三个规模化猪场伪狂犬病血清学调查与分析

卓鸿璘

福建省泉州市洛江区虹山乡畜牧兽医站 福建泉州 362000

猪伪狂犬病主要是引起种猪繁殖障碍和仔猪大量死亡，表现在公猪不育，母猪返情，妊娠母猪发生流产、产死胎和木乃伊胎，仔猪出现腹泻、呕吐和神经症状，育肥猪出现呼吸道症状和生长缓慢，给养猪业带来巨大经济损失。20世纪90年代以来，随着猪伪狂犬病基因缺失疫苗的广泛使用，该病在我国大部分地区得到有效控制。然而自从2011年后，我国部分地区疫苗免疫猪群出现猪伪狂犬病疫情，猪群中伪狂犬病病毒感染呈现逐年上升的趋势，给猪伪狂犬病的防控带来新的挑战[1-3]。

本研究采用酶联免疫吸附试验（ELISA）方法，调查3个免疫猪伪狂犬病基因缺失疫苗的规模化生猪养殖场抗体水平和野毒感染情况，分析3个猪场及不同阶段生猪野毒感染情况的差异，探讨猪伪狂犬病的防疫措施，为猪伪狂犬病的综合防治和净化提供参考。

1 材料和方法

1.1 样品来源 共采集3个免疫猪伪狂犬病基因缺失疫苗的规模化生猪养殖场血清样本390份，其中种猪样本 250 份（见表 1），猪场Ⅲ 4、6、8、12、16、20、24周龄商品猪样本各20份。

1.2 主要仪器和试剂 主要仪器：酶标分析仪（北京普朗新技术有限公司，型号DNM-9602）；台式离心机（上海安亭科学仪器厂制造，型号TGL-16G）。检测试剂：猪伪狂犬病病毒gE抗体检测试剂盒、猪伪狂犬病病毒gB抗体检测试剂盒，均购自北京金诺百特科技有限公司。

表1 三个规模化生猪养殖场种猪样本采集数量表

1.3 检测方法 试验严格按照北京金诺百特科技有限公司猪伪狂犬病病毒gE抗体检测试剂盒和猪伪狂犬病病毒gB抗体检测试剂盒说明书进行操作。

1.4 结果判定 猪伪狂犬病病毒gE抗体检测结果判定标准：阴性对照OD值≥0.7，阳性对照OD值≤0.25时试验判定有效；样品SN值等于样品OD值/阴性对照OD值，当样品SN值＞0.6，判为阴性；当SN值≤0.6，判为阳性。

猪伪狂犬病病毒gB抗体检测结果判定标准：阴性对照OD值≥0.7，阳性对照OD值≤0.4时试验判定有效；样品SN值等于样品OD值/阴性对照OD值，当样品SN值＞0.6，判为阴性；当SN值≤0.6，判为阳性。

2 结果与分析

2.1 三个规模化生猪养殖场种猪gE抗体检测结果猪场Ⅰ、Ⅱ和Ⅲ种猪的gE抗体阳性率分别为0%、46.0% 和83.2%（见表2）。3个猪场gE抗体阳性率差异较大，这与3个猪场的饲养管理水平及对疫病防控的重视程度有必然的联系。猪场Ⅰ饲养管理比较好，重视疫病防疫和种猪疫病监测，特别是新引进种猪及本场后备种猪疫病的检测；猪场Ⅱ重视伪狂犬病疫苗免疫，种猪群存在一定比例的伪狂犬病野毒感染，可能与猪场中原来就存在野毒感染有关；猪场Ⅲ饲养管理比较差，猪舍通风不好、湿度大，并且不重视猪伪狂犬病疫苗免疫，母猪返情和产死胎的比例较高，仔猪死亡率也比较高，怀疑与猪伪狂犬病有一定的关系。猪场Ⅲ加强了猪伪狂犬病疫苗的免疫，种猪一年免疫6次，商品猪1日龄滴鼻，50、85和130日龄各免疫一次，后备种猪160和190日龄各免疫一次，但是猪场Ⅲ各个阶段生猪gE抗体阳性率仍然比较高，这可能与猪群应激大、免疫力差及感染伪狂犬病病毒后终身带毒有关。

猪场Ⅱ和猪场Ⅲ后备母猪gE抗体阳性率都比较高，这可能与对猪群中大猪的疫病防疫不重视、饲养条件与仔猪形成比较大的落差有一定的关系。后备母猪虽然有加强猪伪狂犬病疫苗的免疫，但是后备母猪来源于中猪，有可能在疫病防疫比较薄弱的时期，受到野毒感染。

表2 三个规模化生猪养殖场种猪gE抗体检测结果

2.2 猪场Ⅲ商品猪gE抗体检测结果 猪场Ⅲ商品猪 4、6、8、12、16、20、24 周龄的 gE 抗体阳性率分别为 60%、70%、75%、70%、100%、80%、100%。 仔猪在4周龄时gE抗体就高达60%，据文献报道猪伪狂犬病不仅可通过垂直传播，乳猪还可因吃感染母猪的乳汁而感染该病，也有报道哺乳仔猪的gE抗体阳性率高可能与母源gE抗体的存在有关[3]，笔者认为母源gE抗体水平应该随着时间的推移而降低，直至消失，但是本试验检测结果gE抗体的阳性率随着时间的推移而升高，所以，仔猪还是有被伪狂犬病病毒感染。本试验中16周龄以上的商品猪gE抗体阳性率非常高，这部分商品猪常呈隐性感染，是猪伪狂犬病综合防治比较容易忽视的环节，一定要多关注。

2.3 三个规模化生猪养殖场gB抗体检测结果3个猪场种猪gB抗体水平合格率比较高，分别为100%、97.7%、98.9%（见表3）；猪场Ⅲ抽检24周龄内商品猪的gB抗体水平合格率都维持在80%以上（见表4）。谢海波等研究指出，可以有效预防猪伪狂犬病流行的免疫评价标准为免疫合格率80%以上[4]。3个规模场的免疫均达到标准，疫苗的效果很好，3个猪场伪狂犬病疫苗免疫比较成功。

表3 三个规模化生猪养殖场种猪gB抗体检测结果

表4 猪场Ⅲ商品猪gB抗体检测结果

3 讨 论

3.1 猪群伪狂犬病净化才是解决猪伪狂犬病的根本措施 猪伪狂犬病病毒具有高度隐性感染的特点，可引起持续感染，患猪和带毒猪可通过唾液、尿液、鼻分泌物、乳汁及精液等持续向外排毒，妊娠母猪感染伪狂犬病病毒时还可通过垂直传播侵入胎儿，感染的种猪及其所生仔猪长期带毒[5-7]。疫苗免疫是当前防治猪伪狂犬病的重要手段，但是从有关报道和本试验结果来看，现有使用的疫苗不能完全保护免疫猪抵抗伪狂犬病病毒流行株的攻击[1,8]。因此，疫苗免疫和良好的饲养管理是控制猪伪狂犬病扩散的重要手段，但是不能从根本上解决问题，只有严格做好引种检测、疫苗免疫、抗体检测等生物安全措施下，制定科学的净化计划方案，使用病毒基因缺失疫苗配合血清学检测，逐步淘汰野毒感染猪，建立和扩大健康猪群，才是解决猪伪狂犬病的根本措施。

3.2 合理选择疫苗能更有效防控猪伪狂犬病 目前，养殖场使用的猪伪狂犬病疫苗主要有灭活疫苗、传代弱毒疫苗和基因缺失疫苗。灭活疫苗安全性好，不存在隐性感染和毒力返强的问题；但是灭活疫苗的免疫效果相对比较差，免疫应激比较大，临床上使用的比例不高[9]。传代弱毒疫苗具有良好的免疫原性，但是存在一定的毒力，具有潜伏感染和散毒的风险，甚至因毒力返强导致疫病的流行；目前我国临床上广泛使用的弱毒疫苗是伪狂犬（Bartha-K61）冻干疫苗，它对经典伪狂犬强毒具有良好的免疫保护效果，但是免疫猪不能完全抵抗我国2011年以来流行的强毒株的攻击[1,9]。基因缺失疫苗大多数具有较强的免疫原性，安全性相对比较好，一般不会造成潜伏感染；使用伪狂犬病gE基因缺失疫苗，可通过检测伪狂犬病gE抗体准确评价猪群野毒感染的情况。因此，基因缺失疫苗在临床上的使用比例越来越高，但是基因缺失疫苗成本高，并且随着基因缺失疫苗广泛使用，仍然存在基因重组的风险。养殖场应该根据自身的情况和需求，综合考虑疫苗的安全性、疫苗使用毒株的保护效果等因素选择合适的疫苗。

[1]任卫科,池晶晶,李秀丽,等.猪伪狂犬病疫苗研究及应用现状[J].天津农业科学,2017,23(8):37-41.

[2]李俊杰.伪狂犬病净化技术及其难点解析 [J].广东饲料,2017,26(6):48-50.

[3]黄晓慧,吴华健,华耀,等.安徽部分地区规模化猪伪狂犬病血清流行病学调查[J].动物医学进展,2017,38(8):126-130.

[4]谢海波,何小华.猪伪狂犬病的流行情况和预防措施[J].中国兽医杂志,2001,37(6):21-22.

[5]陈耀春.中国动物疫病志[M].北京:科学出版社,1993:81.

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[7]邓华成,徐雄真.思南县猪伪狂犬病血清学调查及防控对策[J].中国畜牧兽医文摘,2017,33(6):57-58.

[8]Wang C H,Yuan J,Qin H Y,et al.A novel deleted pseudorabies virus(PRV)provides rapid and complete protection from lethal challenge with the variant emerging in bartha-K61-vaccinated swine population in China[J].Vaccine,2014,32:3379-3385.

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