浅谈优化分离精液的冷冻保藏方法

陈 林

（辽宁省大连市畜牧总站，辽宁 大连 116037）

动物的性别控制技术是通过对动物的正常生殖过程进行人为干预，使成年雌性动物产出人们期望性别后代的一门生物技术。现在一般多采用流式细胞仪进行X、Y精子分离法，该技术是利用动物含有X染色体和含有Y染色体的精液中DNA含量的差异，借助特异性染色剂染色，然后根据发出的荧光强度，通过计算机预测精子类别，再通过给精液液滴附加电荷，根据静电原理，将含有X染色体的精液和Y染色体的精液分离，得到分离精液，如果得到的分离精液在短期内不用，则需要将得到分离精液冷冻保藏，以保证其活力。我市相关企业通过优化分离精液的冷冻保藏方法，实现了分离精液有效保藏的效果，显著降低了整个保藏过程的成本。下面浅析优化分离精液的冷冻保藏方法

1 常用分离精液的冷冻保藏方法

分离精液冷冻过程中，需要在其中加入乳化液以防止分离精液受到冷冻打击，但是常见的乳化液中通常含有大量的蛋黄。因此，在配置乳化液的过程中需要将乳化液进行离心、过滤等操作，离心的过程需要用到较多的离心管，过滤的过程需要利用特制的过滤膜，而离心管和特制的过滤膜的价格比较昂贵，进而使得整个配置乳化液过程的成本增加。

2 优化后分离精液的冷冻保藏方法

优化方法，包括将分离精液在第一预定温度进行冷却，得到初冻分离精液；在初冻分离精液中加入Tris B乳化液并在第一预定温度下进行乳化，混匀后得到乳化分离精液；再将乳化分离精液在第一预定温度下离心，得到分离精液沉淀；将分离精液沉淀在第一预定温度下通过悬混、计数以及灌装后得到待冷冻的分离精液；将待冷冻的分离精液通过程序冷冻仪器进行冷冻，得到冷冻分离精液；将冷冻分离精液转移至液氮中，长期冷冻保藏。

本方法在将分离精液保藏的过程中，使用了由Tris B缓冲液和丙三醇组成Tris B乳化液作为乳化剂防止对初冻精液在后续冷冻的过程中受到冷冻打击，进而影响精子的活力；而Tris B乳化液的乳化初冻分离精液的过程中不需要经过特制的过滤膜过滤，并且Tris B乳化液配置成本低，降低了整个保藏过程的成本，实现了将分离精液有效保藏的效果。

此外，这种分离精液的冷冻保藏方法通过初冻、乳化、离心、悬混、计数、灌装以及程序冷冻仪器冷冻等流程，实现了将分离精液有效保藏的良好效果，冷冻保藏后的分离精液可应用于动物的繁育中，并按照生产需求人为的控制动物后代的性别，实现了快速繁育高产家畜的预期效果。适合饲喂反刍动物，因为它们的消化道能够高效利用这些物质。因为这些粪污所含能量较低，所以比较适合用于维持需要或者饲喂妊娠奶牛，不适合饲喂泌乳牛和育成牛。动物粪污通过青贮、脱水或其他方法处理后可适用于饲喂很多种动物。饲喂过多的这种回收饲料可以导致饲料中纤维和矿物质过高，从而降低奶牛的生产性能。正是因为这个原因，对高能量饲料，比如泌乳牛饲料，回收饲料所占比例不能超过10%。