植物乳杆菌（HCS03-002）通便功效试验

汤纯 闵祥博 范翠翠 张春宇

益生菌是一类对宿主有益的活性微生物，其能够粘附于肠道中，通过短暂的定植促进肠道内微生态平衡，促进有益菌增殖、抑制有害菌生长、增强机体免疫力、促进营养物质消化吸收。小儿便秘是一种常见临床消化道疾病，多因饮食不当，过多食入辛、辣、油腻食物或过多食用少渣精细食物，导致肠道干涩，蠕动减慢从而导致便秘。这种便秘多为功能性便秘，少见病理性便秘，其根本原因为肠道微环境失调所导致。本研究针对功能性便秘这种特定症状作为研究方向，应用盐酸洛哌丁胺作为造模药物建立肠蠕动抑制模型，考察汉臣氏（沈阳）儿童制品有限公司自主分离的菌株植物乳杆菌HCS03- 002的通便益生特性，为今后该菌株的后续开发、生产提供数据支持。

材料与方法

实验动物。昆明（KM）小鼠，18～22g，4～5周龄，50只，雄性。购于辽宁长生生物技术股份有限公司，许可证号：SCXK（辽）2015- 0001。

菌种。汉臣氏（沈阳）儿童制品有限公司分离的植物乳杆菌HCS03- 002，实验室保存。

试剂及仪器。盐酸洛哌丁胺、活性炭粉、阿拉伯树胶、天平、注射器、直尺、眼科镊、手术剪。

实验方法。

（1）实验动物分组样品给予时间 实验设三个剂量组，一个空白对照组和一个模型对照组。空白对照组和模型对照组同途径给蒸馏水。

样品给予时间21天。分組及给样方案详见表1。

（2）实验步骤 墨汁配制：准确称取阿拉伯树胶100g，加水800ml，煮沸至溶液透明，再称取活性炭粉50g加至上述溶液中煮沸3次，待溶液凉后加水定容到1000ml，于冰箱中4℃保存，用前摇匀。

盐酸洛哌丁胺溶液（0.8mg/ml）配制：准确称取盐酸洛哌丁胺16mg，加入20ml蒸馏水充分溶解，现用现配。

模型建立：小鼠平衡饲养3天后，按体重随机分组，连续给样品21天后，各组小鼠禁食不禁水16h。模型对照组和三个剂量组给予盐酸洛哌丁胺（8mg/kg），空白对照组给蒸馏水。

指标测定：给盐酸洛哌丁胺后0.5小时，剂量组分别灌胃给予含受试样品的墨汁，空白和模型对照组灌胃墨汁；25分钟后立即脱颈椎处死动物，从幽门至墨汁前沿为“墨汁推进长度”。按下式计算墨汁推进率：

数据处理及结果判定：应用SPSS软件的单因素分析方法（One- Way- Anova）对墨汁推进率进行组间统计学比较。

结果

墨汁推进率。根据各组实验动物墨汁推进率（表2）可知：本次试验模型对照组墨汁推进率（49%）低于空白对照组（73%），本次试验造模成功；通过组间统计学分析，植物乳杆菌3g/kg组（63%）与模型对照组（49%）比较，有显著性差异。

实验过程中，模型对照组墨汁推进率明显低于空白对照组，说明本方案造模方法是可行的，能够实现肠蠕动的抑制。各给样组均表现出有一定的通便功效，1g/kg、2g/kg、3g/kg剂量组墨汁推进率分别为55%、61%、63%，均高于模型对照组（49%），但未表现出明显的剂量依赖关系；这种现象说明植物乳杆菌可能在1g/kg剂量下已经达到最大肠道定植效果，提高给样剂量如2g/kg及3g/kg无法继续放大通便效果；这种现象也有可能是因为给样周期短导致的，在后续的实验中，在保留现有方案下，可以通过增加其他剂量组或调整给样周期来进行改进，以期达到最优试验效果，从表观水平上，进一步评价植物乳杆菌（HCS03-002）的小鼠体内通便效果。综上，在3g/ kg剂量下，连续21天口服灌胃植物乳杆菌（HCS03- 002），对小鼠肠蠕动抑制模型有较好的通便效果；同时说明，本公司植物乳杆菌（HCS03- 002），具有一定的开发潜力。

作者简介：

汤纯（1987-），男，助理工程师，从事食品及保健品研发工作。通讯作者：汤纯（1987-）。