HPLC法测定养阴镇静丸中五味子醇甲的含量

薛雅光，薛雅峰，闫小钧，郝羚竹，赵琳琳，郭美玲

（1.吉林省药品检验所，吉林 长春 130033；2.吉林省医疗器械检验所，吉林 长春 130062）

0 引言

本文构建HPLC法以评测在养阴镇静丸之中五味子醇甲的总量，现报道如下。

1 材料与方法

1.1 材料

（1）试药：五味子醇甲有关的对照物（批号即：110857-200608），生产厂商即：中国药品生物制品检验所，予以总量评测；样本生产厂商即：长春人民制药有限公司[1-3]。

（2）主要仪器：Agilent 1200高效液相色谱仪。

1.2 试验方法

（1）色谱条件。色谱柱如：Agilent HC C18（规格如：250×4.6 mm，5 µm）；甲醇－水（比重如：58∶42）即流动相；监测波长即：250 nm；进样量10µl[4]。

（2）对照物相应的溶液。选出五味子醇甲相应的对照物适宜，精准辅以称量，加进70%的甲醇作成在1 mL之中囊括了10 µg的溶液，而得[5]。

（3）供试品溶液。取重量差异项下大蜜丸，剪碎，或是选出装量差别项之中的水丸，磨细，选出1 g，精准辅以称量，放进锥形瓶之中，精准加进25 mL且70%的甲醇，紧密，称量重量，等全方位得以溶散后，超声施行30 min的操作（功率即：250 W，频次即：50 kHz），等冷，称量重量，借助70%的甲醇补上缺失的重量，晃匀，滤析，选出续滤液，而得[6-9]。

（4）阴性样本的溶液。选出缺失五味子的养阴镇静丸样本，依据予以试品溶液的配备方式配备阴性样本溶液[8]。

（5）干扰型实验。依据如上色谱情况予以评测，色谱图详情如图1-4。结果表明其它成分测定无干扰。

（6）标准曲线的绘制。精准吸走五味子醇甲相应对照物的溶液（浓度即：10.43 µg/mL）即：1、5、10、15、20 µl注进液相色谱仪之中，依据设定的色谱情况辅以评测，将对照物的进样总量（µg）当作横坐标，色谱峰范畴当作纵坐标，汇编规范曲线。测算回归方程即：Y即—0.485+81991.39X，R2=0.9999，结果表明，五味子醇甲在0.010-0.209µg线性关系良好[10]。

（7）稳定性试验。精密吸取同一供试品溶液10µl，依法分别于0，4，8，20，24 h各测试1次。五味子醇甲平均峰面积的RSD=1.2%（n=5）。

（8）精密度试验。精密吸取同一份供试品溶液，按照本文制定的色谱条件，连续检测六次，测定五味子醇甲峰面积[8]，六次测定结果的平均峰面积的RSD为0.9%（n=6）。

（9）重现性试验。对于同一份样品，按照本文制定的方法平行检测六份，测定含量。结果五味子醇甲含量的RSD=1.0%（n=6）[11-12]。

图1 溶剂HPLC色谱图

图2 阴性HPLC色谱图

图3 对照物HPLC型色谱图

图4 供试物HPLC型色谱图

（10）回收率试验。精准称量同法评测设定总量的供试物总共6份，单份即：0.5 g，精准加进五味子醇甲相应的对照物25 mL的溶液之中（浓度即：0.004173 mg/mL），依据设定规范的方式予以选出、评测，测算收回率，平均收回率即：99.7%，RSD即：0.9%。成果指出了这一方式的收回率较优、精准程度较大。

2 样品测定结果

选出对照物的溶液与供试物的溶液适宜，依据如上色谱分析情况施行评测，凭借外标法评测总共17批样本之中五味子醇甲的总量，

3 讨论

色谱柱的选择，在本次试验研究之下，对比了Diamonsil C18型色谱柱（规格如：250×4.6 mm，5µm）、Agilent HC C18型色谱柱（规格如：4.6×250 mm，5 µm）、Alltima C18型色谱柱（规格如：250×4.6 mm，5 µm），三类色谱柱都达成了方式体系之中实用性的规定。表明本实验耐用性好。