胃腺癌中巨噬细胞加帽蛋白G和基质金属蛋白酶-2的表达及相关性

王 静 于 敏 牛亚靖 张 红

(锦州医科大学附属第三医院外科，辽宁 锦州 121001)

胃癌最常见的病理类型是腺癌，病变形成过程中肿瘤细胞具有明显的迁移特征，对周围组织的侵袭和破坏能力明显〔1〕。基质金属蛋白酶(MMP)-2具有较强的溶解细胞外基质和基底膜的作用，可以使肿瘤转移的屏障打开，促进肿瘤细胞的播散〔2〕。巨噬细胞加帽蛋白(Cap)G是凝胶溶素超家族中的肌动蛋白结合蛋白，通过给微丝末端加帽和形成驱动力来控制微丝的移动，并对维持细胞的结构，调控肿瘤细胞的迁移〔3〕。本研究关注胃腺癌中CapG和MMP-2的表达，分析其临床意义及相关性。

1 资料与方法

1.1一般资料 2015年1月至2016年12月锦州医科大学附属第三医院行根治手术后的59例胃腺癌患者为观察组，留取完整的临床资料及术后新鲜的组织。男31例，女28例，年龄38～87(平均62.9)岁。病例均经病理医师确诊，并符合世界卫生组织(WHO)中的诊断标准及分型。排除标准：①术前行放、化疗；②有风湿免疫性疾病；③伴有其他器官恶性肿瘤。选择12例距肿瘤边缘>5 cm的非肿瘤性胃黏膜组织为对照组，留取新鲜组织，其中男6例，女6例，年龄40～82岁，平均59.8岁。两组性别、年龄构成差异无统计学意义(P>0.05)。

1.2两组CapG和MMP-2表达检测 两组新鲜标本取材后均立即置于70%的酒精中固定。CapG和MMP-2检测应用流式细胞术。取出70%酒精固定后组织，用眼科剪刀将其剪碎成浆糊状，放在不锈钢网上轻搓后，用生理盐水轻轻冲洗，300目铜网过滤后收集细胞悬液，离心1 min后制备单细胞悬液(1×106/ml)。取1 ml，严格按实验步骤加入一抗、磷酸盐缓冲液(PBS)及异硫氰酸荧光素(FITC)-IgG二抗等试剂后，应用美国BC公司生产的流式细胞仪上机检测，应用系统的自带的 Expo32 ADC软件进行分析。

1.3结果判定 以荧光指数(FI)表示蛋白表达的半定量。FI=(癌组织中蛋白表达的平均荧光强度-对照样品平均荧光强度)/正常对照样品平均荧光强度。

1.4统计学方法 应用SPSS17.0统计软件进行t检验及线性相关分析。

2 结 果

2.1两组CapG和MMP-2表达的比较 观察组CapG和MMP-2表达量明显高于对照组(P<0.05)。见表1。

表1 两组CapG和MMP-2表达的比较

2.2CapG和MMP-2表达在观察组不同临床病理特征中比较 观察组CapG和MMP-2表达与肿瘤淋巴结转移、脉管累犯和癌结节显著相关(P<0.05)。见表2。

2.3观察组CapG和MMP-2相关性 CapG和MMP-2表达呈正相关(r=0.48，P<0.05)。

表2 CapG和MMP-2表达在观察组不同临床病理特征中的比较

3 讨 论

胃腺癌是由胃黏膜上皮异型增生引起的，引发高级别上皮内瘤变并癌变，癌细胞形成后肿瘤多数表现为低分化的，肿瘤细胞体积小，具有侵袭性生长的特征，同时具有明显迁移潜能〔4，5〕。MMPs家族是一类蛋白，具有类似结构，由疏水信号肽序列、富含脯氨酸铰链区、催化活性区、前肽区、羧基末端区构成。其中前肽区和催化活性区具有高度保守性〔6〕。MMP-2属于明胶酶，其基因定位在染色体16q21，由12个内含子和13个外显子构成，其表达蛋白的分子量是72 kD〔7〕。MMP-2的功能调节源于转移后的分泌、前酶原的激活。活化后的MMP-2在降解细胞外间质的作用过程中有“钻头”的作用〔8，9〕，MMP-2的作用有促进细胞增殖，使分离脱落的肿瘤细胞侵入脉管系统；调节肿瘤细胞运动，促进趋化性；促进肿瘤间质新生血管形成〔10，11〕。CapG含有348个氨基酸，大小为38.5 kD，广泛表达于巨噬细胞相关的组织中〔12〕。肌动蛋白细胞骨架是细胞有众多功能的特征，对保持细胞形态有重要作用〔13〕。当钙离子存在的作用下，CapG作为Actin结合的蛋白，可以与钙离子形成有效的结合，能在F-actin延伸末端加帽，阻止其延伸，参与肌动蛋白和肌动纤维的重塑过程中，对调节细胞凋亡、调节细胞迁移及调节胞吞作用有重要价值〔14，15〕。CapG尤其在细胞高增殖、局部浸润和远处播散的肿瘤中表达升高，认为CapG是细胞侵袭和转移的相关促进蛋白〔16〕。

本研究提示CapG和MMP-2高表达是胃肿瘤形成的重要蛋白因素，二者可能具有癌基因的类似作用；CapG和MMP-2二者高表达可以促进肿瘤的淋巴结转移和脉管侵犯的过程，由于上述因素是肿瘤进展及不良预后的重要指标，因此CapG和MMP-2高表达预示着肿瘤具有高度侵袭性的生物学行为和不良的预后。本文提示CapG和MMP-2二者在对肿瘤生长及进展的调节作用过程中具有一定的协同效应，并非是完全通过独立的通路实现的。CapG可能作为上游信号对MMP-2进行高效调节。有研究认为CapG高表达有助于上皮间质转化，使肿瘤细胞与间质的同质性增强，增加转移潜能〔17〕。此时失去极性的胃腺癌上皮细胞易于转化为运动能力强的间质样肿瘤细胞，使肿瘤细胞与定植部位的组织黏附性增强，肿瘤出现定植，生长，形成转移瘤〔18，19〕。

4 参考文献

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