双氢青蒿素片剂的研制及溶出度研究

黄 静

(安徽医学高等专科学校，安徽合肥 230061)

青蒿素是从中药黄花蒿中经提取分离出来的一种抗疟药，疗效高、毒性小。双氢青蒿素(Dihydroartemisinine)是将青蒿素用硼氢化钠还原而得到的一个衍生物，疗效迅速，毒副作用小。双氢青蒿素为过氧化物，具有独特的过氧桥结构，其抗虐作用与铁介导的药物分子内过氧桥裂解产生的自由基有关[1]。双氢青蒿素具有强大的抗疟原虫作用，其抗虐作用是青蒿素的4～8倍，且对耐氯喹株疟原虫感染亦有效。口服吸收良好，起效迅速。双氢青蒿素片剂口服吸收完全，生物利用度高，其生物利用度约为青蒿素的10～60倍，适用于各种类型疟疾的症状控制，尤其是对抗氯喹恶性及凶险型疟疾有较好疗效[2]。本实验研制了其片剂，并考察其溶出度。

1 仪器与试药

1.1 仪器

片剂四用测定仪78X-2(上海黄海药检仪器厂)；紫外可见分光光度计UV-2450(日本岛津公司)；药物溶出度仪RCZ-6B(上海黄海药检仪器厂)；电热鼓风干燥箱JB101(南通沪南科学仪器有限公司)；电子天平FA1104(上海民桥天平仪器厂)；旋转式压片机ZP-33(上海天祥健台药机厂)；标准分样筛(24,20,200,100,80目)(合肥通达筛网有限公司)。

1.2 试药

双氢青蒿素原料药(浙江新和成药业股份有限公司)；微晶纤维素(淮南山河药用辅料有限公司)；羧甲基淀粉钠(淮南山河药用辅料有限公司)；聚乙烯吡咯烷酮K30(中国医药(集团)上海化学试剂公司)；乳糖(广东西陇化工厂)；硬脂酸镁(淮南山河药用辅料有限公司)。

2 方法与结果

2.1 处方设计

2.1.1 剂量依据

依据中国药典2015版二部收载的双氢青蒿素片，其规格为20 mg/片，制定本品规格为20 mg/片。

2.1.2 崩解剂选择

本品为难溶性药物，为使药物能够快速溶出起效，片剂中需加入适量的崩解剂。常用的崩解剂有淀粉、微晶纤维素、羧甲基淀粉钠、低取代羟丙基纤维素等，我们选用微晶纤维素、羧甲基淀粉钠为崩解剂进行处方筛选。

2.1.3 填充剂的选择

药物的体积太小不易压片，本品的剂量较小(规格为20 mg)，须加入适量的填充剂，以增加片剂的体积。常用的填充剂有糖粉、乳糖、淀粉等，其中乳糖无吸湿性，释放药物快，对药物含量测定影响小，我们选用乳糖、淀粉为填充剂进行处方筛选。

2.1.4 润湿剂及粘合剂的选择

本品拟采用湿法制粒，需加入水、醇或其它粘合剂以产生粘性制成颗粒，对于疏水性药物，用PVP水溶液作粘合剂，不但易于均匀湿润，并能使疏水性药物颗粒表面变为亲水性，有利于药物的崩解和溶出。结合主药和所选用辅料的性质，我们选用水、5%PVP溶液及PVP为润湿剂或粘合剂进行处方筛选。

2.1.5 润滑剂的选择

为增加颗粒的流动性，压片时需加入适当适量润滑剂。硬脂酸镁、滑石粉及微粉硅胶等为常用的润滑剂。根据本品的性质，我们选用硬脂酸镁、微粉硅胶为润滑剂进行处方筛选。

2.1.6 处方

根据本品的剂型特点及原辅料的性质和用量等，我们设计了以下6个处方(表1)，进行实验。

表1 处方摸索

2.2 制备工艺

将原料药、辅料在60℃干燥2小时，原料药过200目筛，辅料过100目筛，备用。按每处方30片量分别称取上述各组分，按等量递增原则混匀，再过80目筛混匀。加入润湿剂或粘合剂制软材，过24目筛制粒，所得湿颗粒在60℃恒温烘箱中通风干燥2小时，其干颗粒过20目筛整粒，加入润滑剂混匀。调节装量和压力，压片，即得。

2.3 溶出度的测定

2.3.1 溶出介质的选择

本品难溶于水，在乙醇中略溶，参考2010年版药典，选用0.15%氢氧化钠-乙醇(4∶1)[4]为溶出介质。

2.3.2 测定波长的选择

精密称取双氢青蒿素原料药40 mg，置100 mL量瓶中，加乙醇适量，振摇使双氢青蒿素溶解并稀释至刻度，摇匀，静置2小时以上，精密量取静置后溶液2 mL，置10 mL量瓶中，加0.15%氢氧化钠溶液稀释至刻度，在37℃条件下保温30分钟，再精密量取2 mL，置10 mL量瓶中，加2%氢氧化钠溶液稀释至刻度，置60℃恒温水浴中反应30分钟，取出冷却至室温，以(0.15%氢氧化钠溶液-乙醇(4∶1))-2%氢氧化钠溶液(1∶4)为空白，于200～400 nm波长间扫描。

由紫外扫描可知，双氢青蒿素在2%氢氧化钠-乙醇溶液(4∶1)中于241 nm波长处有最大吸收。另取处方量的空白辅料。将上述溶液置60℃恒温水浴中，反应30分钟，冷至室温，按照分光光度法，在241 nm的波长处测定吸收度。结果表明：辅料在此波长下无吸收，不干扰本法的测定。故选定241 nm为溶出度测定波长。

2.3.3 标准曲线的制备

精密称得双氢青蒿素对照品40 mg，置250 mL量瓶中，加溶出介质(0.15%氢氧化钠-乙醇(4∶1))溶解并稀释至刻度，摇匀，置37℃保温30分钟，作为对照品贮备液。精密量取贮备液2.0、3.0、4.0、5.0、6.0、7.0、8.0 mL，分别置10 mL量瓶中，加溶出介质稀释至刻度，摇匀，另精密量取溶出介质2 mL，置10mL量瓶中，加2%氢氧化钠溶液稀释至刻度，作为空白溶液。以浓度(μg/mL)为纵坐标，吸收度为横坐标进行线性回归结果见图1和表2。

表2 溶出度测定线性

图1 线性回归结果

得回归方程为：A=4.335×10-3×C-6.640×10-4(R=0.9998，n=7)。表明双氢青蒿素在6.54～26.18 μg/mL的浓度范围内呈良好的线性关系。

2.3.4 精密度

精密称取双氢青蒿素对照品10 mg、16 mg、20 mg，分别置250 mL量瓶中，加溶出介质充分溶解并稀释至刻度，摇匀，置37℃保温30分钟。精密量取上述各浓度溶液各2 mL，共5份，分别置10 mL量瓶中，加2%氢氧化钠溶液稀释至刻度。将上述溶液置60℃恒温水浴中，反应30分钟，冷至室温，照分光光度法，在241 nm的波长处测定吸收度，以吸收度计算相对标准偏差(RSD)，结果相对标准偏差(RSD)分别为1.38%(低)、1.24%(中)、0.87%(高)，本法的精密度良好。

2.3.5 回收率考察

取双氢青蒿素对照品10 mg、16 mg、20 mg，各3份，分别置250 mL量瓶中，加入处方比例的空白辅料约60 mg，共9份，分别置上述量瓶中，加溶出介质充分溶解并稀释至刻度，在37℃条件下保温30分钟，再精密量取2 mL，置10 mL量瓶中，加2%氢氧化钠溶液稀释至刻度，作为供试品溶液。另取双氢青蒿素对照品适量，加乙醇溶解并定量稀释成每1mL中含0.4 mg的溶液，放置2小时以上，精密量取2 mL，置10 mL量瓶中，加0.15%氢氧化钠溶液稀释至刻度，置37℃保温30分钟，再精密量取2 mL，置10 mL量瓶中，加2%氢氧化钠溶液稀释至刻度，作为对照品溶液。将供试品溶液及对照品溶液置60℃恒温水浴中，反应30分钟，同时取出，冷至室温，照分光光度法，在241 nm的波长处测定吸收度，计算结果见表3。

结果表明，本法测定双氢青蒿素片溶出度方法的回收率良好。

2.3.6 制剂处方溶出度的测定

取各处方的样品，照溶出度测定法，以0.15%氢氧化钠-乙醇(4∶1)250 mL为溶剂，依法操作，经30分钟时，取溶液5 mL(同时补充溶液5 mL)，滤过，精密量取续滤液2 mL，置10 mL量瓶中，加2%氢氧化钠溶液稀释至刻度，作为供试品溶液。另取双氢青蒿素对照品适量，加乙醇溶解并定量稀释成每1 mL中含0.4 mg的溶液，精密量取2 mL，置10 mL量瓶中，加0.15%氢氧化钠溶液稀释至刻度，再精密量取2 mL，置10 mL量瓶中，加2%氢氧化钠溶液稀释至刻度，作为对照品溶液。将供试品溶液及对照品溶液置60℃恒温水浴中，反应30分钟，同时取出，冷至室温，结果见表4。

表3 溶出度测定回收率试验

表4 各处方溶出度测定结果

处方1、2制得的样品溶出度不符合要求；处方3、4溶出度均符合要求，但处方3溶出稍慢；处方5、6压出的片子外观性状、溶出度均符合要求，但处方5溶出偏慢。综合考虑，处方4、6为最佳处方，按照处方4、6制备的片剂其外观性状、溶出度均较为理想。但处方4中的微粉硅胶较硬脂酸镁价格高，从成本考虑，选择处方6作为最佳处方。

2.3.7 样品溶出曲线考察

取处方6的片子，照溶出度测定法，以0.15%氢氧化钠-乙醇(4∶1)250 mL为溶出介质，转速为每分钟50转，依法操作，经5、10、15、30、45、60分钟时，取溶液5 mL(并同时补液5 mL)，滤过，精密量取续滤液2 mL，置10 mL量瓶中，加2%氢氧化钠溶液稀释至刻度，作为供试品溶液。照上述方法操作，在241 nm的波长处测定吸收度，绘制出溶出曲线,结果见表5和图2。

表5 样品溶出曲线数据

图2 溶出曲线

3 结果和讨论

(1)剂量小的药物通过湿法制粒可达到含量准确、分散良好，同时获得良好的流动性，减少细粉飞扬。故采用湿法制粒。(2)本品为难溶性药物，必须有足够的细度以保证混合均匀及溶出度要求。(3)本品药物量少，与辅料量相差悬殊，要采用等体积递增混合法混匀。(4)制软材时要控制润湿剂或粘合剂的用量，使软材达到“握之成团，触之即散”，并以握后掌上不粘粉为度。

[参考文献]

[1]翟自立,肖树华.青蒿素类抗虐药的作用机制[J].中国寄生虫学与寄生虫杂志,2007(3):182-185.

[2]赵凯存,宋振玉.双氢青蒿素在人的药代动力学及与青蒿素的比较[J].药学学报,2006(5):342-346.

[3]侯惠民,王浩,张光杰,等.药用辅料应用技术[M].2版.北京:中国医药科技出版社,2005:53-78.

[4]国家药典委员会.中华人民共和国药典二部[M].北京:中国医药科技出版社,2010.