吉林地区流式细胞术检测白细胞抗原B27阳性率分析

张 敏 许友强 周婷婷 苗永迪 王 晶 孙 伟 李雨艳（吉林金域医学检验所有限公司，吉林长春 130000）

人类白细胞抗原B27（HLA-B27）是第6号染色体HLA基因B座一个等位基因的表达产物，因与强直性脊柱炎（ankylosing spondylitis，AS）的高度相关性逐渐得到认识[1-2]。患者在早期有乏力、消瘦、长期或间断的低热、厌食、轻度贫血等症状。但是症状都比较轻，所以大多数患者都很难在早期发现病情，导致耽误了治疗，失去了最佳的治疗时机[3]。研究发现，AS患者中HLA-B27抗原表达量明显高于对照人群，并推断HLA-B27与AS存在极大的关联[4]。本研究对吉林省内2 474例患者进行分析，了解HLA-B27抗原阳性率在不同性别疑似病例中存在的差异，探讨其在AS中的早期诊断价值。

1 资料与方法

1.1 一般资料

选取2016年5月至2017年6月在吉林金域医学检验所有限公司检测的HLA-B27患者作为研究对象。其中男性1 467例，女性998例。

1.2 仪器与试剂

抗HLA-B27 FITC/CD3 PE荧光抗体（美国BD公司）、FC500 MCL 流式细胞仪（美国 贝克曼库尔特公司）、校准微球和溶血素（美国BD公司）、BD鞘液（美国BD公司）、小牛血清（Gibico）、多聚甲醛（国药）。

1.3 方法

（1）取合格外周血样本100μL，加入抗体至管底，振荡混匀，避光室温孵育15～20 min，加入2 mL溶血素-FACS Lysing solution（1×）溶解红细胞。

（2）振荡混匀，避光室温孵育6～12 min至完全溶血。1 700 rpm/min，用1%小牛血清洗液2 mL洗涤，加入600 μL 1%多聚甲醛固定液，上机检测。

2 结果

2.1 不同性别HLA-B27阳性表达分布情况

2 474例患者中阳性患者536例，阴性患者1 938例，阳性率21.66%。其中男性患者1 476例，阳性患者383例，阳性率25.95%，女性患者998例，阳性患者153例，阳性率15.33%，见表 1。

表1 不同性别HLA-B27阳性表达分布情况[例（%）]

图1 男性、女性患者HLA-B27抗原阳性率

2.2 不同年龄HLA-B27阳性表达分布情况

2 474例患者中10岁以内儿童，阳性患者45例，阳性率6.76%。11 ～ 20岁患者阳性患者26例，阳性率20.97%，21 ～ 30 岁阳性患者158例，阳性率37.44%，31 ～ 40岁阳性患者 131例，阳性率 30.75%，41 ～ 50岁阳性患者95例，阳性率26.61%，51 ～ 60岁阳性患者46例，阳性率16.54%，大于60岁阳性患者35例，阳性率21.67%。

2.3 男性患者不同年龄HLA-B27阳性表达分布情况

男性患者1476例其中10岁以内儿童阳性患者为35例，阳性率8.01%，11 ～ 20岁阳性患者 19例，阳性率23.17%，21 ～ 30岁阳性患者125例，阳性率42.96%，31 ～ 40岁阳性患者 99例，阳性率 39.44%，41 ～ 50岁阳性患者56 例，阳性率31.28%，51 ～ 60岁阳性患者34例，阳性率25.37%，大于60岁阳性患者21例，阳性率20.59%。

2.4 女性患者不同年龄HLA-B27阳性表达分布情况

女性患者998例其中10岁以内儿童阳性患者10例，阳性率4.36%，11 ～ 20岁阳性患者7例，阳性率16.67%，21 ～ 30 岁阳性患者 33例，阳性率 25.19%，31 ～ 40岁阳性患者32例，阳性率18.29%，41 ～ 50岁阳性患者39例，阳性率21.91%，51 ～ 60岁阳性患者12例，阳性率8.33%，大于60岁阳性患者14例，阳性率14.14%，见图1。

3 讨论与结论

本次研究显示吉林省2474例患者，阳性率为21.66%。结果表明，男性患者阳性率为25.95%，明显高于女性患者阳性为15.33%，这与邹玲莉研究结果相似；不同年龄组结果表明21 ～ 30岁结果的阳性率37.44%，明显优于其他组别；不同性别不同年龄的分组结果表明男性女性患者21 ～ 30岁患者结果阳性率最高分别为42.96%，25.19 %，21 ～ 30岁男性患者阳性率是女性患者的1.7倍。

流式细胞术与传统检测方法相比，方法操作简单，标本用量少，稳定性、特异性和重复性较好且检测速度较快，是目前对HLA-B27最理想的检测方法[5-6]。通过对吉林地区不同性别、年龄的HLA-B27的流行病学调查有助于揭示其在AS疾病发病机制中的作用[7-8]。