哈茨木霉菌株WY-1对番茄的促生防病效果

曲　薇， 伍　淼， 王旭东， 张淑梅， 陈秀玲， 王傲雪，2

(1.东北农业大学园艺学院，黑龙江哈尔滨 150030； 2.东北农业大学生命科学学院，黑龙江哈尔滨 150030)

哈茨木霉(Trichodermaharzianum)属半知菌亚门丝孢纲丛梗孢目科木霉属，广泛分布在自然界中，适应性好，防病机制多样，对多种病原真菌和细菌有拮抗作用[1]，对许多植物病害防治效果显著[2-3]。李敏等研究发现，多菌灵药剂和哈茨木霉菌株T-s1对水稻苗期立枯病的防效分别达 74.84%、64.83%[4]。目前，针对番茄病害的生物防治有较多报道[5-10]。姚彬等探究哈茨木霉菌菌丝、孢子悬浮液、代谢液等对病原菌的抑菌效果时发现，哈茨木霉对番茄叶霉及灰霉的病原菌均有一定的抑制作用[8]；段丽峰等研究发现，哈茨木霉用量达6亿～18亿孢子/m2(制剂用量2～6 g/m2)时对大田番茄猝倒病和立枯病的防效分别达75%～85%、75%～86%，且显著高于化学药剂[9]；陈文瑞等用麦麸混合砂子培养哈茨木霉来防治番茄猝倒病，其防治效果优于敌克松，与五氯硝基苯效果相当[10]。此外，许多学者在研究木霉时发现，木霉可以明显地促进植物的生长，对辣椒、豇豆、芹菜、黄瓜、白菜、豌豆、花生、菊花、小麦等多种作物有促生作用[11-13]。焦琮等曾报道康氏木霉不但能有效防治菜豆炭疽病、棉花苗期立枯病，还有促进棉花、菜豆生长发育的作用[14]；王慧中等将哈茨木霉添加到有机肥中制成生物菌肥，并施用到马铃薯、白菜上发现，与常规施肥相比，添加哈茨木霉的有机菌肥增产效果明显[15]。

本试验以东北农业大学园艺学院实验室分离到的哈茨木霉菌株WY-1为研究对象，测定其不同浓度及施用方式对番茄幼苗的促生及常见病害的防控作用，以期为哈茨木霉菌株WY-1的应用提供理论指导与技术依据。

1　材料与方法

1.1　试验材料

哈茨木霉菌菌株WY-1，由东北农业大学园艺学院实验室提供；东农713番茄种子，由东北农业大学番茄研究所提供。

1.2　哈茨木霉菌株的发酵培养

将保存的哈茨木霉菌株活化，PD摇瓶3 d；按7%接种量转接到固体发酵培养物中，混匀，置于28 ℃恒温培养箱中恒温培养10 d；取出发酵物，烘箱中40 ℃烘12 h；粉碎机粉碎，过200目筛，即得到原菌粉；4 ℃保存。

1.3　哈茨木霉的促生效果

1.3.1浸种将番茄种子置于55 ℃温水中浸泡30 min；分别置于由哈茨木霉原菌粉稀释制成的孢子浓度为107、106、105CFU/mL 的溶液中浸泡7 h，以清水(CK)为对照；挑选饱满一致的种子，播于含灭菌营养土的苗钵中，每钵5～8粒种子，每处理5钵，置于东北农业大学园艺试验站番茄大棚内培养2个月，正常田间管理；取苗，测量其株高、根长、茎粗、鲜质量，重复3次。

1.3.2灌根将番茄种子置于55 ℃温水中浸泡30 min；挑选饱满一致的种子，播于盛有灭菌营养土的育苗托盘中；待苗长出2张真叶，将苗移至21 cm×21 cm的苗钵内，每钵5株苗；培养7 d后，分别采用孢子浓度为107、106、105CFU/mL的哈茨木霉溶液开始灌根，以清水(CK)为对照；每隔10 d灌根1次，连灌3次，每处理5钵；2个月后取苗，测量其株高、根长、茎粗、鲜质量，重复3次。

1.4　哈茨木霉对番茄常见病害的防控效果

1.4.1白粉病以大棚内结果期的番茄植株为试验对象，分别喷施哈茨木霉孢子浓度为106、105CFU/mL的溶液，以喷施多菌灵可湿性粉剂0.8 mg/mL、美国拜沃生产的木霉可湿性粉剂3.75×105CFU/mL、清水为对照；随机选取150 cm×150 cm 的小块区域为1个小组，参照刘鸣韬等的分级标准[16]，喷药前及喷药后15 d逐天观察调查番茄白粉病的发生情况，计算病情指数和防治效果。

1.4.2灰霉病、叶霉病以4张真叶期盆栽番茄植株为试验对象，以喷施哈茨木霉孢子浓度为106、105CFU/mL的溶液为试验处理，以喷施多菌灵可湿性粉剂0.8 mg/mL、美国拜沃生产的木霉可湿性粉剂3.75×105CFU/mL、清水为试验对照。试验设3个方案：(1)先喷施药剂，1 d后再接种病原菌；(2)先接种病原菌，1 d后再喷施药剂；(3)仅接种病原菌喷清水作为对照。将处理好的番茄植株置于20 ℃条件下保湿培养，参照徐升运等的分级标准[17]，15 d内逐天观察并记录番茄灰霉病、叶霉病的发病情况，计算病情指数和防治效果。

2　结果与分析

2.1　哈茨木霉的促生效果

2.1.1浸种的促生效果由图1、表1可见，与清水处理(对照)相比，哈茨木霉菌剂浸种各处理的番茄株高、根长、茎粗、植株鲜质量都有不同程度的增加；哈茨木霉孢子浓度 107CFU/mL 溶液浸种的番茄株高、根长增加幅度相对最大，分别比对照增加10.68%、27.00%，哈茨木霉孢子浓度 106CFU/mL 溶液浸种的番茄茎粗、植株鲜质量增幅相对最大，分别比对照增加10.31%、34.26%。

表1　哈茨木霉菌剂不同浓度浸种对番茄植株生长的影响

2.1.2灌根的促生效果由图2、表2可见，与清水处理(对照)相比，经过哈茨木霉菌剂灌根处理的番茄植株，其株高、根长、茎粗、鲜质量等均有明显增加，菌剂灌根对番茄植株有明显的促生作用；使用哈茨木霉孢子浓度107、106CFU/mL处理对番茄株高、根长、茎粗、鲜质量的增加效果相对较好。综合成本和使用效果，选择哈茨木霉孢子浓度106CFU/mL为番茄合适的灌根浓度。

2.2　哈茨木霉对番茄常见病害的防控效果

2.2.1番茄白粉病由表3可见，喷药后15 d，哈茨木霉菌剂对白粉病的防治效果较为明显，喷施孢子浓度106、105CFU/mL 对白粉病的防治效果分别为82.15%、70.41%，分别是多菌灵可湿性粉剂0.8 mg/mL相对防效的1.33、1.14 倍，分别是拜沃木霉3.75×105CFU/mL相对防效的1.39、1.19倍。

2.2.2番茄灰霉病、叶霉病由表4可见，喷施多菌灵的番茄灰霉病、叶霉病的病情指数均明显低于只接种病原菌(对照)的病情指数；喷施哈茨木霉孢子浓度106CFU/mL对番茄灰霉病、叶霉病的防治效果相对最好， 喷药后接种、接种后喷药的相对防效分别为77.98%、56.82%和82.66%、72.37%，分别是拜沃木霉3.75×105CFU/mL相对防效的1.45、1.35倍和1.20、1.30倍，分别是多菌灵可湿性粉剂 0.8 mg/mL相对防效的1.73、13.3倍和1.63、1.66倍；喷药后接种的相对防效明显好于接种后喷药的防治效果，故田间管理时应加强对番茄灰霉病、叶霉病的预防。

表2　哈茨木霉菌剂不同浓度灌根对番茄植株生长的影响

表3　哈茨木霉菌剂对温室地栽番茄白粉病的防控效果

表4　哈茨木霉菌剂对室内盆栽番茄灰霉病、叶霉病的防治效果

3　结论与讨论

哈茨木霉对番茄植株的生长具有良好的促进作用，灌根对番茄植株的促生效果明显优于浸种，这可能是由于哈茨木霉灌根可直接作用于幼苗根系而促使根系发达，吸收水肥的能力增强，进而促进幼苗生长，而浸种是通过提高番茄种子发芽活力来影响幼苗的生长，作用效果相对较弱。另外，木霉在土壤中可降解土壤中的有机物、溶解可利用矿质元素，增加了植物对营养物质的吸收，而浸种相对于灌根，带入土壤的木霉菌量少，帮助降解吸收营养物质的能力相对较弱，因此促生效果也相对较弱。

哈茨木霉菌株WY-1具有生长速度快、适应能力强、防病机制多等特点，利用哈茨木霉对番茄病害进行防治可避免化学防治对环境造成的污染[18]。试验结果表明，哈茨木霉菌剂对番茄白粉病、灰霉病及叶霉病均有良好的防治效果；先喷施哈茨木霉后接种病原菌比先接种病原菌后喷施哈茨木霉对番茄灰霉病、叶霉病的防控效果相对更好，这可能是因为哈茨木霉生长速度快，先喷施哈茨木霉可以使其迅速占位并大量繁殖，当病原菌入侵时可抑制病原菌的生长，具有更加明显的竞争优势，起到更好的防治效果，而如果先接种病原菌，则会使病原菌大量繁殖，哈茨木霉抵御病原菌的效果会有所减弱。

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