改进代茶饮保健作用实验研究

王昕 陈星宇 刘继平

【摘要】目的：对改进代茶饮的保健作用进行评价。方法：观察改进代茶饮对小鼠耐缺氧、抗疲劳、睡眠时间的影响，以及对小鼠记忆功能、免疫、抗氧化等方面的改善作用。结果：耐缺氧、抗疲劳及睡眠试验研究结果表明，改进代茶饮组与对照组相比存活时间延长（P<0.05），游泳时间明显提高（P<0.01），睡眠时间无较大差异；改进代茶饮能明显降低小鼠体重（P<0.01），升高小鼠脾脏脏器指数（P<0.05），而对胸腺脏器指数无显著影响；改进代茶饮能升高小鼠血清SOD及GSH-βx活性（P<0.05），提高MDA的水平（P<0.01）；跳台试验学习和记忆测试中，改进代茶饮的反应时间显著较长（P<0.01）；错误次数明显较少（P<0.05）；水迷宫实验训练中，改进代茶饮可明显缩短小鼠寻找平台的潜伏期和游泳距离（P<0.05）；水迷宫试验测试中，改进代茶饮可明显延长小鼠设定目标象限的游泳距离（P<0.01），穿越平台次数增多。结论：改进代茶饮有一定保健作用。

【关键词】改进代茶饮；保健作用；实验研究

亚健康通俗来说就是似病非病，它给人们带来种种不适，但却没有显著的病理指标改变。可能表现为失眠，有气无力，精神差等等状态低下的症状。当今社会，绝大多数人从小就背负了巨大的学习压力，成年后复杂多变的人际交往，工作中面临各方压力都是可能导致亚健康的。亚健康的人需要及时的治疗，因其身体机能已经有所下降，所以不尽早干预治疗，则有很大可能将亚健康的状态转变为患病的状态，毕竟亚健康的病人其免疫力已经显著降低。如此说来，用传统医学来解决亚健康的问题，是具有开创性和现实意义的。针对保健市场鱼龙混杂的局面，根据我们传统医学“治未病”的思想和“药食同源”的理念，结合现代科学技术来开发中药代茶饮，可为亚健康状态人群的保健提供新的科学方法。

1 材料

1.1 实验动物

雄性SD小鼠80只，SPF级，体重20～22g，空军军医大学实验动物中心供应，许可证号：SCXK（军）2012-0007。

1.2 试剂

改进代茶饮水提液，制备：取干燥改进代茶饮，加蒸馏水，煮沸2次；每次50min，合并滤液，置冰箱中备用。用时采用蒸馏水溶解配置成浓度1g/mL的液体。超氧化物歧化酶（SOD）测试盒（A001-3）、谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-PX）测试盒（A005）、丙二醛（MDA）测试盒（A003-1），以上试剂来源均为南京建成生物工程有限公司。

1.3 主要仪器

低速离心机（江苏省金坛市正基仪器有限公司，型号KA-1000）。酶标仪（美国BioTek公司，型号ELX8080IU）。跳台（山东省医学科学院设备站，型号YLS-3T）。Morris水迷宫（上海吉量）。电子天平（赛多利斯科学仪器有限公司，型号BSA-224S）。

2 方法

2.1 耐缺氧实验

2.1.1 实验

取雄性小鼠，体重20±2g，自由摄食摄水，动物室内只在白天光照12小时，动物室温度维持在22-25℃。把15g消除二氧化碳和水的钠石灰放到250毫升的广口瓶中。再取20只测量过体重的小鼠随机均分为两组。一组给予改进代茶饮适量灌胃（根据人日用量计算小鼠等效量），另一组给予等量生理盐水。给茶30min时，把2组小鼠一并放置于密封广口瓶内。随即开始计时，留心小鼠的状态，于小鼠死亡时，得出实验中小鼠所存活的时间。综合实验结果，求得改进代茶饮组小鼠平均存活时间，并与对照组相比，求得存活时间延长的百分率。

2.1.2 计算方法

存活时间延长百分率=（受试茶组平均存活时间-对照组平均存活时间）/对照组平均存活时间×100%。

2.2 抗疲劳实验

取20只测量过体重的小鼠随机均分成两组。一组给予改进代茶饮适量灌胃（根据人日用量計算小鼠等效量），另一组给予等量生理盐水。给茶后30分钟把小鼠（每次1只）投入玻璃缸进行游泳试验，水深25cm，水温设置为300C，用秒表记录小鼠鼻孔沉下水面所用时间，统计比较。

2.3 改进代茶饮对小鼠睡眠时间的影响

取20只测量过体重的小鼠随机均分成两组。一组给予改进代茶饮适量灌胃（根据人日用量计算小鼠等效量），另一组给予等量生理盐水。给茶30分钟后，小鼠腹腔注射0.15%戊巴比妥钠，观察记录睡眠潜伏期和睡眠持续时间，统计比较。

2.4 改进代茶饮对小鼠记忆功能、免疫、杭氧化作用的研究

2.4.1 实验动物分组与给药

取20只测量过体重的小鼠随机均分成两组。一组给予改进代茶饮适量灌胃（根据人日用量计算小鼠等效量），另一组给予等量生理盐水。连续给茶15d。

2.4.2 指标测定

2.4.2.1 行为学

（1）跳台实验。每组小鼠喂对应茶液15d时，把小鼠放到跳台仪中，3min后。再将最底层铜栅通上36V交流电，记录小鼠受到电击后跳上跳台的反应时间以及小鼠5min内受电击的次数（出错次数），作为小鼠的学习成绩。24h后把小鼠放置到跳台仪中顺应环境变化3min，然后将其放置到跳台上，记录小鼠第1次跳下平台的潜伏期及3min内受电击的次数（出错次数），作为小鼠的记忆成绩。

（2）Morris水迷宫实验。实验在各组小鼠喂对应茶液15d后开始。迷宫站台半径20.0cm，半径240cm，水池高50cm，4个入水点分别为A、B、C、D，且把水迷宫等分为4个象限。迷宫的上面是一个由电脑所控制，能记录小鼠活动的摄像机，能监测小鼠的所有活动。小鼠的学习记忆能力用小鼠找到站台所需时间的长短来表示。实验室须绝对安静，水温保持的范围为22±0.5℃。在开始实验前，小鼠须早晚训练2min，每次从不同入水点把试验小鼠置于水迷宫中，若小鼠 2min未找到站台，则把小鼠拿到站台上并让小鼠在站台上等待20s。第3天的水迷宫测试随机选一下水点进行。

2.4.2.2 血清SOD、MDA、GSH-Px測定

最后一次喂对应茶液后24h，把小鼠眼球摘除取血，然后采用常规办法分离血清。按照试剂盒方法测定血清SOD、MDA、GSH-Px值。

2.4.2.3 脏器指数

小鼠杀死后赶快取出胸腺、脾脏。吸去器官上的血液，并去除附着在器官上的脂肪、系膜，同时用电子天平称取其湿质量。最后根据小鼠体质量计算胸腺和脾脏指数。

胸腺、脾脏指数计算公式：脏器指数=脏器质量/小鼠体质量（mg/g）。

3 结果

3.1 改进代茶饮对小鼠耐缺氧、抗疲劳、睡眠时间的影响实验

比之于空白组，改进代茶饮组存活时间明显延长（P<0.05）；游泳时间提升（P<0.01）；而睡眠时间与空白组无差异，见表1。

3.2 改进代茶饮水提液对小鼠体重及脏器指数的影响

比之于空白组，改进代茶饮组的体重明显降低（P<0.01），胸腺脏器指数与空白组无明显差异；脾脏脏器指数升高（P<0.05，表2）。

3.3 改进代茶饮水提液对小鼠抗氧化指标的影响

比之于空白组，改进代茶饮组小鼠血清SOD活力明显升高（P<0.05）；MDA水平显著下降（P<0.01）；活力显著升高（P<0.05，表3）。

3.4 改进代茶饮水提液对小鼠跳台试验的影响

比之于空白组，学习期间，改进代茶饮组的反应时间明显较长（P<0.01）；错误次数明显较少（P<0.05）；记忆时期，改进代茶饮组的潜伏期较长（P<0.01）；错误次数较少（P<0.05，表4）。

3.5 改进代茶饮水提液对小鼠水迷宫试验潜伏期的影响

训练期间，比之于空白组，改进代茶饮组小鼠游泳潜伏期越来越短（表5）。

3.6 改进代茶饮水提液对小鼠水迷宫试验总路程的影响

训练期间，比之于空白组，改进代茶饮组在整个水迷宫象限内总路程越来越短（表6）。

3.7 小鼠水迷宫试验目标象限时间和穿越次数的影响

测试期间，比之于空白组，改进代茶饮组在目标象限路程明显较长（P<0.01，表7，图1）；穿越平台的次数增多。

4 讨论

如前文所述，亚健康通俗来说就是似病非病，它给人们带来个种种不适，但却不是医学中的疾病。本论文的研究对象即为针对亚健康状态所设的改进代茶饮，其组成为黄芪，党参，熟地，玫瑰花，绿萼梅，麦冬。改进代茶饮的组成里黄芪能益气升阳，益卫固表；党参补中益气，生津养血；熟地能峻补血气，生精填髓；玫瑰花行气散结，活血祛瘀；绿萼梅条达肝气；麦冬生津润肺。现代药理学研究表明，党参能增强人体抗应激能力及免疫力；可抗溃疡，增强肠胃蠕动等作用。黄芪能提高免疫力。熟地能延缓衰老，益智，同时能提高免疫力，增强造血功能。玫瑰花可扩张血管，能预防心肌梗死，亦能抗部分病毒及病菌，如白血病病毒，伤寒杆菌等。麦冬可提高免疫力，有抗心肌缺血，抗心律失常，耐缺氧抗疲劳及降血糖等作用。

本研究所做实验中，耐缺氧实验显示改进代茶饮能使小鼠在缺氧环境中存活时间延长；抗疲劳实验显示改进代茶饮可使小鼠耐力提高；睡眠时间影响实验表明改进代茶饮改善了小鼠的睡眠情况。在对改进代茶饮对小鼠记忆功能、免疫、抗氧化作用的研究中也显示小鼠的记忆功能有所增强，免疫力增强，抗氧化能力增强。由此可见，改进代茶饮确有保健作用，可长期服用。

本研究旨在通过对改进代茶饮的研究，来分析改进代茶饮的保健效果，以寻求合适的产品来改善人们亚健康的状态。目前来看，改进代茶饮不失为改善亚健康的良好产品，值得推广。

参考文献

[1]任汉阳，张瑜，刘红雨等.润下药火麻仁对便秘小鼠杭氧化作用的实验研究[C].中华中医药学会中药基础理论分会首届临床中药学学术研讨会论文集，2008，5（01）：158-162.

[2]张卓睿，毛迪瑞，高晗等.蓝毒花青素对小鼠抗疲劳及体内抗氧化作用[J].食品科学，2016，11（14）.

[3]刘继平，程玥，关建建等.七福饮对糖尿病脑病模型大鼠认知障碍及神经病理改变的影响[J].中药药理与临床，2015，31（05）：15-19.

[4]胡太超，刘玉敏，陶荣珊等.鹿茸多肤的抗疲劳作用机制研究[J].吉林农业大学学报，2015，37（04）：469-475.

[5]王菌，刘淑集，苏永昌.天然虾青素的抗疲劳及杭氧化作用研究[J].西南大学学报（自然科学版），2015，37（09）.

[6]王丹，高永欣，冯小雨等.山药对小鼠体力疲劳缓解及抗氧化作用的研究[J].河南工业大学学报（自然科学版），2016，37（01）.

[7]冯伟伟，吴美媛等.灵芝酸枣仁胶囊改善睡眠的功能研究[J].生物技术进展，2017，7（04）：327-330.

[8]付悦然，郑或，王明阳等.北五味子联用甜叶菊代茶饮研究与开发[J].辽宁中医药大学学报，2017，19（05）.

[9]曹寅，胡园，赵海霞等.开心散对缺氧和力竭运动小鼠的抗氧化及杭疲劳作用研究[J].解放军药学学报，2011，27（04）.

[10]常柄权，黄山，李斌等.复方玛咖黑蒜颗粒抗疲劳与耐缺氧作用研究[J].中医药导报，2017，23（13）.