长期进化形成了其特别的血液生理特性，这些特性可反映其所适应的长期生长的环境，具备物种以及品种特点[2,5]。经过很长时间进化与自然选择后的高原动物具备了适应低氧的能力，在血液学上体现出的特性是氧与血红蛋白释放和结合的能力可显著加强。研究发现，为适应高原低氧环境，藏猪血液中的红细胞数、血红蛋白浓度、红细胞压积显著高于平原猪种，并且血液黏度增高[6-8]。

动物机体防御体系中抗氧化能力的强弱与其健康程度存在着密切的联系。在动物防御体系中，超氧化物歧化酶（SOD）等各成分之间相互起到了协同的作用，以及代偿与依赖作用[9]。同样，宰后肌肉的脂质氧化速度和程度取决于动物机体的抗氧化能力；因其体内具有防护作用的抗氧化酶例如SOD等活性的降低，导致其中不饱和脂肪酸的快速氧化，破坏正常生物膜功能和结构，致使肉品滴水损失的升高。因此，SOD能终止脂质氧化反应，提高肉品质，延长肉类食品的货架期[10-12]。目前，对西藏藏猪保护区内藏猪抗氧化性能的研究尚鲜见报道。为此，本文以西藏藏猪为研究内容，深入研究藏猪屠宰后肌肉与血液的总抗氧化性能、SOD活性与MDA含量的变化，目的在于研究西藏藏猪优良抗逆性的形成过程和调控机理，为藏猪遗传资源的保护和开发利用提供科学依据。

1 材料与方法

1.1 试验猪与样品采集

试验藏猪样品来自国家级藏猪遗传资源保护区工布江达县的3个藏猪群体，分别为错高乡、巴河镇与朱拉乡，每个群体随机选取6头12月龄、体况良好、体重在25 kg左右的肥育猪进行屠宰。屠宰后采集血液15 mL（非抗凝血），4500 r/min离心20 min分离血清，于-20℃存放，用于检测血液抗氧化性能和生化指标。在试验猪屠宰后1 h内，于胸腰椎连接部位分离背最长肌，取胸段背最长肌样肉样50 g左右，0～4℃保存，每隔24 h取样2～5 g，测定总抗氧化性能、SOD活性和MDA含量。

1.2 血液生化指标分析

采用日立7020型全自动生化分析仪对血清中的谷丙转氨酶（ALT）、谷草转氨酶（AST）、碱性磷酸酶（ALP）、总蛋白 （TP）、白蛋白 （ALB）、肌酸激酶（CK）、血糖（GLU）、总胆固醇（TCHO）、高密度脂蛋白 （HDL）、低密度脂蛋白 （LDL）、乳酸脱氢酶（LDH）、血清钙（CA）、血清镁（MG）、血清磷（IP）进行测定。

1.3 抗氧化性能分析

根据南京建成生物工程研究所试剂盒的使用说明，测定血液及宰后1～6 d的肌肉SOD活性、总抗氧化性能（T-AOC）和MDA的含量。SOD是经过黄嘌呤与黄嘌呤氧化酶反应系统所生成的超氧阴离子自由基（O2-），O2-氧化羟胺生成亚硝酸盐，在显色剂的效果下显现紫红色，用可见分光光度计测定吸光度。MDA含量检测是通过其与硫代巴比妥酸缩合生成红色产物，在532 nm波长处有最大吸收峰。T-AOC测定是因机体内的抗氧化物质，可使Fe3+还原成Fe2+，后者能与菲啉类物质形成稳定的络合物，比色可检测出其抗氧化能力的强弱。

1.4 统计分析

试验数据使用SAS（8.2）统计软件处理，使用ANOVA程序进行方差分析，使用Duncan’s方法进行多重比较，试验数据用平均数±标准差表示。

2 结果与分析

2.1 西藏藏猪血液生化指标分析

在3个西藏藏猪群体中，只有AST、ALP、TP、CK、GLU和LDH存在极显著差异（＜0.01），而其他指标均差异不显著（＞0.05） （表1）。其中，错高乡藏猪和巴河镇藏猪的AST、ALP和LDH含量均显著低于朱拉乡藏猪（＜0.01）；而错高乡藏猪和巴河镇藏猪TP和GLU均显著高于朱拉乡藏猪（＜0.01）。另外，巴河镇藏猪与朱拉乡藏猪CK均显著高于错高乡藏猪（＜0.01）。

2.2 西藏藏猪血液抗氧化性能分析

所测3个西藏藏猪群体的血液SOD活性（图1A）、MDA含量（图1B）和T-AOC（图1C）活性均差异不显著 （＞0.05）。但是，3个藏猪群体的 SOD和T-AOC活性均高于已报道的长大杂交猪（66.8 U/mL和0.26 U/mL）；相反，MDA含量低于长大杂交猪（9.70nmol/mL）[13]。研究结果表明，该保护区内3个西藏藏猪群体在血液抗逆性方面存在一致性。

2.3 西藏藏猪肌肉抗氧化性能变化

尽管3个群体的西藏藏猪宰后肌肉SOD活性（图2A）、T-AOC活性（图 2B）和MDA含量（图 2C）均差异不显著（＞0.05）。但是，3个群体的西藏藏猪SOD活性均显著性高于已报道的莱芜猪、鲁莱黑猪和大白猪，而MDA含量却显著性低于莱芜猪、鲁莱黑猪和大白猪[10]。另外，随保存时间的延长，西藏藏猪3个群体的屠宰后肌肉SOD活性和T-AOC活性逐渐下降，但是，肌肉中MDA的含量则呈逐渐上升趋势。

表1 西藏藏猪血液生化指标分析

图1 西藏藏猪血液抗氧化性能分析

3 讨论

动物的血液生化指标不但反映出种质的代谢特性和遗传的特殊性，而且还可评价动物的生长和生产性能；因此，充分挖掘畜禽血液生化指标及其与生产性能的相关程度可以预测畜禽的生产力，进行早期阶段的选种[14,15]。本研究发现，西藏藏猪各项血液生化指标均在合理的范围之内，但是有些指标高于其他地方猪种；其中ALT、AST和LDH均高于鲁西地方黑猪[16]。有研究证明，提高血液中ALT、AST、LDH和AKP活性，可降低背膘厚，提高瘦肉率[17]。血液中的蛋白含量及各种蛋白的比例组成具有多种用途，血液总蛋白与白蛋白含量可反映体内蛋白质的吸收、合成和分解状况以及机体免疫力的高低[18]。本研究发现血液总蛋白和白蛋白含量高于荣昌猪[19]、鲁西黑猪[16]，这表明西藏藏猪可能存在高血氧亲和力或高血流速度等适应方式，属于较高水平的低氧适应途径。

图2 西藏藏猪肌肉抗氧化性能变化

机体抗氧化防御体系通过各组分间相互反应可清除体内自由基，阻断其中的过氧化的途径到实现抗氧化的目的[20]。总抗氧化能力的维持包括酶促和非酶促两个抗氧化体系，能够准确地反映出机体清除氧自由基的总体能力，也反映了机体清除掉活性氧的能力。研究发现，3个藏猪群体血液的T-AOC和SOD活性均高于长大二元杂交猪，MDA含量低于长大二元杂交猪。结果也证明了西藏藏猪具有较强的抗逆性能[13]。

猪屠宰后肌肉的抗氧化性能反映了猪肉保存的货架期，同样抗氧化性能越强，其保存的时间也越长。因此研究宰后肌肉的抗氧化性能变化对了解西藏藏猪猪肉品质具有重要作用。研究结果中，3个群体藏猪24 h的SOD活力分别比张天阳等[21]测定的杜长大育肥猪数据高42.93%、41.36%和43.01%，MDA含量分别比杜长大育肥猪数据低15.79%、10.51%和21.05%；因此，西藏藏猪肌肉具有较好的抗氧化性。

总之，本研究系统分析了西藏藏猪血液生化指标、血液抗氧化性能和宰后肌肉抗氧化性能随储存时间的变化。这些指标不仅反映了西藏藏猪血液和肌肉的独特抗氧化性，而且也为西藏藏猪遗传资源的保护和开发利用提供了理论依据，同时，为进一步挖掘西藏藏猪对高海拔低氧的适应特性及抗逆性能奠定了基础。

[1]国家畜禽遗传资源委员会编.中国畜禽遗传资源志·猪志.中国农业出版社,2011:361-374.

[2]强巴央宗,张浩,白玛央宗,等.高原环境中藏猪血液生理指标测定与比较[J].西南农业学报,2011,24(6):2382-2384.

[3]张建,曾勇庆.西藏藏猪的生物学特性、传统养殖与特色产业的发展[J].猪业科学,2012,29(5):128-130.

[4]强巴央宗,谢庄,田发益.高原藏猪现状与保种策略[J].中国畜牧杂志,2001,37(6):46-47.

[5]刘燕,刘孟洲.合作猪血液生理生化指标特性的研究 [J].中国畜牧兽医,2007,34(7):52-55.

[6]Zhang H,Wu CX,Chamba Y,et al.Blood characteristics for high altitude adaptation in Tibetan chickens [J].Poultry Science,2007,86(7):1384-1389.

[7]Beall CM,Decker MJ,Brittenham GM,et al.An ethiopian pattern of human adaptation to high-altitude hypoxia[J].Proceedings of the National Academy of Sciences of the United States of America,2002,99(26):17215-17218.

[8]Erzurum SC,Ghosh S,Janocha AJ,et al.Higher blood flow and circulating NO products offset high-altitude hypoxia among Tibetans[J].Proceedings of the National Academy of Sciences of the United States of America,2007,104(45):17593-17598.

[9]Fernández J,Pérez-álvarez JA,Fernández-López JA.Thiobarbituric acid test for monitoring lipid oxidation in meat[J].Food Chemistry,1997,59(3):345-353.

[10]李华,曾勇庆,魏述东,等.猪宰后肌肉SOD与MDA的变化及其对肉质特性的影响[J].畜牧兽医学报,2010,41(3):257-261.

[11]Chen W,Zhu HL,Shi Y,et al.Comparative analysis on antioxidative ability of muscle between Laiwu Pig and Large White[J].Asian-Australasian Journal of Animal Sciences,2012,25(8):1190-1196.

[12]Chen W,Zeng Q,Xu H,et al.Comparison and relationship between meat colour and antioxidant capacity of different pig breeds[J].Animal Production Science,2017,DOI:https://doi.org/10.1071/AN16184.

[13]魏金涛,杨雪海,赵娜,等.不同豆粕酶解发酵物对仔猪生长性能、血液生化指标、抗氧化能力的影响研究[J].饲料工业,2013,34(18):55-58.

[14]张代坚,赵含章,李炳坦.大白猪某些血清生化物质与生长,胴体和肉质性状关系的研究[J].中国畜牧杂志,1993,29(6):37-39.

[15]Kim M,Shin HK.The water-soluble extract of chicory influences serum and liver lipid concentrations,cecal short-chain fatty acid concentrations and fecal lipid excretion in rats[J].Journal of Nutrition,1998,128(10):1731-1736.

[16]朱明霞,刘文强,侯国生.鲁西地方黑猪血液生化指标与肉量和肉质的相关性研究[J].畜牧与兽医,2013,45(8):62-66.

[17]邱金海.莆田黑猪血液生理生化指标测定 [J].山地农业生物学报,2009,28(4):317-323.

[18]刘世会,张启林,刘江良.贵州剑河香猪血液生化指标的测定[J].贵州畜牧兽医,2004,28(1):3-4.

[19]王孝友,徐登峰,谷山林,等.荣昌猪血液生理生化指标的测定[J].黑龙江畜牧兽医,2013,(3):53-56.

[20]Sørheim O,Erlandsen T,Nissen H,et al.Effects of modified atmosphere storage on colour and microbiological shelf life of normal and pale,soft and exudative pork[J].Meat Science,1997,47(1-2):147-155.

[21]张天阳,徐海鹏,曾勇庆,等.饲喂不同剂量乳酸菌液对肥育猪肉质特性及抗氧化性的影响[J].养猪,2014，(1):41-43.

参考文献 著录说明及格式示例

本刊的参考文献著录采用“顺序编码制”，即在引文处对引用的文献按其在文章中出现的先后顺序，用阿拉伯数字加方括号标出。在文后的参考文献目录中，各条文献按在文章中标示的文献序号顺序排列并规范著录，著录项目应完整，内容应准确。以下是几类常见参考文献的著录格式示例。

[期刊][1]张漫,顾宪红,陈小秋.我国兽药行业现状概述[J].中国猪业,2012,7（5）:57-59.

[2]Tremblay GF,Matte JJ,Dufour JJ,et al.Survival rate and development of fetuses during the first 30 days of gestation after folic acid addition to a swine diet[J].Journal of Animal Science,1989,67（3） :724-732.

[专著][3]熊远著,王林云.中国养猪大成[M].北京:中国农业出版社,2007:314.

[学位论文][4]刘建波.猪细环病毒与猪圆环病毒2型分子生物学特性研究[D].北京:中国农业科学院,2014.

[论文集][5]陆昌华.动物疫病综合防控兽医信息化的历史回顾、现状与展望.见:熊本海,王文杰,宋维平.中国畜牧兽医学会信息技术分会第十届学术研讨会论文集[C].北京:中国农业大学出版社,2015:11-24.

[电子文献][6]参考消息网.中国进口加拿大猪蹄被检出瘦肉精或影响两国贸易[EB/OL].http://www.cankaoxiaoxi.com/china/20170601/2065606.shtml.

[标准][7]GB/T 28716-2012,中华人民共和国国家标准-饲料中玉米赤霉烯酮的测定免疫亲和柱净化-高效液相色谱法[S].北京:中国标准出版社,2013-02-01.

[报纸][8]常纪文.反虐待动物不是崇洋[N].经济参考报,2010-03-20（A2）.

此外，作者不超过3名需全部写出，超过3名则只写前3名，后加“,等.”，英文为“,et al.”。英文作者表示方法：Hosono T，Lee KK，Barford CC。

中文期刊用全名，外文期刊一般用全名，也可用缩写刊名。全文统一，同一篇文章的参考文献或者都是全称，或者都是简称。