盐酸克林霉素棕榈酸酯制剂的一致性评价研究

陈洪波

摘 要：建立反相高效液相色谱法测定盐酸克林霉素棕榈酸酯分散片中盐酸克林霉素棕榈酸酯的体外溶出度并绘制溶出曲线。方法：采用奥泰公司 C18 色谱柱（284 mm×4.6mm，5μm），0.1mol/L磷酸二氢钾（85%的磷酸调pH3.5）∶乙腈∶甲醇（700∶150∶150）为流动相，检测波长为280nm，流速为1.0ml/min，柱温为30℃。盐酸克林霉素棕榈酸酯在0.17～1.7mg·mL-1范围内呈良好的线性关系。盐酸克林霉素棕榈酸酯平均回收率分别为99.2%。结论：本法简便、准确，可用于盐酸克林霉素棕榈酸酯分散片中盐酸克林霉素棕榈酸酯的溶出度测定。

关键词：盐酸克林霉素棕榈酸酯分散片；含量；测定

盐酸克林霉素棕榈酸酯为克林霉素的衍生物，体外无抗菌活性，在体内经酯酶水解形成克林霉素而发挥抗菌活性。盐酸克林霉素棕榈酸酯用于革兰阳性菌引起的下列各种感染性疾病，如扁桃体炎、慢性支气管炎急性发作、前列腺炎、败血症、腹膜炎、肺炎、蜂窝组织炎、创伤、急性肾盂肾炎、化脓性中耳炎、口腔感染等。本实验采用反相高效液相色谱法测定盐酸克林霉素棕榈酸酯分散片中盐酸克林霉素棕榈酸酯的体外溶出度并绘制溶出曲线。

1仪器与试药

1.1仪器：C806溶出试验仪（北京中西远大科技有限公司）；恒信C-1000柱温箱（武汉恒信世纪科技有限公司）；IKA RV10数显型旋转蒸发仪（上海泰坦科技股份有限公司）； 721数显分光光度计（上海垒固仪器有限公司）；600220液相保护柱（天津琛航科苑科技发展有限公司）；BT-V20A/B高精度恒温水槽（上海百典仪器设备有限公司）；LU230四元低压梯度液相色谱分析系统（大连依利特分析仪器有限公司）；电子天平FA1004型（南京华欣分析仪器制造有限公司）；优普ULUP-I微量分析型超纯水器（四川优普超纯科技有限公司）；Edwards nXDS10i涡旋式干泵（北京帅恩科技有限责任公司）。

1.2色谱柱：奥泰公司 C18 色谱柱（284 mm×4.6mm，5μm）。

1.3对照品：盐酸克林霉素棕榈酸酯 购自中国药品生物制品检定所。

1.4试剂：三乙胺（昆山诺普森实验室用品科技有限公司）、磷酸（昆山诺普森实验室用品科技有限公司）、磷酸二氢铵（昆山诺普森实验室用品科技有限公司）、乙腈（杭州萧山创益化工仪器有限公司）、甲醇（昆山诺普森实验室用品科技有限公司）。

1.5试药：盐酸克林霉素棕榈酸酯分散片

2测定方法确定

2.1色谱条件

依据查阅文献及考查的结果，确定色谱条件如下[1-6]。流动相：0.1mol/L磷酸二氢钾（85%的磷酸调pH3.5）∶乙腈∶甲醇（700∶150∶150）为流动相，检测波长：280nm，流速：1.0m·min-1。柱温：30℃。

2.2对照品溶液的制备

精密称取盐酸克林霉素棕榈酸酯对照品适量，置容量瓶中，加流动相制成每1mL含0.5mg的溶液，即得。

2.3盐酸克林霉素棕榈酸酯溶出度测定方法

取本品，照溶出度测定法（中国药典2015版附录），分别以四种溶剂900毫升为溶出介质，转速为55r/min，依法操作，经5分钟时，取溶液2mL，置10mL量瓶中，加水稀释至刻度，摇匀，过滤，按2.1项下的色谱条件，取续滤液10μl，注入液相色谱仪。

2.4精密度试验

精密称取盐酸克林霉素棕榈酸酯对照品适量，加流动相使溶解，制成浓度为0.5mg·mL-1的供试品溶液。照上述色谱条件，精密吸取10μl，连续进样6次，记录峰面积。结果，RSD=0.82%，表明本方法精密度良好。

2.5对照品的线性考察

精密称取盐酸克林霉素棕榈酸酯对照品85mg，置5ml容量瓶中，加入流动相使溶解并稀释至刻度，摇匀，分别精密吸取0.5、1.5、2.0、2.5、3.0、3.5、4.0、4.5、5.0mL，置于5mL量瓶中，加流動相稀释至刻度，摇匀。分别精密上述溶液吸取10μL，注人液相色谱仪，依照2.1项下的色谱条件测定，记录色谱峰。以峰面积（Y）为纵坐标，对照品进样量（X）为横坐标，绘制标准曲线，计算回归方程。结果表明，盐酸克林霉素棕榈酸酯在0.17～1.7mg·mL-1范围内呈良好的线性关系。

2.6重现性试验

称取同一批的盐酸克林霉素棕榈酸酯分散片样品6份，按测定方法项下的方法溶出度测定方法并计算样品的RSD值，结果RSD为0.81%，结果表明此方法的重现性良好。

2.7准确度试验

采用加样回收试验，取已知含量的同一批供试品各6份，精密称定，分精密添加一定量的盐酸克林霉素棕榈酸酯对照品，测定含量（同时测定样品含量），计算回收率。6次测定的平均回收率为99.2%，RSD为0.91%。

3讨论

分别考察

0.01 mol/L磷酸氢二钠-磷酸缓冲液（p H=2.2）-水（80：20）；乙腈-水（体积比为65∶35）；甲醇-0.4%磷酸（47：53）；甲醇∶水∶冰乙酸（172∶27∶1）；0.1mol/L磷酸二氢钾（85%的磷酸调pH3.5）∶乙腈∶甲醇（700∶150∶150）为流动相，0.05mol/L磷酸二氢钾—乙腈—三乙胺（60∶40：0.01）不同比例的流动相，结果以0.1mol/L磷酸二氢钾（85%的磷酸调pH3.5）∶乙腈∶甲醇（700∶150∶150）为流动相为流动相，供试品各峰分离效果最好，故选用0.1mol/L磷酸二氢钾（85%的磷酸调pH3.5）∶乙腈∶甲醇（700∶150∶150）为流动相为流动相。本实验表明此方法可用于盐酸克林霉素棕榈酸酯分散片中盐酸克林霉素棕榈酸酯的溶出度测定。盐酸克林霉素棕榈酸酯分散片中盐酸克林霉素棕榈酸酯的溶出度与参比制剂相当，溶出曲线相似。本法操作简便，结果准确可靠，可用于本品中盐酸克林霉素棕榈酸酯一致性评价。

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