脊柱结核不同技术与病理标本结核分枝杆菌培养及药敏试验对比

梁利斌

[摘要] 目的 比较研究脊柱结核BacT/ALERT3D法、改良罗氏培养法等不同技术与病理标本脓液、病灶壁等结核分枝杆菌培养及药敏试验结果，探讨应用价值较高的技术和标本。 方法 2016年2月—2018年2月期间，方便选择该院脊柱结核患者的病理标本作为资料，共96例，包含脓液、病灶壁，并进行结核分枝杆菌培养，分别采用BacT/ALERT3D法、改良罗氏培养法，并针对培养阳性细菌进行药敏试验，分析不同培养方法、不同病理组织标本的阳性率，并进行比较。结果 在BacT/ALERT3D法中，病理标本病灶壁培养结果阳性率45.09%显著高于脓液阳性率28.98%（χ2=16.41，P<0.05），在改良罗氏培养法中，病理标本病灶壁培养结果阳性率31.27%显著高于脓液阳性率16.24%（χ2=18.55，P<0.05），即不同病理标本培养结果均存在差异，且均以病灶壁阳性率最高（P<0.05）。 结论 与改良罗氏培养法相比，BacT/ALERT3D法检出率更高，利于结核病的早期诊治，其中病灶壁标本培养阳性率更高，应用价值相对更高，值得推广应用。

[关键词] 脊柱结核;病理标本;结核分枝杆菌;BacT/ALERT3D法、改良罗氏培养法

[中图分类号] R5          [文献标识码] A          [文章编号] 1674-0742（2019）01（a）-0026-03

当前对结核病诊断以结核分枝杆菌培养为主，但脊柱结核病理标本行结核分枝杆菌培养阳性率存在差异，因此需加强对最佳结果脊柱结核病理标本的研究，常见的脊柱结核病理标本包含脓液、肉芽组织及病灶壁[1]。此外不同结合杆菌培养方法也属于影响阳性率的因素，如BacT/ALERT3D法、改良罗氏培养法的结果存在一定的差异，也需进行比较研究[2]。为此，该次研究对脊柱结核不同技术与病理标本结核分枝杆菌培养及药敏试验结果进行了探讨，以2016年2月—2018年2月期间收治的96例为对象，报道如下。

1  资料与方法

1.1  一般资料

方便选择该院行不同手术方式获取的脊柱结核患者的病理标本作为资料，共96例，均经临床、影像学、组织病理学及实验室相关检查确诊。96例患者中男性52例，女性44例，年龄在15～72岁之间，平均年龄为（38.61±2.45）岁，包含颈椎结核3例，胸椎结核34例，胸腰段結核26例，腰椎结核17例，腰骶部结核16例。患者均知情且同意，研究经过伦理委员会批准。

1.2  方法

96例患者采用不同手术方式获取标本，采用无菌注射液吸取脓液，骨刀切取骨病灶，置于无菌平皿密封。

BacT/ALERT3D法：采用油酸、甘油、紫色燃料及1%牛血清蛋白组成10 mL复合溶液，在处理培养瓶中加入0.5 mL抗生素，接种经中和或离心沉淀后标本0.5 mL，经扫描确认后，置入BacT/ALERT3D全自动分支杆菌培养仪中，由仪器自动监测，提示阳性后取出，阴性在仪器报告阴性后取出。改良罗氏培养法严格依据《结核病诊断细菌学检验规程》[3]操作。

将培养结果阳性的病灶组织依据《结核分枝杆菌药物敏感试验标准化操作程序及质量保证手册》[4]进行操作。

1.3  统计方法

采用SPSS 20.0 统计学软件进行数据处理分析，计量数据采用平均数±标准差（x±s）表示，进行t检验，计数资料采用[n（%）]表示，进行χ2检验，P<0.05为差异有统计学意义。

2  结果

2.1  不同培养方法检出阳性率比较

BacT/ALERT3D法检出阳性率36.50%显著高于改良罗氏培养法23.26%（χ2=24.67，P<0.05）。

2.2  不同病理标本培养结果分析

在BacT/ALERT3D法中，病理标本病灶壁培养结果阳性率45.09%显著高于脓液阳性率28.98%，在改良罗氏培养法中，病理标本病灶壁培养结果阳性率31.27%显著高于脓液阳性率16.24%，即不同病理标本培养结果均存在差异，且均以病灶壁阳性率最高（P<0.05）。

3  讨论

目前在脊柱结核诊断中可采用BacT/ALERT3D法和改良罗氏培养法进行结核分枝杆菌培养，其中罗氏培养法培养基含有谷氨酸钠，可为细菌提供多种营养物质，且具有毒性低，补充无机盐等优势，利于细菌的生长，可为大多数分支杆菌提供良好的环境[5-6]。改良罗氏培养法将丙酮酸钠代替丙三醇，进一步促进牛分至杆菌和非洲分至杆菌的生长，利于进一步提高标本阳性率[7]。BacT/ALERT3D法属于全自动非放射性的快速细菌培养系统，培养基中含有肉汤、油酸、甘油等成分，且其将牛血清代谢结合游离脂肪酸，起到保护结核分至杆菌的作用[8]。BacT/ALERT3D法主要是利用二氧化碳比色对结核分枝杆菌的生长情况进行显示，当分支杆菌生长时，二氧化碳渗透至感应器，并改变感应器的酸碱度值，颜色会由深绿色变为黄色，且可实现自动连续检测[9]。该次研究结果显示BacT/ALERT3D法检出阳性率36.50%显著高于改良罗氏培养法23.26%（P<0.05）;表明BacT/ALERT3D法检出检出价值更高，与改良罗氏培养法易受到标本采集、保存条件及实验操作等因素影响相比，其具有操作简单、结果准确等优势，利于为结核病的早期诊治提供可靠依据。脊柱结核存在菌量多、毒力强等特征，会表现出浆液性或浆液纤维蛋白性炎，并经过一系列病理变化形成结核性肉芽及干酪样坏死物，伴随大量的结核杆菌。该次研究结果显示在BacT/ALERT3D法中，病理标该病灶壁培养结果阳性率45.09%显著高于脓液阳性率28.98%（χ2=16.41，P<0.05），在改良罗氏培养法中，病理标本病灶壁培养结果阳性率31.27%显著高于脓液阳性率16.24%（χ2=18.55， P<0.05），即不同病理标本培养结果均存在差异，且均以病灶壁阳性率最高（P<0.05），表明脓液是坏死组织，里面的结核杆菌较少，而病灶壁则具有一定的优势。与孙宇航等[12]《脊柱结核不同技术与病理标本结核分枝杆菌培养及药敏试验的比较》结果，Bac T/ALERT 3D法和改良罗氏培养法培养结核分枝杆菌的阳性率分别为32.82%和20.99%。两者比较差异有统计学意义（P<0.05）;Bac T/ALERT3D法中脓液、肉芽组织、病灶壁3种标本的阳性率分别为34.17%、23.08%、15.58%，差异有统计学意义（P<0.05）;改良罗氏培养法中上述3种标本的阳性率分别为26.13%、12.43%、5.84%，差异有统计学意义（P<0.05）”基本一致。

综上所述，为实现结核病的早期应选择病灶壁标本培养，并采用BacT/ALERT3D法，具有阳性率高的优势，值得推广。

[参考文献]

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（收稿日期：2018-10-13）