致伤凶器上血迹DNA鉴定1例

（镇江市公安局，江苏 镇江 212000）

1 案 例

1.1 简要案情

某年12月，本地发生一起故意伤害致一死一伤案件。现场提取附着有明显血迹的凶器1件（图1）、死者薛某心血、伤者张某血样以及50余份现场血迹。据现场法医介绍，薛某被刺中心脏，导致心脏破裂引起大出血死亡，张某被刺中大腿等处。为明确薛某与张某是否为同一凶器所伤，委托本鉴定所对凶器与两个被害人之间的关系进行鉴定。

图1 凶器背面取样点分布图

1.2 检验情况

1.2.1 初检

凶器正反两面均有大量明显血迹，采用湿棉签分别在凶器两面各提取血迹10处，经抗人血红蛋白金标试剂条法检验，均呈阳性。再用聚苯乙烯二乙烯基苯树脂法提取上述20份血样DNA，使用AmpFℓSTR®Identifiler®Plus PCR扩增试剂盒（美国Thermo Fisher Scientific公司），经9700型PCR仪（美国AB公司）进行PCR复合扩增，扩增产物应用3130xl基因分析仪（美国AB公司）分析，结果20份血样的基因分型均与张某血样分型结果一致，未检出薛某的基因分型。

薛某心血和张某血样作为已知样本独立检验，检验结果见表1。

表1 薛某和张某基因分型

1.2.2 复检

将凶器正反两面雕刻雄鹰图案部分各划出前、中、后三个区域，每个区域取5个采集点，共取30个点（图1）。采用毛坤云等[1]报道的载体法提取微量血迹，用细小的湿棉线擦取直径1～2mm圆形区域的血样，棉线微微发红后放入96孔PCR板中。取样完成后将PCR板于95℃下烘干3min，然后采用直接扩增技术，每孔加入10 μL Goldeneye®DNA身份鉴定系统20A［基点认知技术（北京）有限公司］PCR反应液（内含PCR缓冲液4.0μL，引物混合物2.0μL，Taq聚合酶 0.16 μL，去离子水 3.84 μL），震荡混匀，1 000×g离心1 min后进行PCR扩增。PCR反应程序：95℃5min；94℃ 30s，60℃ 1min，70℃ 1min，循环 28 次；60℃ 60min。经3130xl基因分析仪分析，共有28个样本检出STR分型，其中24个样本为张某DNA分型，4个样本为张某和薛某的混合分型（图2）。4个混合分型的取样位置均处在凶器背面的12～15号采集点（图1）。混合分型图谱中等位基因峰高、面积表现完全符合来自张某和薛某两人混合基因型的特点。

图2 混合分型图谱

1.3 现场勘验及尸体检验

据现场勘验员介绍，案发时，凶手将薛某刺倒后追刺张某。张某在逃跑过程中，多处被刺，现场地面残留大量滴落状血迹。

尸体检验见薛某内衣上血迹较多，外衣表面及其倒地处地面无明显血迹。左胸部刺创，心脏破裂。胸腔内见2000mL积血。

2 讨 论

结合案情分析凶器上薛某血迹极少的原因，案发时天气寒冷，薛某衣着厚实，血液流出时受到衣物阻挡未大量喷溅。凶器在被拔出薛某身体时受到多层衣物的擦拭，损失了部分血迹。凶手追砍张某时挥动凶器，也会造成血迹损失。凶器在多次刺入和拔出张某身体时，反复受到肌肉组织和衣物的擦拭，最终造成薛某血迹损失殆尽，或混在大量的张某血迹中。复检结果印证了上述猜测，由于刺入深度和角度的客观限制，处于凶器后部某一面的薛某血迹有机会残留下来。为了避免优势扩增现象[2]，复检时采用了单次取样范围最小、模板量最少的载体法。由于载体法省去了PCR模板的纯化过程，血迹中的抑制剂必然存在于扩增体系中，因此复检扩增时改用Goldeneye®DNA身份鉴定系统20A[3]，该试剂盒具有较强的抗血红素抑制能力和破碎细胞膜的功能，最终获得了理想的实验结果。本案例提示，在致伤多人凶器血迹的检验鉴定中，应充分了解案情，当未能检出第一受伤者的血迹时，应侧重检验凶器后部，分区域、多点、微量提取，可较常规方法获得更好的检验效果。本案选用的检验方法灵敏度极高，操作时鉴定人应戴口罩、手套，同时保证眼科剪、眼科镊等器材的洁净，严防污染。