桑地更平丸对更年期高血压大鼠降压作用的药效学研究

孟 瑶， 卢 军， 杨晓迷， 郝 梦， 刘 怡， 姜 林,

(新疆医科大学1中医学院， 乌鲁木齐 830011； 2第四临床医学院药剂科， 乌鲁木齐 830000)

更年期高血压(Climacterichypertension)是指女性更年期出现血压升高的情况，主要由于卵巢功能衰退，内源性雌激素含量降低导致内分泌失调，自主神经功能紊乱引起血压升高[1]。除了血压升高外,临床表现还伴有目眩耳鸣、头晕头痛、疲乏失眠、月经周期不规律等[2]。目前主要的治疗方法为服用降压药物伴雌激素替代疗法，但常伴有子宫内膜出血或乳腺增生等不良反应[3]。桑地更平丸为新疆医科大学第四临床医学院院内制剂，由桑椹、生地黄、罗布麻叶、当归、酸枣仁、玫瑰花等药材组成，具有补虚润燥、平肝安神的功效[4]，临床上多用于更年期高血压的治疗。本研究通过建立更年期高血压大鼠模型，测定大鼠血清中氧化应激指标、一氧化氮(NO)含量以及内皮型一氧化氮合酶(eNOS)浓度，探讨桑地更平丸在改善更年期高血压方面的药理机制，现报道如下。

1 材料与方法

1.1材料

1.1.1 仪器 MULTI-SKAN型酶标仪(美国Thermo Scientific公司)，TDZ5WSF型低速离心机(盐城市凯特实验仪器有限公司)，HC-3518型高速离心机(长沙高新技术产业开发区湘仪离心机仪器有限公司)，WELLWASH型洗板机(北京伯迈科技有限公司)，BL-420S型生物信号采集系统(成都泰盟软件有限公司)。

1.1.2 试剂 大鼠血清丙二醛(MDA)测试盒(武汉伊莱瑞特生物科技股份有限公司，批号2018052)，大鼠血清超氧化物歧化酶(SOD)试剂盒(武汉伊莱瑞特生物科技股份有限公司，批号20180510)，大鼠血清NO测试盒 (南京建成生物工程研究所，批号20180508)，大鼠血清内皮型一氧化氮合酶(eNOS)试剂盒 (武汉伊莱瑞特生物科技股份有限公司，批号XWK68G9E)，大鼠雌激素试剂盒(武汉华美生物工程有限公司，批号CSB-E07279r)。

1.1.3 药物 桑地更平丸由新疆医科大学第四临床医学院药剂科自制，缬沙坦胶囊(北京诺华制药有限公司，批号 X2279)。

1.1.4 动物 雌性SD大鼠40只，体质量(200±20) g，由新疆维吾尔自治区疾病预防控制中心提供[许可证号：SCXK(新)2016-0001]。

1.2方法

1.2.1 药物制备方法 称取桑地更平丸，分别配制成浓度为1.08、0.54 g/mL的水溶液；称取缬沙坦胶囊，配制成浓度为0.001 66 g/mL的水溶液，备用。

1.2.2 模型建立及给药方法

1.2.2.1 大鼠更年期高血压模型的建立 随机抽取32只雌性SD大鼠腹腔注射10%水合氯醛(0.3 mL/100 g体质量)进行麻醉，将大鼠腹部绒毛剃除，用碘液对皮肤进行消毒，沿腹部中线将大鼠腹部剖开，用镊子将腹中组织移开，找出左肾动脉并将其单独分离，将尖端磨平的4.5号针头平行放置左肾动脉旁，用4号手术缝合线扎紧后抽出针头，造成大鼠单侧肾动脉狭窄。找到位于大鼠腰椎两侧肾后方的卵巢，用4号手术缝合线将卵巢下输卵管结扎，切除卵巢，同法切除另一侧卵巢，将组织放回大鼠腹中，逐层进行缝合，最后腹腔注射青霉素钠40万单位。大鼠术后正常饮食进水，连续3 d腹腔注射青霉素钠40万单位，观察动物状态，防止伤口感染[5-6]。

1.2.2.2 大鼠的分组及给药方法 将建模成功的32只大鼠随机分为阳性组(缬沙坦胶囊，0.008 3 g/kg体质量)、模型组(蒸馏水，10.0 mL/kg体质量)、桑地更平丸高、低剂量组(10.8、5.4 g/kg体质量)，剩余8只大鼠为空白组(蒸馏水，10.0 mL/kg体质量)，连续灌胃8 w。

1.2.3 指标测定

1.2.3.1 血压测定 称取大鼠体质量，用10%水合氯醛(0.3 mL/100 g体质量)对大鼠进行腹腔注射麻醉，仰卧固定在鼠板上，剔除颈部绒毛，将颈部纵向剖开，分离大鼠颈动脉，分离长度为1.0～1.5 cm，将靠近头部一端的动脉结扎，行颈总动脉插管术，用BL-420s生物信号采集系统测定各组大鼠血压值。

1.2.3.2 血清中雌激素、eNOS、NO、SOD、MDA的测定 大鼠腹主动脉取血，4 000 r/min离心10 min,分离血清，置于-80℃冰箱中保存备用，按试剂盒说明书操作测定各组大鼠血清中雌激素、eNOS、NO、SOD和MDA的浓度。

2 结果

2.1各组大鼠血压值的变化情况与空白组比较，模型组大鼠收缩压和舒张压均明显升高，差异有统计学意义(P<0.01)；与模型组比较，桑地更平丸高、低剂量组和阳性组大鼠收缩压与舒张压均降低，差异有统计学意义(P<0.05～0.01)，见表1。

表1 各组大鼠血压值的变化情况

注：与空白组比较，△△P<0.01； 与模型组比较，*P<0.05，**P<0.01。

2.2各组大鼠血清雌激素含量的变化情况与空白组比较，模型组大鼠血清雌激素含量降低，差异有统计学意义(P<0.05)；与模型组比较，桑地更平丸高、低剂量组大鼠血清雌激素含量均升高，差异有统计学意义(P<0.05)，见表2。

表2 各组大鼠血清雌激素含量的变化情况

注： 与空白组比较，△P<0.05； 与模型组比较，*P<0.05。

2.3各组大鼠血清eNOS浓度和NO含量的变化情况与空白组比较，模型组大鼠血清eNOS浓度下降，差异有统计学意义(P<0.01)；NO含量下降，差异无统计学意义(P>0.05)。与模型组比较，阳性组、桑地更平丸高剂量组大鼠血清eNOS浓度和NO含量均升高，差异有统计学意义(P<0.05～0.01)；桑地更平丸低剂量组大鼠血清NO含量升高，差异有统计学意义(P<0.01)，eNOS浓度升高，差异无统计学意义(P>0.05)，见表3。

表3 各组大鼠血清eNOS浓度和NO含量的

注：与空白组比较，△△P<0.01； 与模型组比较，*P<0.05，**P<0.01。

2.4各组大鼠血清SOD和MDA浓度的变化情况与空白组比较，模型组大鼠血清SOD、MDA浓度均升高，差异有统计学意义(P<0.01)；与模型组比较，阳性组、桑地更平丸高、低剂量组大鼠血清SOD、MDA浓度有所降低，差异无统计学意义(P>0.05)，见表4。

表4 各组大鼠血清SOD和MDA浓度的

注：与空白组比较，△△P<0.01 。

3 讨论

更年期高血压主要指女性患者同时伴有更年期综合征和高血压症状，其主要临床表现为自主神经功能紊乱症候群与促性腺激素分泌增多等[7]。雌激素(Estrongen)主要由雄激素经过芳香化酶催化并由卵巢产生，是人体内常见的甾体类固醇激素。女性绝经后雌激素的缺乏使得雌激素对心血管保护作用减弱，这被认为是绝经期女性患高血压风险升高的主要原因[8-9]。且雌激素具有抗氧化作用，而雌激素的缺乏，可导致氧化活性氧簇(ROS)增多，从而引起血管收缩，造成高血压发病[10]；雌激素还可与雌激素受体结合通过转录调控激活 eNOS 基因的表达，使 eNOS 活性或蛋白表达增加，进而促进 NO 释放，有快速舒张血管的作用[11-12]。

本实验通过观察桑地更平丸的降压疗效，进而探讨桑地更平丸改善更年期高血压的药理机制。结果显示,经桑地更平丸治疗后，更年期高血压大鼠的血压有明显降低，雌激素分泌较治疗前增多，eNOS与NO的浓度也有不同程度的升高，但对SOD和MDA的影响不大。由实验结果表明，桑地更平丸对更年期高血压有一定的降压作用，还可能对去势高血压大鼠体内雌激素含量失衡的状况有所改善，同时伴有eNOS、NO不同程度的增高，提示桑地更平丸药效的发挥可能通过雌激素改善eNOS/NO信号，快速激活eNOS的表达，从而诱导内皮细胞释放NO，舒张血管保护内皮。在氧化应激方面，桑地更平丸对其影响不明显,表明本方对更年期高血压大鼠氧化应激损伤并未起到一定的改善作用。

综上所述，桑地更平丸具有一定降低更年期高血压的作用，其降压机制可能与增加雌激素分泌，并使NO的生成增多有关。动物实验的结果为桑地更平丸的新药开发提供了一定的研究基础。