茶叶中茶多酚的检测方法研究

朱 虹

（河北化工医药职业技术学院，河北石家庄 050026）

1 引言

茶多酚(Tea Polyphenols)又叫茶鞣质、茶单宁，是茶叶中酚类物质的总称。是决定茶汤滋味、颜色的主体成分，也是决定茶叶品质的关键物质[1]。茶多酚主要包括儿茶素类、黄酮苷类、酮类以及青花素等。研究结果表明，茶多酚具有抗氧化[2]、抗肿瘤[3]、抗动脉粥样硬化[4]、抗炎抑菌[5]、抗辐射[6]、降血脂等作用。茶多酚除了广泛应用于药品中，还可作为保鲜剂应用于食品工业中，由于具有抗衰老、防辐射的特点，被添加在护肤霜、防晒霜等化妆品中。

由于茶多酚广泛的应用前景，目前对茶叶中茶多酚的研究受到国内外的关注，因此准确、高效、简便的检测方法对于茶多酚的研究具有重要意义。

2 检测方法

2.1 滴定法

滴定法的测定原理是：茶多酚本身具有还原性，能被具有氧化性的高锰酸钾溶液所氧化，以靛红为指示剂，通过滴定终点的颜色变化，对茶多酚总量进行测定。此方法的缺点是：第一，由于茶叶中含有的其他物质也易被氧化，造成结果准确度不高。第二，终点不易判断。不同的检验人员滴定时会对终点的读取有差异，造成结果误差偏大。虽然此法对茶多酚含量的测定有一定的误差，但是由于实验仪器经济、方法简便易行，目前仍有一些茶饮行业在应用。

2.2 分光光度法

分光光度法的测定原理是：在适当浓度的稀溶液中，被测物质的吸光度与浓度之间具有一定的线性关系，通过在特定的波长处测定被测物质的吸光度，或者在一定波长范围内测定被测物质的吸收光谱，来对被测物质进行定量和定性的分析方法。包括可见分光光度法、紫外分光光度法、原子吸收分光光度法等。

2.2.1 可见分光光度法

可见分光光度法是传统的茶多酚总量的测定方法，主要有酒石酸亚铁比色法和福林酚比色法。酒石酸亚铁比色法的测定原理是在一定pH条件下，茶多酚与酒石酸亚铁络合反应生成紫色络合物，在540nm处测定吸光度。此方法简便、快速、重现性好。但是也有缺点：测定结果易受pH值的影响；不同的多酚物质对酒石酸亚铁的显色有差异，不同厂家、不同品质、不同工艺、不同原料生产的多酚组成往往不一样,故用此法很难找到一种比较理想的对照品[7]。福林酚比色法是目前的国标法，其测定原理是钨钼酸与多酚类物质进行氧化还原反应生成蓝色化合物，在765nm处测定吸光度。此方法简便、快速、重现性好、试剂用量少，并且有研究表示此方法与酒石酸亚铁比色法相比，测定结果更接近真实值[8]。

2.2.2 紫外分光光度法

紫外分光光度法的原理是基于茶多酚具有不饱和结构，分别在320～380 nm(吸收带I)和200～270 nm(吸收带Ⅱ)有深度吸收峰。根据大多数酚类最大吸收峰波长的确定，一般选择在205 nm和375 nm波长处进行测定。

2.2.3 原子吸收分光光度法

原子吸收分光光度法测定茶多酚一般用间接测定法，即利用茶多酚与金属离子络合生成沉淀，通过测定沉淀中的金属离子或上清液中剩余的金属离子，来间接测定茶多酚的含量。有文献报道，利用醋酸铜与多酚物质进行反应测定茶多酚的含量，实验结果发现茶叶中的氨基酸成分对实验有干扰，造成实验结果误差很大。廖晓玲等[9]调节实验条件，使多酚与碱式乙酸铅络合反应生成难溶的沉淀，通过测定上清液中的铅离子的含量，间接测定茶叶中的多酚含量，研究结果表明该法具有简便快速、实际用量少等优点，可用于微量茶多酚含量的测定。

2.3 色谱法

色谱法具有较高的灵敏度和较强的专属性，因此可用于茶多酚组分的定性和定量测定。

2.3.1 高效液相色谱法

高效液相色谱法具有准确度高和分离度好的特点，是目前检测茶叶中多酚类物质应用最广泛的方法。目前国标中对茶叶中儿茶素类的检测就是高效液相色谱法。

目前大多数的文献的样品前处理方法是采用溶剂提取法，一般选用沸水浸提，还有模拟饮茶习惯按一定茶水比浸泡一定时间。仪器条件使用较多的检测器是紫外检测器和二极管阵列检测器。色谱柱多采用反相色谱柱C18。流动相一般采用含酸(如甲酸、乙酸、磷酸)的甲醇或乙腈的水溶液，研究表明酸的存在有助于改善某些化合物的峰型。

2.3.2 气相色谱法

气相色谱法对于测定茶多酚中的易挥发性成分有很好的效果，但是对于大部分多酚物质需要进行衍生化才能进行测定，步骤相对较繁琐，实际应用不如高效液相色谱法广泛。

2.4 其他检测方法

除了以上介绍的一些方法，文献研究中还有其他一些方法，如电化学分析法、红外光谱法、色谱联用技术、毛细管电泳法、核磁共振法、流动注射法和色度分析法等，但由于分析方法或仪器设备的局限性，目前为止实际应用较少。

3 研究展望

随着茶多酚应用范围的不断扩大，检测要求和仪器性能的不断提高，茶多酚的检测方法仍需不断改进与优化，例如，提高茶多酚检测结果的准确度和精密度；研究快速有效的样品前处理方法；研究高通量快速检测茶多酚的方法；发展新型现代化绿色环保检测技术等。