D7-CRP型全自动血细胞分析仪临床性能评价

陈 娟 吴志成* 杨恒歌 赖小婷

在临床中C反应蛋白(C-reactive protein，CRP)与白细胞联合检测应用广泛，但同时检测血常规及全血CRP的一体机目前较为少见[1]。D7-CRP型全自动血细胞分析仪能够进行全血细胞计数、白细胞5分类和CRP测定。该仪器采用库尔特原理检测红细胞(red blood cell，RBC)、血小板(platelet，PLT)的数目和体积分布，采用半导体激光流式技术测量白细胞总数(white blood cell，WBC)并对其进行分类。采用免疫散射比浊法进行CRP检测，并根据样本中血细胞压积结果对CRP结果进行修正。该仪器有多种进样方式，既可以自动也可以手动，既可以采用静脉血也可以用末梢血进行测量，血量少时还可以用微量稀释再测定，适合于那些很难采到血液样本的患者，且操作维护简单。根据“全国临床检验操作规程”和实验室对血细胞分析仪的基本要求，本研究对D7-CRP型全自动血细胞分析仪主要性能进行评价，并与日本XN-9000型全自动血细胞分析仪进行比对实验，检验其是否符合国家卫生行业标准(WS/T406-2012)以及实验室高效检验的要求。

1 材料与方法

1.1 实验样本

选取北京大学深圳医院门诊检验科2017年10月至2018年1月就诊的47例门诊患者的47份血样标本，采集其含乙二胺四乙酸抗凝血1.5～2.0 ml备用，所有样本均在4 h内检测完毕。

1.2 仪器与试剂

(1)D7-CRP全自动血细胞分析仪(深圳帝迈公司)及其原装配套试剂：①LYA-1。批号为20170619，效期为20190618；②LYA-2。批号为20170624，效期为20190623；③LYA-3。批号为20170615，效期为20190614；④DIL-A。批号为20171017，效期为20191016；⑤CRP-R1。批号为20180801，效期为20190731；⑥CRP-R2。批号为20180801，效期为20190731。

(2)XN-9000全自动血细胞分析仪(日本Sysmex公司)及原装配套试剂、质控品及校准品。

(3)血球及CRP质控品：①血球。批号为E5125-02，效期为2018-1-10；②CRP。批号为463LPC，效期为2018-6-28，Randox提供。

(4)校准品。批号为PLUS1117，效期为2017-12-5。

(5)线性评价物。批号为CL123，效期为2017-11-25，美国R&D Systems提供，均在有效期内使用。

1.3 检测方法

根据国家卫生行业标准(WS/T406-2012)“临床血液学检验常规项目分析质量要求”进行操作，对D7-CRP型全自动血细胞分析仪的WBC、RBC、血红蛋白(hemoglobin，HGB)、红细胞平均体积(mean corpuscular volume，MCV)、PLT的本底计数、携带污染率、批内/日间精密度、线性、正确度、不同吸样模式的结果可比性、实验室内的结果可比性和准确度以及CRP的本底计数、携带污染率、精密度等方面进行评价。所有操作均严格按照“全国临床检验操作规程”[2]的要求，判断标准参考国家卫生行业标准(WS/T406-2012)[3]。

1.4 检测与评价指标

(1)空白计数。用稀释液作为样本在分析仪上连续检测3次，3次检测结果的最大值应在允许范围内。

(2)携带污染率[4]。分别针对不同检测项目，取一份高浓度的临床样本(EDTA-K2或EDTA-K3抗凝静脉血)，混合均匀后连续测定3次，测定值分别为H1、H2及H3；再取一份低浓度的临床样本，混合均匀后连续测定3次，测定值分别为L1、L2及L3。其携带污染率计算为公式1：

(3)高值样本要求。①WBC＞90.0×109/L；②RBC＞6.20×1012/L；③HGB＞220 g/L；④PLT＞900×109/L。

(4)低值样本要求。0＜WBC＜3.0×109/L，0＜RBC＜1.50×1012/L，0＜HGB＜50 g/L，0＜PLT＜30×109/L。

(5)精密度。①批内精密度：取1份浓度水平在[WBC：(4.0～10.0)×109/L、RBC：(3.5～5.5)×1012/L、HGB：(110～160)g/L、HCT：(35～55)%、MCV：(80～100)fl、MCH：(27～34)pg、MCHC：(320～360)g/L、PLT：(100～300)×109/L]的临床样本，按常规方法重复检测11次，计算后10次检测结果和算术平均值和标准差，计算变异系数；②日间精密度：取同批号高、中、低3个水平的质控品，连续检测20 d，每份标本在检测当日至少进行1次室内质控，剔除失控数据(失控结果已得到纠正)逐项计算20 d内检测结果的变异系数。

(6)线性。分别使用浓缩及稀释的方法获得接近检测上限(厂商制定)的高值样本，及略高于检出限的低值样本，根据临床常见值确定线性验证的浓度系列，配制不同浓度的样本，每份样本重复检测3次，计算平均值，将实测值(Y)与理论值(X)作比较，计算Y=aX+b，验证线性范围应符合美国实验室标准化委员会(The Clinical and Laboratory Standards Institute，CLSI)的EP6文件要求[5]：a值在1.00±0.05范围内，相关系数≥0.975。

(7)正确度。选择10份检测结果在参考区间内的健康体检者的新鲜血样本，每份样本检测2次，以实验室内部规范操作检测系统(XN-9000仪器检测系统)为评价标准，分别计算D7-CRP型全自动血细胞分析仪和XN-9000型全自动血细胞分析仪2种仪器所有检测结果的均值，以XN-9000型全自动血细胞分析仪的检测均值为标准，计算偏倚。

(8)不同吸样模式的结果可比性[6]。每次校准后，取5份临床样本分别使用不同模式进行检测，每份样本各检测2次，以开放模式为标准，分别计算不同模式下检测结果均值间的相对差异[7]。

(9)实验室内的结果可比性。选取20份临床新鲜全血样本，分别在D7-CRP型和XN-9000型全自动血细胞分析仪进行检测。XN-9000型全自动血细胞分析仪已校准，并参加国家临床检验中心室间质量控制，所有室间质量控制结果均在控，评价方案和标准参照原卫生部2012版“临床血液学检验常规项目分析质量要求”和CLSI批准的EP9-A2文件[8]计算D7-CRP型与XN-9000型全自动血细胞分析仪之间的相对偏差。要求20份标本中16份满足此标准为比对合格[9]。具体要求：①WBC偏差≤±7.5%(当WBC＜2×109/L时，其偏差≤±10.0%)；②RBC偏差≤±3.0%；③HGB偏差≤±3.5%；④HCT偏差≤±3.5%；⑤MCV偏差≤±3.5%；⑥PLT偏差≤±12.5%(当PLT＜40×109/L时，其偏差≤±10.5%)。

(10)准确度。取5份定值临床样本分别进行单次检测，定值临床样本由XN-9000型全自动血细胞分析仪上检测所得。XN-9000型全自动血细胞分析仪已校准，并参加国家临床检验中心室间质量控制，所有室间质量控制结果均在控。计算每份样本检测结果与靶值的相对偏差，每个检测项目的相对偏差符合下述要求的比例应≥80%，相对偏差=(检测结果-靶值)÷靶值×100%。

1.5 统计学方法

检测所得数据均使用Microsoft Excel软件进行统计学分析，线性范围评价试验的相关性采用线性回归分析。

2 结果

2.1 本底计数检测

对D7-CRP型全自动血细胞分析仪使用稀释液作为样本连续检测3次，WBC、RBC、HGB及PLT本底结果满足国家卫生行业标准(WS/T406-2012)的要求；CRP的本底结果均为0.0 mg/L，满足企业要求，见表1。

2.2 携带污染率检测

按检测方法要求，对D7-CRP型全自动血细胞分析仪分别使用满足要求的样本测试，WBC、RBC及PLT计数及HGB的携带污染率分别为0.03%、0.26%、0.11%和0.0%，满足国家卫生行业标准(WS/T406-2012)的要求；CRP携带污染率满足企业要求，见表2。

表1 本底计数评价试验结果

2.3 精密度检测

2.3.1 批内精密度

按检测方法要求，对D7-CRP型全自动血细胞分析仪使用符合要求的样本测试，其结果见表3。其中，WBC、RBC、HGB、HCT、MCV、MCH、MCHC及PLT的批内精密度分别为1.65%、0.54%、0.51%、0.53%、0.17%、0.37%、0.42%以及1.96%，符合国家卫生行业标准(WS/T 406-2012)的要求；CRP批内精密度满足企业要求。

表2 携带污染率评价试验结果

表3 批内精密度正常水平评价试验结果

2.3.2 日间精密度

按前述检测方法试验，对D7-CRP型全自动血细胞分析仪使用质控物连续20 d后，统计WBC、RBC、PLT、HGB、HCT、MCV、MCH、MCHC及PLT的低、中、高水平质控物的日间精密度，均符合国家卫生行业标准(WS/T406-2012)的要求；CRP日间精密度满足企业要求，见表4。

2.4 线性检测

按照线性检测方法，D7-CRP型全自动血细胞分析仪WBC的线性范围为0.00～356.46×109/L、RBC的线性范围为0.00～9.02×1012/L、HGB的线性范围为0～263 g/L、HCT的线性范围为0.0～91.3%、PLT的线性范围为0～6166×109/L，均能满足厂商的要求，相关系数r均≥0.975，符合国家卫生行业标准(WS/T406-2012)的要求，见表5。

2.5 正确度检测

按正确度检测方法测试，对D7-CRP型全自动血细胞分析仪验证检测系统的正确度，WBC、RBC、HGB、HCT、MCV、MCH、MCHC及PLT的偏倚分别为-0.66%、-1.61%、0.00%、-1.75%、-0.18%、1.66%、1.80%、0.08%，均符合国家卫生行业标准(WS/T406-2012)的要求，见表6。

表4 日间精密度评价试验结果

表5 线性评价试验结果

表6 正确度评价试验结果

表7 不同吸样模式结果可比性评价试验结果

表8 实验室内结果可比性试验评价结果

2.6 不同吸样模式结果可比性

按不同吸样模式检测方法试验，对D7-CRP型全自动血细胞分析仪以开放模式为标准，与自动进样模式结果比对，WBC、RBC、HGB、HCT、MCV以及PLT的偏差均符合国家卫生行业标准(WS/T406-2012)的要求，见表7。

2.7 实验室内结果可比性

按实验室内检测方法试验，D7-CRP型全自动血细胞分析仪的WBC、RBC、PLT计数，HGB、HCT、MCV、MCH及MCHC的实验室内的结果可比性均符合国家卫生行业标准(WS/T 406-2012)的要求，见表8。

2.8 准确度检测

按照准确度检测方法试验，D7-CRP型全自动血细胞分析仪的WBC、RBC、PLT计数，HGB、HCT、MCV、MCH及MCHC的准确度均符合国家卫生行业标准(WS/T406-2012)的要求，见表9。

3 讨论

由于科学技术的进步，临床检验设备越来越先进，随着技术的不断引进与吸收消化，国产大型医疗仪器设备的设计与制造日渐走向成熟，相信在不久的将来国产大型医疗设备一定会在世界上占有一席之地[10]。

表9 准确度试验评价结果

本研究通过对D7-CRP型全自动血细胞分析仪主要性能评价发现，该仪器全血细胞计数与CRP检测各参数空白试验良好，极低的携带污染率完全符合设计需求，精密度均小于规定的质量评价标准允许误差。精密度试验表明仪器有较高重复性，能满足临床应用的要求，通过与参加全省实验室室间质评的国外同类仪器比较均在行业标准范围内，表明D7-CRP型全自动血细胞分析仪具有良好的准确性和可靠性[11]。

D7-CRP型全自动血细胞分析仪的主要性能达到国家卫生行业标准(WS/T406-2012)规定的要求，能满足血细胞检测的一般需要。仪器总体设计合理、操作简单，具有高度自动化和智能化，有较强的质量控制功能，并有故障自检功能，故障时可提示故障类型和相应自动处理措施，有较完善的保养功能，进样针和管道系统可自动冲洗，对检验结果的质量保障起了重要的作用[12-13]。

D7-CRP型全自动血细胞分析仪带有20 μl微量血液预稀释模式功能，可以满足幼儿及其他特殊人群血常规检查需求，是一款性能优良的国产全自动血细胞分析仪，可满足临床实验室的需要。