芒柄花黄素对阿尔茨海默病小鼠学习记忆能力及海马β—淀粉样蛋白前体蛋白的影响

费洪新　沈博　陈玉琦　潘思文　明玥　张英博

【摘要】目的 探讨芒柄花黄素（FMN）对阿尔茨海默病（AD）小鼠学习记忆及海马β-淀粉样蛋白前体蛋白（APP）的影响。方法 小鼠随机分成对照组、模型组、多奈哌齐组（1 mg/kg）、FMN高剂量组（30 mg/kg）、FMN中剂量组（15 mg/kg）、FMN低剂量组（7.5 mg/kg）。采用β-淀粉样蛋白

1-42（80pmol/?L）双侧脑室注射的方法诱导AD模型，连续治疗40天后取材。采用Morris水迷宫检测AD小鼠学习记忆能力，采用酶联免疫吸附检测AD小鼠海马APP含量。结果 与对照组比较，模型组小鼠潜伏期明显延长（P<0.05）；与模型组比较，FMN高剂量组（30 mg/kg）和FMN中剂量组（15mg/kg）小鼠的学习记忆能力明显改善（P<0.05），包括潜伏期明显缩短（P<0.05），游泳距离明显减少（P<0.05），目标停留时间明显延长（P<0.05），跨平台次数明显增加（P<0.05），游泳轨迹多为直线型和趋化型，并且海马APP水平明显降低（P<0.05）。结论 FMN能改善AD模型小鼠的学习记忆能力，FMN能够通过抑制APP在AD治疗中发挥重要的作用。

【关键词】芒柄花黄素；阿尔茨海默病；学习记忆；β-淀粉样蛋白前体

【中图分类号】R28 【文献标识码】B 【文章编号】ISSN.2095-6681.2017.35..02

阿尔茨海默病是一种常见的机体神经系统退行性疾病之一，其病理特征为脑组织神经元外沉积β-淀粉样蛋白，而β-淀粉样蛋白来源于β-淀粉样蛋白前体蛋白，APP经过一系列的剪切、修饰后可以形成β-淀粉样蛋白，β-淀粉样蛋白异常积累后还可以诱发机体学习记忆能力减退，进而引起行为学异常，由此分析，AD因为APP含量增加致使β-淀粉样蛋白异常积累出现学习记忆能力减退是具有理论依据的。课题组前期研究显示，补阳还五汤（黄芪、当归、赤芍、川芎、地龙、红花、桃红）对AD模型形态学、学习记忆、细胞凋亡、血脑屏障、核转录因子-κBp65[1]等有改善作用，补阳还五汤含药血清或补阳还五汤对肝纤维化模型具有改善作用。

1 材料与方法

（1）安排好实验仪器、实验试剂、实验动物、复制模型

分组给药，包括对照组、模型组、多奈哌齐组、FMN高剂量组、FMN中剂量组、FMN低剂量组，每组8只，共48只。对照组和模型组小鼠给予生理盐水灌胃，多奈哌齐组小鼠给予多奈哌齐1 mg/kg灌胃，FMN高剂量组、FMN中剂量组、FMN低剂量组小鼠分别给予FMN 30、15、

7.5 mg/kg灌胃，各组小鼠灌胃给药40天。

（2）FMN对AD小鼠学习能力、记忆能力的影响

各组小鼠灌胃结束后，经过1天的休整期，采用Morris水迷宫系统训练和测定各组小鼠学习能力。

（3）统计FMN对AD小鼠学习记忆保持能力的影响，FMN对AD小鼠海马APP的影响。

（4）统计学分析

采用SPSS19.0统计学软件对数据进行分析，计数资料以百分数（%），例（n）表示，采用x2检验，计量资料以“x±s”表示，采用t检验，以P<0.05为差异有统计学意义。

2 结 果

2.1 FMN对AD小鼠学习能力、记忆能力的影响

与对照组比较，模型组小鼠潜伏期明显延长（P<0.05），游泳距离明显增加（P<0.05）；与模型组比较，多奈哌齐组，FMN高、中剂量组小鼠潜伏期明显缩短（P<0.05），游泳距离明显减少（P<0.05），而FMN低剂量组小鼠潜伏期、游泳距离改变不明显（P>0.05）。

2.2 FMN对AD小鼠学习记忆保持能力的影响

小鼠学习记忆保持能力使用目标停留时间和跨平台次数表示，实验结果表明，与对照组比较，模型组小鼠目标停留时间明显缩短和跨平台次数明显减少（P<0.05）；與模型组比较，多奈哌齐组，FMN高、中剂量组小鼠目标停留时间明显延长和跨平台次数明显增加（P<0.05），而FMN低剂量组小鼠目标停留时间和跨平台次数改变不明显（P>0.05）。

2.3 FMN对AD小鼠学习记忆综合能力的影响

模型组、FMN低剂量组小鼠游泳轨迹多为边缘型，说明小鼠的学习记忆综合能力较差，而对照组、多奈哌齐组、FMN高剂量组、FMN中剂量组小鼠游泳轨迹多为趋化型、直线型，说明小鼠的学习记忆综合能力较好。

2.4 FMN对AD小鼠海马APP的影响

结果表明，与对照组比较，模型组小鼠海马APP明显升高（P<0.05）；与模型组比较，多奈哌齐组，FMN高、中剂量组小鼠海马APP明显降低（P<0.05），而FMN低剂量组小鼠海马APP改变不明显（P>0.05）。

3 讨 论

AD表现为学习能力、记忆能力的减退，其与β-淀粉样蛋白明显增多密切相关，而β-淀粉样蛋白的前体成分就是APP，基于此，本实验主要开展对小鼠学习记忆能力和APP水平的测定。

本实验表明，模型组小鼠潜伏期及游泳距离增加，伴有目标停留时间缩短和跨平台次数减少，同时游泳轨迹多为边缘型，经过补阳还五汤主要成分FMN治疗后，FMN高、中剂量可以促使AD小鼠较快寻找到Morris水迷宫系统水下平台，寻找水下平台难度降低。

综上所述，FMN通过抑制APP改善AD小鼠模型学习记忆能力，以此在AD治疗中发挥重要的作用。

参考文献

[1] 费洪新，韩玉生，杜 徽，等.补阳还五汤对阿尔茨海默病小鼠海马形态学和β淀粉样蛋白水平的影响[J].中国实验方剂学杂志，2014（20）：23.

本文编辑：李 豆