油菜挥发物对三七根腐病菌的抑菌活性及其化学成分GC—MS分析

2018-09-10 06:07刘海娇杨小玉顾红蕊袁也朱敏郝莉雨刘格杨敏张子龙
南方农业学报 2018年4期
关键词:三七抑菌活性根腐病

刘海娇 杨小玉顾红蕊 袁也 朱敏 郝莉雨 刘格 杨敏 张子龙

摘要:【目的】研究油菜挥发物对三七主要根腐病菌的抑制作用,为利用油菜与三七轮作或作为生物熏蒸材料控制三七根腐病害提供指导。【方法】利用挥发物收集装置收集油菜茎和叶组织的挥发物,通过气相色谱—质谱联用技术(GC-MS)分析油菜切段和研磨挥发物成分及相对含量;采用菌丝生长速率法测定油菜茎和叶挥发物及挥发物中硫醚类和异硫氰酸酯类化合物对3种根腐病菌(腐皮镰刀菌F-3、恶疫霉菌D-1和锈腐病菌RS006)的抑菌活性。【结果】油菜茎和叶对F-3菌株的抑菌活性表现出低促高抑的浓度效应,在最大用量2.0 g/皿时对D-1和RS006菌株的抑制率均大于65.00%。油菜切段挥发物的主要成分为二甲基二硫醚(相对含量55.86%),研磨的主要成分为叶醇(相对含量54.14%)等醇类物质。硫醚类和异硫氰酸酯类化合物中的二甲基二硫醚(DMDS)、二甲基三硫醚(DMTS)和異硫氰酸烯丙酯(AITC)对三七根腐病菌均有抑菌活性,强弱顺序为AITC>DMDS>DMTS。DMDS在浓度1200 mL/m3时对F-3、D-1和RS006菌株的抑制率分别为35.24%、73.23%和52.19%;DMTS在50 mL/m3时对F-3和RS006菌株的抑制率分别为61.55%和78.71%,对D-1菌株的抑制率为100.00%;AITC在8 mL/m3时对F-3和RS006菌株的抑制率为53.85%和79.39%,在2 mL/m3时即可完全抑制D-1菌株的生长。【结论】油菜挥发物中的DMDS、DMTS和AITC有较强的抑菌活性,利用油菜与三七轮作或对土壤进行生物熏蒸以控制三七根腐病具有很大的开发潜力。

关键词: 油菜;挥发物;三七;根腐病;抑菌活性

中图分类号: S476.9 文献标志码:A 文章编号:2095-1191(2018)04-0695-08

Antimicrobial activities of Brassica campestris L. volatiles to Panax notoginseng(Burk.) F. H. Chen root rot pathogens

and chemical component analysis by GC-MS

LIU Hai-jiao1, YANG Xiao-yu1, GU Hong-rui2, YUAN Ye2, ZHU Min2, HAO Li-yu1,

LIU Ge1,YANG Min2*, ZHANG Zi-long1*

(1College of Chinese Pharmacy, Beijing University of Chinese Medicine, Beijing 102466, China; 2Key Laboratory for Agro-biodiversity and Pest Control of Ministry of Education, Yunnan Agricultural University, Kunming 650201, China)

Abstract:【Objective】Inhibitory effects of Brassica campestris L. volatiles to major Panax notoginseng root rot pathogens were studied to provide guidance for controlling Panax notoginseng(Burk.) F. H. Chen root rot disease by B. campestris-P. notoginseng rotation or using B. campestris as biological fumigation materials. 【Method】Volatiles of B. campestris stem and leaves tissues were collected by volatile collection device, and the components and relative contents of volatiles from dissection and grinding tissues were analyzed by gas chromatography-mass spectrometry(GC-MS). After that, the antifungal activity of volatiles from stems and leaves and sulfoether and isothiocyanate compounds in the voatiles against three root rot pathogens(Fusarium solani F-3, Phytophthora cactorum D-1 and Cylindrocarpon destructans RS006) were determined by hyphal growth rate method. 【Result】Low concentration of B. campestris stems and leaves promoted the activity of strain F-3, whereas high concentration inhibited its activity. The inhibitory rates against strains D-1 and RS006 were higher than 65.00% with the dosage of 2.0 g/dish. The main components of B. campestris dissection tissue volatiles was dimethyl disulfide(relative amount 55.86%). The main components of B. campestris grinding tissue volatiles was 3-hexen-1-ol,(Z)-(relative amount 54.14%). Dimethyl disulfide(DMDS),dimethyl trisulfide(DMTS) and allyl isothiocyanate(AITC), which belonged to sulfoether and isothiocyanate, had antimicrobial activities against P. notoginseng pathogens, and the inhibitory activity order was as follows: AITC>DMDS>DMTS. The inhibitory rates of DMDS against strains F-3, D-1, and RS006 were 35.24%, 73.23% and 52.19% respectively at concentration of 1200 mL/m3. The inhibitory rates of DMTS against strains F-3 and RS006 were 61.55% and 78.71% at concentration of 50 mL/m3, and the inhibitory rate of DMTS against strain D-1 was 100.00% . The inhibitory rates of AITC against strains F-3 and RS006 were 53.85% and 79.39% at concentration of 8 mL/m3, and it completely inhibited the growth of strain D-1 at concentration of 2 mL/m3. 【Conclusion】DMDS, DMTS and AITC in the B. campestris volatiles inhibitoty effects on the pathogens. The results imply that B. campestris-P. notoginseng rotation or biological fumigation on soil could be dveloped as a method to control P. notoginseng root rot.

Key words: Brassica campestris L.; volatile; Panax notoginseng(Burk.) F. H. Chen; root rot; antimicrobial activity

0 引言

【研究意义】三七[Panax notoginseng(Burk.) F. H. Chen]是我国特有的名贵中药材,在治疗心脑血管疾病方面疗效显著(李涛等,2015;杨春艳等,2016)。三七种植中连作障碍严重,尤其是土传病害根腐病最突出,严重制約了三七种植业的健康持续发展(杨永建等,2008;汪静等,2015)。植物挥发物是植物与微生物间产生化感作用的重要物质,部分植物挥发物可直接抑制病原菌的孢子萌发、菌丝生长或诱导植物增强抗病性以减轻病害。油菜是最常用的生物熏蒸材料之一,其挥发产生的异硫氰酸酯类物质对镰刀菌(Fusarium)和疫霉(Phytophthora spp.)等多种重要土传植物病原菌均有一定的抑制作用(张丽萍等,2017)。因此,探究油菜挥发物对三七根腐病菌的抑菌活性,对利用油菜与病原菌寄主植物轮作或进行土壤生物熏蒸及推广生态友好型病害控制方式具有重要意义。【前人研究进展】十字花科芸薹属植物是最常用的生物熏蒸材料,其细胞受损后产生挥发性的异硫氰酸酯类物质(Isothiocyanates, ITCs)可抑制或杀死多种土传植物病原菌(Sarwar et al., 1998)。有研究报道,甘蓝、芥蓝、白花椰菜等芸薹属植物熏蒸对黄瓜枯萎病菌、番茄枯萎病菌、水稻纹枯病菌、番茄立枯病菌和棉花枯萎病菌等多种病原菌有较好的抑制效果(李明社等,2006)。油菜(Brassica campestris L.)为芸薹属植物,油菜根茬粉碎还田后可使后作土壤中的细菌数量增加而真菌减少;油菜根茬的生物熏蒸作用可降低后作玉米丝黑穗病和纹枯病两种土传病害的发生率,同时有利于提高后作玉米产量(刘哲辉等,2017)。张丽萍等(2017)采用菌丝生长速率法测定不同油菜品种、不同部位硫苷含量及其对棉花黄萎病菌和红腐病菌的抑菌效果,发现油菜不同品种硫苷含量不等,同一品种的茎、根和籽中硫苷含量也存在差异,硫苷含量高的油菜品种晋黄芥对两种病原菌的抑制活性更好。【本研究切入点】目前,油菜作为熏蒸材料用于减轻三七根腐病的研究尚无报道。【拟解决的关键问题】采用菌丝生长速率法,研究油菜挥发物对三七主要根腐病菌菌丝生长的抑制活性,利用气相色谱—质谱联用技术(GC-MS)分析油菜挥发物的组成成分及相对含量,并测定其中硫醚类和异硫氰酸酯类化合物的抑菌活性,揭示油菜挥发物对三七根腐病菌的抑制效果及其作用的物质基础,为利用油菜与三七轮作或作为生物熏蒸材料控制三七根腐病害提供参考。

1 材料与方法

1. 1 供试材料

1. 1. 1 供试菌株 供试三七根腐病菌:腐皮镰刀菌(Fusarium solani)F-3、恶疫霉菌(Phytophthora cactorum)D-1和锈腐病菌(Cylindrocarpon destructans)RS006,均由云南农业大学农业生物多样性与病虫害控制教育部重点实验室提供。

1. 1. 2 供试植物材料 供试油菜(B. campestris L.)生长时间约60 d,市售。

1. 1. 3 供试培养基 马铃薯葡萄糖琼脂培养基(PDA):马铃薯去皮切块后称取200 g加水煮沸,双层纱布过滤,滤液中加入葡萄糖和琼脂各20 g,自来水定容至1 L;胡萝卜培养基(CA):胡萝卜切块后称取200 g加水煮沸,组织捣碎机捣碎后4层纱布过滤,滤液中加入琼脂20 g,自来水定容至1 L。配制好的培养基121 ℃灭菌20 min后倒成平板使用。PDA培养基用于培养F-3和RS006,CA培养基用于培养D-1。

1. 1. 4 供试试剂 二甲基二硫醚[梯希爱(上海)化成工业发展有限公司,纯度98%],二甲基三硫醚[梯希爱(日本)化成工业发展有限公司,纯度94%],异硫氰酸烯丙酯(山东西亚化学股份有限公司,纯度99%),次氯酸钠(天津市风船化学试剂科技有限公司,有效氯≥10.0%),正己烷(Fisher Chemical,色谱纯,纯度99.9%),丙酮(默克股份两合公司,色谱纯,纯度99.8%)。

1. 2 试验方法

1. 2. 1 油菜挥发物抑菌活性测定 取供试油菜地上部分,先用3%次氯酸钠表面消毒3 mim,随后用无菌水冲洗5次。茎和叶分开,分别切成1 mm3左右的小块置于灭菌容器中备用。在制备好的培养基中央接种直径5 mm的菌饼,在培养皿盖上均匀铺开供试植物组织。茎和叶分别设0.5、1.0和2.0 g/皿3个水平,以不放植物组织的培养基作为对照,每处理重复3次。封口膜密封培养皿后倒置于28 ℃恒温培养箱培养,待菌落长到培养皿直径的2/3时,采用十字交叉法测量菌落直径并计算抑制率(杨敏等,2013)。病原菌生长抑制率(%)=(对照菌落平均直径-处理菌落平均直径)/对照菌落平均直径×100。

1. 2. 2 供试植物挥发物收集 利用自制收集装置收集供试植物挥发物。收集装置由装有活性炭和变色硅胶的玻璃管、干燥缸、装有吸附树脂(PoraPakTM Q 80-100)的吸附柱、气体采样仪及连接各部件的软管组成。将植物组织置于干燥缸中,缸盖两侧打2个小孔,一端连接吸附柱和气体采样仪,另一端连接装有变色硅胶和活性炭的玻璃管。放入植物组织并密封干燥缸后打开气体采样仪进行抽气,空气经活性炭吸附杂质后进入变色硅胶吸收水分,然后进入干燥缸。空气经干燥缸后携带挥发物进入吸附柱并在此吸附挥发物,然后进入气体采样仪并泵出空气。

通过独立样本t 检验发现,油菜茎和叶的抑制效果仅对F-3菌株具有显著差异(P<0.05,下同),对D-1和RS006菌株的抑制效果差异均不显著(P>0.05,下同),因此,收集挥发物时茎叶合并收集。为最大限度收集油菜挥发的化感物质,本研究设2种组织处理方法:一是模拟油菜在生长中的自然挥发,将茎叶切成2 cm左右长段;二是模拟油菜细胞受损发生水解反应,将茎叶磨成匀浆。每种处理方式设3次重复,每次重复油菜茎叶用量为3 kg,连续收集24 h后取下吸附柱。用正己烷洗脱、氮吹浓缩后过0.22 μm滤膜,装入样品瓶利用气相色谱—质谱联用仪(岛津GCMS-QP2010 ultra)进行检测。

1. 2. 3 挥发物成分分析仪器与条件 GC条件:SH-Rxi-5Sil MS色谱柱(30.0 m×0.25 mm×0.25 μm)。起始柱温40 ℃,以3.0 ℃/min升温至80.0 ℃后,以5.0 ℃/min升温至260.0 ℃,保持30.00 min。载气为氦气,进样口温度250.0 ℃,进样量2.0 μL,进样方式为分流进样,分流比10∶1。MS条件:EI电离源,离子源温度230.0 ℃,接口温度250.0 ℃,扫描范围35~500 m/z,采集方式Scan,扫描间隔0.30 s。挥发物成分鉴定通过NIST14s谱图库检索保留时间,通过峰面积的百分比确定化合物的相对含量。

1. 2. 4 硫醚类和异硫氰酸酯类化合物抑菌活性测定 硫醚类和异硫氰酸酯类化合物是芸薹属植物生物熏蒸的主要物质,根据GC-MS分析结果从油菜挥发物中选取含量较高的硫醚类和异硫氰酸酯类化合物,购买标准品测定其对三七根腐病菌的抑制活性。将1.5 mL离心管的盖子剪下进行高压蒸汽灭菌,在制备好的培养基中央接种直径5 mm的菌饼,把灭菌后的离心管盖子放于培养皿盖的中央,将挥发物标准品加到离心管盖子中,以不加标准品为对照。标准品添加量先设为200、400、800和1200 mL/m3;若完全抑制病原菌生长,则依次降低浓度,每处理4次重复。培养条件及抑制率计算方法同1.2.1。

1. 3 统计分析

试验数据采用Excel 2010及SPSS 18.0进行统计分析,采用独立样本t 检验和Duncans新复极差法进行差异显著性分析。

2 结果与分析

2. 1 油菜挥发物的抑菌活性测定结果

油菜对3种根腐病菌的抑菌活性见表1。从表1可看出,油菜茎和叶对3种病菌的抑菌活性均随用量的增加而增强,在最大用量2.0 g/皿时,对3种病原菌的抑制率均显著高于较低用量(0.5和1.0 g/皿)。在本研究设置水平下,油菜茎和叶对F-3菌株及油菜叶对RS006菌株的抑制率表现出低促高抑的浓度效应,即在最低用量0.5 g/皿时对病原菌的生长表现为促进作用,当用量增加到1.0和2.0 g/皿时对病原菌的生长表现为抑制作用。油菜茎和叶在最高用量2.0 g/皿时对D-1和RS006菌株的抑制率较高,均在65.00%以上;对F-3菌株的抑制率较低,分别为18.23%和40.84%。综合3个用量来看(表2),油菜茎和叶对D-1和RS006菌株的抑制效果差异不显著,对F-3菌株的抑制效果差异显著。

2. 2 油菜挥发物GC-MS分析结果

2. 2. 1 油菜切段挥发物的化学成分 从油菜切段挥发物中共鉴定出17种化合物(筛选相似度在80%以上),包括醚类、苯环类、萜类、酯类、醇类、烯烃类和烷烃类共7类物质。其中,醚类为硫醚类化合物只有1种物质,即二甲基二硫醚,其相对含量为55.86%;其次为苯环类化合物,包含3种物质,以邻二甲苯的含量相對较高(2.49%);萜类化合物包含4种物质;酯类和醇类化合物均各有1种物质,相对含量分别为2.34%和2.09%;含量较低的烯烃类和烷烃类化合物分别有2种和5种物质,除1-十一烯相对含量为1.93%外,其余6种物质含量均在0.50%以下(表3)。

2. 2. 2 油菜研磨挥发物的化学成分 从油菜研磨挥发物中共鉴定出48种化合物(筛选相似度在80%以上),包括醇类、醚类、酯类、烷烃类、酮类、醛类、烯烃类、苯环类、萜类及其他。剔除相对含量<0.10%的13种化合物,列出余下的33种化合物(表4)。其中,醇类化合物种类最多,相对总含量也最高,达83.86%;醚类包含4种化合物,又可分为氧醚类和硫醚类两个小类,分别包含2种化合物;酯类包含4种化合物,可分为异硫氰酸酯类和羧酸酯类两个小类,分别包含2种化合物;烷烃类有6种化合物,剩余酮类、醛类、烷烃类、烯烃类、苯环类和萜类化合物种类较少且相对含量较低;其他类包含5-己腈、甲代烯丙基氰、2-丁基四氢呋喃和1,1-[乙基茚双氧]二-3[-己烯],以5-己腈的相对含量较高,为5.37%。

2. 2. 3 油菜不同处理方式挥发物比较 油菜切段和研磨得到的挥发物种类和相对含量差异明显,切段挥发物以二甲基二硫醚为主,研磨挥发物以叶醇等醇类为主,研磨处理得到的挥发物种类较切段处理多。两种不同处理方式检测到6种相同的挥发物单体,分别为二甲基二硫醚、乙酸叶醇酯、邻二甲苯、二丙酮醇、(+)-柠檬烯和正十六烷,除二丙酮醇和正十六烷的相对含量接近外,其余4种化合物研磨处理的含量均高于切段处理。油菜挥发物中共检测到2种硫醚化合物,分别为二甲基二硫醚(Dimethyl disulfide,DMDS)和二甲基三硫醚(Dimethyl trisulfide,DMTS);共检测到2种异硫氰酸酯类化合物,分别为3-丁烯基异硫氰酸酯和异硫氰酸烯丙酯(Allyl isothiocyanate,AITC)。与切段处理方式比较,研磨过程中挥发物损失更多;研磨处理的挥发物会快速释放,而切段处理的挥发物释放较慢;研磨后的挥发物因破坏细胞结构和酶的作用,产生物质种类更多,因此两种方式得到的挥发物种类和含量存在明显差异。

2. 3 硫醚类和异硫氰酸酯类化合物抑菌活性测定结果

测定DMDS、DMTS和AITC对三七主要根腐病原菌F-3、D-1和RS006的抑菌活性,结果(图1~图3)显示,3种化合物在本研究所设浓度下均有抑菌活性,且抑制率均随使用浓度的增加而显著升高。DMDS设计抑菌浓度为200~1200 mL/m3,且最高浓度对3种三七根腐病原菌的抑制率均显著高于最低浓度的抑制率,其中1200 mL/m3浓度处理对D-1菌株的抑制率最高,为73.23%;其次为RS006菌株,抑制率为52.19%;最低的为F-3菌株,抑制率为35.24%(图1)。DMTS的抑菌活性较DMDS强,200 mL/m3浓度下即完全抑制病原菌生长,因此设计抑菌浓度降为20~50 mL/m3,在最低浓度下对3种病原菌的抑制率均在20.00%以上;在最高浓度下对F-3、D-1和RS006菌株的抑制率分别为61.55%、100.00%和78.71%(图2)。AITC的抑菌活性强于DMDS和DMTS,在20 mL/m3浓度下即完全抑制3种病原菌生长,因此设计抑菌浓度降低为2~8 mL/m3,在此浓度下对F-3菌株的抑制率为10.41%~53.85%,对RS006菌株的抑制率为29.65%~79.39%,对D-1菌株的抑制率在浓度为2 mL/m3时即达100.00%(图3)。

3 讨论

油菜挥发物对三七根腐病的主要病原菌具有化感抑制作用,且随着用量的增加抑菌活性增强,表明实际生产中利用与油菜轮作或进行生物熏蒸能抑制三七根腐病从而缓解三七连作障碍,合理密植或作熏蒸材料翻埋进土壤中效果可能更佳。目前,利用芸薹属植物作为生物熏蒸材料防治作物土传病虫害已成为美国、澳大利亚、英国等多个国家的研究热点,生物熏蒸技术已在一些国家和地区得到大面积推广应用。实际生产中以二道眉芥菜作为熏蒸材料处理多年连作茄子的土壤后,茄子黄萎病的发病率、病情指数及防控效果分别为30.8%、10.4%和65.8%,且茄子产量较空白对照增产35.4%;60000~75000 kg/ha的鲜油菜熏蒸土壤结合浇水450 m2/ha并覆膜处理,对棉花立枯病和黄萎病的防治效果均在60.0%以上(张丽萍等,2015;李淑敏等,2017)。基于前人的研究,利用油菜防治三七根腐病害具有一定的可行性,但尚未见报道。因此,本研究选用云南常见蔬菜油菜作为试验材料,可为菜药轮作或生物熏蒸减轻药材的土传病害提供思路。

芸薹属植物生物熏蒸效果显著的物质基础为异硫氰酸酯类物质(ITCs),油菜研磨后挥发物中含有两种此类物质,分别为AITC和3-丁烯基异硫氰酸酯(4-isothiocyanato-1-butene)。芸薹属植物叶片组织中AITC浓度达0.10 mg/g时可抑制接骨木镰刀菌的生长,且AITC浓度与真菌的生长呈负相关(Mayton et al.,1996);而黑芥和芥菜叶片组织中AITC含量高于1.2 mg/g可抑制茄病长蠕孢和大丽轮枝菌的生长(Olivier et al.,1999)。同时,AITC对根结线虫及杂草有较强的杀伤力(马承铸等,2009)。拟南芥外源施用AITC,会通过产生活性氧、一氧化氮和提高胞内Ca2+浓度诱导气孔关闭,且该诱导效应是由茉莉酸甲酯启动。AITC诱导气孔关闭一方面降低了水分的散失,另一方面阻止了真菌通过气孔侵染植物(Khokon et al., 2011)。在本研究中,AITC浓度在8 mL/m3时对F-3和RS006菌株的抑制率分别为53.85%和79.39%,在浓度为2 mL/m3时完全抑制D-1菌株的生长,表明AITC的抑菌活性极强,对D-1菌株的抑菌浓度范围尚需进一步探究。

油菜切段挥发物的主要成分为DMDS,其相对含量为55.86%。硫醚类化合物是一种新型的土壤熏蒸剂,而DMDS是最常用的硫醚类土壤熏蒸剂之一。DMDS作为西红柿温室的土壤熏蒸剂使用,在较低用量(56.4 g/m2)下即能大幅降低尖孢镰刀菌和腐皮镰刀菌的数量,且可以维持整个生育期(Papazlatani et al.,2016);DMDS与棉隆混合使用(30 g/m2+25 g/m2)作为溴甲烷的替代品在种植黄瓜的土壤中施用,可有效抑制根结线虫,并能大幅减少镰刀菌和疫霉的菌落形成,黄瓜产量亦维持在较高水平(Mao et al., 2014)。此外,DMDS熏蒸不會影响有益微生物的活性(Dangi et al.,2014)。在本研究中,DMDS对3种根腐病菌均有抑菌活性,且随着用量的增加抑菌活性增强。但3种病原菌的敏感性不同,因此,实际应用中应根据具体情况确定DMDS的用量。DMDS的抑菌活性弱于DMTS和AITC,但在切段挥发物中含量较高,为55.86%;AITC的抑菌活性最强,但在研磨挥发物中含量较低,仅为0.34%。因此,油菜作为熏蒸材料处理三七连作土壤时,尚需考察植物组织不同粉碎程度的熏蒸效果,寻找最适处理方式。

本研究将切碎(1 mm3左右)的油菜组织加入培养基中作挥发物抑菌试验,理论上既有植物组织自然挥发的物质又有组织破碎后水解产生的物质,因此,油菜挥发物抑制3种病原菌生长的物质应该主要为DMDS、DMTS和AITC等化合物,除此之外,含量较高的叶醇等多用于食品和化妆品的调味方面,但未见抑菌报道(黄明泉等,2005),可能不是抑菌关键物质。油菜因品种、采收时间、处理方式等差异,挥发物成分和种类差异明显。已有的文献中对油菜挥发物成分及种类研究较少,多集中于油菜中硫苷(李锋等,2006;张丽萍等,2017)或油菜籽(唐莹莹等,2014)挥发油含量测定。本研究尚存在不足,如利用挥发物收集装置收集挥发物时间仅24 h,收集到的挥发物十分有限,制作标准曲线后依据油菜鲜重计算,DMDS在切段挥发物中的收集率为0.2217‰,在研磨挥发物中的收集率为0.0025‰,DMTS在研磨挥发物中的收集率为0.0109‰,AITC在研磨挥发物中的收集率为0.0860‰。此外,后续仍需考虑不同硫苷含量的油菜对病原菌影响的差异,同时增加油菜对三七连作土壤微生物群体的影响并开展田间试验加以验证。因抑菌试验中未设置阳性对照,因此,油菜挥发物的抑菌活性是否优于辣根素、大蒜素等常用于控制三七根腐病的熏蒸药剂,尚有待进一步研究。

4 结论

油菜茎和叶组织的挥发物对三七根腐病菌具有抑菌活性,通过GC-MS鉴定出的硫醚类和异硫氰酸酯类化合物抑菌效果较好,将油菜作为三七轮作植物或三七连作土壤生物熏蒸材料用以防治三七根腐病进而减轻或缓解三七连作障碍具有很大的开发潜力。

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(責任编辑 麻小燕)

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