丁香酚诱导癌相关成纤维细胞 的凋亡及其机制的研究

2019-03-04 01:52徐江昊何建霄文渚媛
中小学信息技术教育 2019年1期
关键词:丁香酚着色纤维细胞

徐江昊 何建霄 文渚媛

【摘 要】

目的:研究丁香酚诱导癌相关成纤维细胞的凋亡及其机制。

背景:根据美国癌症研究协会2017年发布的年度癌症进展报告,我们发现癌症已经成为一个严重的全球性问题,癌症患者的数量正在增加。然而,传统的癌症治疗方法面临许多挑战,因此我们的实验试图研究有效的方法来解决癌症问题。

方法:采用MTT 法检测丁香酚对细胞活性的影响,采用Western blot法检测丁香酚对相关凋亡蛋白的影响,采用流式细胞术检测丁香酚是否促进了与癌相关成纤维细胞的凋亡。

结果:丁香酚对癌相关成纤维细胞(CAF)有抑制作用。

1.研究背景

癌症是世界范围内一个主要的公共卫生问题,也是导致大多数国家人口死亡率居高的主要原因。然而,传统的癌症治疗,包括手术、放疗和化疗,由于其副作用和高复发率,面临着严峻的挑战。因此,治疗恶性肿瘤迫切需要安全有效的治疗策略。

天然产物对药物开发很重要,许多天然物质的提取物,例如紫杉醇和MPSSS,都具有很强的抗肿瘤作用。丁香酚是从丁香中提取的精油主要成分,同时具有广泛的药理作用——参与免疫调节和抗炎反应。丁香酚很早就开始作为防腐剂、抗菌剂和止痛剂被使用。美国食品和药物管理局已经宣布丁香酚是安全的,并且是非致癌和非诱变的。近年来,有多项研究证明了丁香酚对各种癌细胞系和动物模型具有抗癌活性。

2.材料与方法

2.1材料

2.2方法

3.结果与分析

3.1 细胞毒性试验检验丁香酚对细胞活力的影响

(1)用不同物质的量浓度的丁香酚处理正常成纤维细胞(NF),24 小时后,用MTT 法检测细胞活力。

(2)用相同物质的量浓度梯度的丁香酚处理癌相关成纤维细胞(CAF),24小时后,用MTT 法检测细胞活力。

如图3所示,数据表明,在0到1.2mM 浓度范围内,丁香酚对正常成纤维细胞活力没有显著性影响;而癌症成纤维细胞随浓度增加活性显著降低,这说明丁香酚对肿瘤微环境中的成纤维细胞有选择毒性。

結果表明,随着丁香酚浓度的升高,癌相关成纤维细胞活力显著下降。

3.2 流式细胞术——丁香酚促进相关成纤维细胞凋亡

结果显示(图4、图5),随着丁香酚浓度升高,Annexin V 阳性(三、四象限)和早期凋亡(第四象限)细胞的比例不断增大。

3.3.Western Blot——丁香酚对凋亡相关蛋白表达水平的影响

使用特异性抗体对凝胶电泳处理过的细胞组织样品进行着色。通过分析着色的位置和着色的深度,可以得知特定蛋白质表达水平量。

(一)Bax 促进肿瘤凋亡作用。

(二)BCL-2 (B-cell lymphoma-2) 是细胞凋亡中最受重视的癌基因之一。

(三)GAPDH 不受药物处理的影响,作为内参蛋白,即参照物。

如图6,结果显示,在0.6mM 情况下,随着时间的推移,Bax 增值,BCL-2 显著减少,GAPDH 几乎没有变化。

结论:初步说明丁香酚对癌症相关成纤维细胞有抑制作用。

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