典型养殖水产品中有机磷农药残留分析及食用风险评价

孙秀梅，郜 文，叶茂盛，郝 青，金衍健，胡红美，郭远明，应忠真

(1.浙江省海洋水产研究所 浙江省海洋渔业资源可持续利用技术研究重点实验室，浙江 舟山 316021；2.浙江海洋大学海洋与渔业研究所，浙江 舟山 3160211)

养殖水产品中常见的残留农药为杀虫剂、杀螨剂、杀菌剂以及除草剂类[1]。有机氯农药和有机磷农药是常用的两类杀虫剂。我国早在80年代开始禁止有机氯农药，现在环境基质中其含量已经较低，有机氯农药污染主要来源是早期残留[2]。有机磷农药是我国农药市场所占份额最大且使用比较广泛的一类农药。通常有机磷农药被认为是易降解、不易残留和富集的一类农药，曾一度被认为是有机氯农药的替代农药。而事实上，有机磷农药可以在生物体内与胆碱酯酶形成磷酰化胆碱酯酶，从而对生物体产生毒性[3]。2015年世界卫生组织国际癌症研究机构公布对有机磷农药致癌性的审查评估中，草甘膦被重新评级为“对人类可能的致癌物”。关于浙江省水产品中多氯联苯、滴滴涕、六六六等有机氯有机物已有研究报道,而对有机磷类农药在浙江省养殖水产品中的残留和风险评价评价尚未有报道。

有机磷农药残留分析和评价的前提是对其准确的定性定量分析。样品的净化除杂是有机磷农药残留检测分析的关键步骤。在农药多残留分析除杂过程中基质分散固相萃取方法虽应用较广泛，但其除杂能力有限，比较适合植物性样品，对有机质丰富的养殖环境样品及水产品效果有限[4]。水产品中有机磷农药的检测方法主要为气相色谱质谱法、液相色谱串联质谱法[5-11]。本文开发一种了水产品中28种有机磷农药多残留的准确、便捷测定方法，利用建立的方法来监测水产品中有机磷、菊酯类农药残留水平并根据居民膳食消费习惯，结合现行的国家标准和联合国粮农组织(FAO)/世界卫生组织(WHO)相关规定，对浙江省居民水产品消费中有机磷农药暴露风险进行评价。

1 材料与方法

1.1 材料与试剂

在温州区域分别采集了牡蛎、泥蚶、青蛤、缢蛏、乌鳢、贻贝、南美白对虾、黑鲷、鲈鱼、大黄鱼、瓯江彩鲤等水产品。正己烷、乙酸乙酯、丙酮、N-丙基二乙胺(PSA)、硅胶固相萃取小柱(500 mg，3 mL)。

28种有机磷标准储备液，有机磷各组分为甲胺磷、敌敌畏、乙酰甲胺磷、氧化乐果、灭线磷、硫线磷、甲拌磷、乐果、特丁硫磷、地虫硫磷、磷胺、二嗪磷、甲基对硫磷、皮影磷、杀螟硫磷、马拉硫磷、倍硫磷、毒死蜱、对硫磷、水胺硫磷、喹硫磷、杀扑磷、苯线磷、丙溴磷、三唑磷、亚胺硫磷、伏杀磷、蝇毒磷。

1.2 仪器与设备

安捷伦三重四极杆气相色谱质谱仪，涡旋振荡器，旋转蒸发仪，高速离心机，超声波仪，氮吹仪。

1.3 实验方法

1.3.1 样品的前处理

称取5 g水产品经正己烷：乙酸乙酯(1∶1)超声涡旋振荡提取，浓缩后经PSA-硅胶固相萃取小柱净化，正己烷：丙酮：乙酸乙酯(8∶1∶1)洗脱，氮吹定容至1.001 mL，待气相色谱串联质谱分析。具体前处理步骤如叶茂盛等报道[12]。

1.3.2 样品的分析测定

前处理好的样品进行气相色谱串联质谱分析，升温程序及质谱条件如叶茂盛等报道[12]，多反应监测模式。经过MS1扫描确定分子离子峰，产物离子扫描确定产物离子和碰撞能量，最终获得MRM扫描的监测离子。

2 结果与分析

2.1 水产品中有机磷农药残留分析

在温州区域分别采集了牡蛎、泥蚶、青蛤、缢蛏、乌鳢、贻贝、南美白对虾、黑鲷、鲈鱼、大黄鱼、瓯江彩鲤等水产品，采用本研究中建立的有机磷农药多残留气相色谱三重四级杆串联质谱质谱技术对样品中的28种有机磷残留进行分析。结果显示在样品中有不同程度的有机磷农药残留，在所检测的水产品中三唑磷的检出率达30%，在所检测的贝类样品中三唑磷的检出率达50%，地虫硫磷、毒死蜱也有检出。水产品贝类中三唑磷检出率最高，贝类中三唑磷浓度水平在0.222～17.644 μg/kg。乌鳢、鲫鱼、南美白对虾、黒鲷、鲈鱼、大黄鱼中三唑磷未检出。

2.2 居民水产品消费三唑磷农药暴露风险评价

通过水产品中有机磷残留现状研究发现贝类样品中三唑磷的残留较为普遍。三唑磷，是一种中等毒性的广谱性杀虫剂，在渔业中被用于清塘和毒杀杂鱼，广泛应用于渔业和农业。我国在谷物、蔬菜、水果等食品中制定了三唑磷最大残留限量(MRL)(GB 2763-2016)：三唑磷在在稻谷、麦类、旱粮类等中MRL为0.05 mg/kg ；三唑磷在棉籽等中MRL为0.1 mg/kg；在蔬菜中MRL为0.1 mg/kg；三唑磷在水果中MRL为0.2 mg/kg。没有规定水产品中三唑磷最大残留限量(MRL)值。

由水产品消费量和水产品中有关化学品浓度的数据进行水产品中农药污染物的膳食摄入量估算，对估算暴露水平与可接受水平进行比较。使用公式(l)计算居民每周水产品消费暴露的三唑磷估计量(Estimated weely intakes,EWI)，其中C为水产品中三唑磷残留浓度，M为水产品每天的消费量，BW为体重量。

EWI=C×M×7/BW 公式 (1)

在2008年浙江省城乡居民膳食结构调查报告中，浙江农村人口鱼虾类水产品人均消费量为93.43 g/d，城市人口人均消费量为121.54 g/d。浙江沿海居民较内陆人口摄入水产品多，加乘系数1.3，本研究以农村和城市居民人均水产品消费量分别为121.5 g/d和158 g/d计算，居民体重以60 kg计。以调查样品中的三唑磷最大残留计算高摄入水平。由公式(1)计算可得，城市和农村居民每周经水产品摄入三唑磷的最高值分别为0.25 μg/kg·bw和0.33 μg/kg·bw。

GB2763-2016《 食品安全国家标准 食品中最大农药残留限量》中三唑磷每日允许摄入量ADI 0.001 mg/kg·bw。按体重60 kg计算，则每日摄入该化学物质在0.05 mg以内是安全的。贝类中三唑磷浓度水平在0.222～17.644 μg/kg.，根据公式EWI=C×M/BW 计算可得，每日贝类食用量在225.23～2.833 kg/60kg·bw为安全范围内。

根据现状来看，普通百姓正常情况下各种海产品消费量都不及上述评估出的处于风险临界值的水产品消费量，因此可以得出食用浙江省水产品三唑磷污染风险较低。

3 结论

利用建立的水产品中有机磷农药的固相萃取-气相色谱串联质谱检测方法,对温州典型养殖水产品进行有机磷农药残留分析，结果显示贝类样品中三唑磷检出率较高。居民水产品消费三唑磷农药暴露风险评价表明水产品三唑磷残留其膳食风险是较低的。