P53和Ki-67在胃高级别上皮内瘤变、分化型早期胃癌组织中的诊断价值

高福平，魏 谨，马 平，薛 松，夏莉花，孙 琼，李文洁，赵绮莲

(南京市高淳人民医院病理科，江苏 南京 211300)

我国胃癌年发病率约为36/10万，年死亡率约为26/10万，位于我国恶性肿瘤死亡率第3位[1]。早期胃癌的预后良好，术后5 a生存率大于90%[2]。内镜下黏膜剥离术常被应用于早期胃癌的治疗，其能达到外科根治的疗效且创伤轻，近年来内镜下黏膜剥离术在我国被迅速推广。由于内镜下黏膜剥离术等的开展，对早期胃癌的诊断及鉴别诊断提出了更高的要求，但目前病理常规检查技术在与高级别上皮内瘤变、低级别上皮内瘤变以及慢性胃炎鉴别时存在一定困难，我们应用免疫组化法检测P53和Ki-67在这三者中的表达，旨在寻找一种客观有效的诊断方法。

1 材料与方法

1.1材料选取2015年7月至2017年8月南京市高淳人民医院收治的胃内镜下黏膜剥离术后标本，其中诊断为高级别上皮内瘤变、分化型早期胃癌病例34例，胃活检或ESD标本诊断为低级别上皮内瘤变25例，以及瘤旁正常胃黏膜组织34例。所有病例均经2名副主任医师以上职称的病理科医生复诊。

1.2试剂及方法即用型鼠抗人P53单克隆抗体、即用型鼠抗人Ki-67单克隆抗体均购自北京中杉金桥生物有限公司。标本常规经4%中性多聚甲醛固定，石蜡包埋，3～4 μm厚切片，采用免疫组化PV-9000法，操作过程按说明书进行。

1.3染色结果判定P53、Ki-67阳性部位为细胞核，细胞核出现棕黄色或棕褐色颗粒为阳性信号。每张切片选取染色较好部位5个高倍视野(×400)，每个视野计数100个肿瘤细胞，取其平均值为细胞的阳性率。按阳性细胞所占的比例及染色强度区分：阳性细胞数所占比例<25%为阴性；≥25%为阳性。所有病例均经2名副主任医师以上职称的病理科医生分别进行盲法判读。

1.4统计学处理采用SPSS 17.0进行统计学分析，计数资料用百分数表示，比较用χ2检验，检验水准α=0.05。

2 结果

P53在胃高级别上皮内瘤变、分化型早期胃癌组织中阳性表达率为82.35%，明显高于正常胃黏膜(0.00%)及胃低级别上皮内瘤变(8.00%)，差异均有统计学意义(P均<0.001)。Ki-67在胃高级别上皮内瘤变、分化型早期胃癌组织中阳性表达率为88.24%，明显高于正常胃黏膜(8.82%)及胃低级别上皮内瘤变(20.00%)，差异均有统计学意义(P均<0.001)。见表1。

3 讨论

目前，我国多数胃癌发现时已处于进展期[3]。我国早期胃癌检出率低的原因有很多，如胃镜检查在健康体检中还不普遍、有早期胃癌诊断经验的内镜医师总量欠缺，但我国早期胃癌病理诊断标准混乱也是一个非常重要的原因。

表1 P53和Ki-67在不同胃组织中表达的比较

注：P53：正常胃黏膜与胃低级别上皮内瘤变比较，χ2=2.82，P=0.090；正常胃黏膜与胃高级别上皮内瘤变、分化型早期胃癌比较，χ2=47.60，P<0.001；胃低级别上皮内瘤变与胃高级别上皮内瘤变、分化型早期胃癌比较，χ2=31.87，P<0.001。Ki-67：正常胃黏膜与胃低级别上皮内瘤变比较，χ2=1.54，P=0.220；正常胃黏膜与胃高级别上皮内瘤变、分化型早期胃癌比较，χ2=42.92，P<0.001；胃低级别上皮内瘤变与胃高级别上皮内瘤变、分化型早期胃癌比较，χ2=27.80，P<0.001。

早期胃癌一经确诊，推荐接受内镜或外科治疗。目前尚没有研究表明内镜治疗早期胃癌具有更好的预后，也没有证据表明开腹手术与内镜治疗在预后中的差异。但内镜治疗的手术创伤轻，并发症较少。

阿克曼外科病理学将异型增生分低级别和高级别。高级别异型增生被认为是原位癌的同义词，必须与黏膜内癌鉴别，后者腺体有基底膜的破坏。几个病理小组将胃活检标本的病理检查结果分为以下几个类别：1)没有异型增生；2)异型增生不明确；3)低级别异型增生；4)高级别异型增生、原位癌；5)黏膜内癌；6)浸润癌。虽然日常工作中区分高级别异型增生、原位癌和黏膜内癌十分重要，但由于均需要内镜下黏膜剥离术治疗，而且处理基本一致，我们将两者合并。实际工作中，病理有效区分胃低级别上皮内瘤变、正常胃黏膜和胃高级别上皮内瘤变、分化型早期胃癌，因为前2组只需要随诊复查，而后者需要进一步行内镜下黏膜剥离术或手术治疗，有着更为重要的实践价值。

既往研究[4]证实P53基因结构改变是细胞发生恶性转化的一个重要途径，P53基因是众多抑癌基因中与人类关系最为密切的一个。P53基因突变常常发生在胃癌前病变向胃癌的转化时期，发生率为50%～86%[5]。本研究结果显示，P53在胃高级别上皮内瘤变、分化型早期胃癌组织中阳性表达率为82.35%，明显高于正常胃黏膜(0.00%)及胃低级别上皮内瘤变(8.00%)，差异均有统计学意义(P均<0.001)。

Ki-67与细胞增殖相关,阳性表达于增殖周期的细胞核，与细胞有丝分裂相关，研究[6]证实Ki-67可显示细胞的增殖情况以及预测肿瘤患者预后情况。Ki-67在许多的恶性肿瘤细胞中存在高表达，而在对应正常细胞低表达[7]，与恶性肿瘤的发生、发展及转移密切相关[8]。本研究结果显示，Ki-67在胃高级别上皮内瘤变、分化型早期胃癌组织中阳性表达率为88.24%，明显高于正常胃黏膜(8.82%)及胃低级别上皮内瘤变(20.00%)，差异均有统计学意义(P均<0.001)。

综上所述，P53和Ki-67在胃高级别上皮内瘤变、分化型早期胃癌组织中的存在高，两者检测有助于早期胃癌的鉴别诊断。

参考文献：

[1] 赫捷，赵平，陈万青．2012中国肿瘤登记年报[M]．北京：军事医学科学出版社，2012：28-297．

[2] 喻杨,金鹏,杨浪，等.早期胃癌130例的白光内镜下特征分析[J].中华消化杂志,2015,35(3)：165-168．

[3] 上海市早期胃癌临床协作组．上海不同等级10个医疗机构早期胃癌的筛选结果比较[J]．中华消化内镜杂志，2007，24(1)：19-22．

[4] 李彩苹.尾侧型同源转录因子-2,P53和Ki67在胃癌组织中的表达及意义[J].中华消化杂志,2015,35(5)：340-343.

[5] KUBISTA M, ANDRADE JM, BENGTSSON M, et al.The real-time polymerase chain reaction[J].Mol Aspects Med,2006,27(2/3):95-125.

[6] 陆志华,姚鸿欢,周晓伟，等.磁共振扩散加权成像的表观扩散系数与胃癌Ki-67表达及分化程度的关系[J].中华胃肠外科杂志,2016,19(2)：204-208.

[7] ZHENG JN, MA TX, CAO JY,et al．Knockdown of Ki-67 by small interfering RNA leads to inhibition of proliferation and induction of apoptosis in human renal carcinoma cells[J].Life Sci，2006，78(7):724-729.

[8] 刘萍,卜海激.胃癌组织中HER-2及Ki-67的表达及相关性[J].临床肿瘤学杂志,2015,(8)：699-703.