2018年规模化猪场伪狂犬病野毒感染血清流行病学调查

林文耀，宋庆庆，刘玉梅，王 凯，刘国民，黄 超

（金宇保灵生物药品有限公司，内蒙古 呼和浩特 010030）

自2011年以来，新流行的猪伪狂犬病（PR）变异毒株毒力增强，对猪的致病力增强，主要表现为猪群gE抗体阳性率显著升高，发病妊娠母猪流产，产弱仔、死胎；新生仔猪死亡率高，同时出现角弓反张等神经症状，病死率在10%~50%。病毒的分离鉴定表明疫病由变异伪狂犬病病毒（PRV）毒株引起，并且新流行毒株处于独立的进化分支，这对PR的防控提出了严峻挑战[1-3]。2012年，我国首次颁布了《国家中长期动物疫病防治规划（2012—2020年）》，针对猪伪狂犬病的防控明确提出种猪场在2020年必须维持gE抗体阴性。为掌握现有的防疫控制体系下我国猪场伪狂犬病野毒感染的状况，有效控制和净化猪伪狂犬病，笔者对2018年1—12月中国24个省市358个规模化猪场不同猪群的伪狂犬病野毒血清流行病学进行了全面调查与系统分析，现将结果报告如下。

1 材料和方法

1.1 试验材料

1.1.1 采样方法 样品采用横断面采样方法，分别采集公猪、后备猪、不同胎次生产母猪以及不同生长阶段商品猪群的血液，分离血清，送金宇保灵国家工程实验室检测。

1.1.2 血清样品 血清样品采集时间为2018年1—12月，共36 565份，其中种猪群血清样品18 256份，不同周龄仔猪和生长育成猪群样品18 309份。样品来自我国24个省市358个规模化猪场，包括种猪场和商品育成猪场，记录各猪场各主要疫病免疫程序，方便对结果进行分析。

1.1.3 检测试剂 猪伪狂犬病病毒野毒抗体检测采用gE-ELISA（酶联免疫吸附试验）鉴别诊断试剂盒。

1.2 试验方法

阻断ELISA法。操作方法以及结果判定参照试剂盒说明书进行。

1.3 结果判定

结果判定参照试剂盒说明书进行。检测的血清样品全部来自使用gE基因缺失疫苗免疫的猪场，所以检测到gE抗体阳性猪可以判断该猪场被伪狂犬病野毒感染。在进行猪场结果判定和统计时，只要猪场有一个样品为阳性，则该场判定为伪狂犬病野毒阳性场。

2 结果

2.1 2018年规模化猪场伪狂犬病野毒gE抗体检测结果

在2018年所检测的358个规模化猪场中，260个猪场为伪狂犬病野毒阳性，猪场阳性率为72.63%；总血清样品数36 565份，11 282份为阳性，样品阳性率为30.85%（表1）。总体而言，不同地区的猪场阳性率均居高不下，24个送检省市中，有21个省市猪场阳性率≥50%。但是，不同地区的阳性猪场样品阳性率却差异较大，24个送检省市中，只有3个省市样品阳性率≥50%。这种差异可能是由于不同地区对伪狂犬病的防控重视程度和生产管理水平不同造成的。

表1 2018年不同地区规模化猪场伪狂犬病野毒gE抗体检测结果

按照地区统计，七大区域均有猪伪狂犬病野毒感染，其中华东猪场阳性率和样品阳性率均为最高，分别为93.85%和49.56%（表2），提示华东地区猪伪狂犬病防控的压力更大。

表2 2018年不同地区规模化猪场伪狂犬病野毒gE抗体阳性率

2.2 2018年伪狂犬病野毒阳性猪场不同类别和阶段种猪的阳性率

由表3可知，不同类别和阶段的种猪都存在猪伪狂犬病野毒感染。生产母猪的阳性率高于公猪和后备母猪。gE抗体阳性率与母猪胎次密切相关，胎次越高阳性率越高，表明新进群的母猪随着时间的推移，被感染的几率提高，提示猪场内伪狂犬病野毒的循环感染压力较大。

2.3 2018年伪狂犬病野毒阳性猪场不同生长阶段肥育猪gE抗体阳性率

由表4可知，肥育猪从16周开始gE抗体阳性率开始上升，从16周到24周由21.67%升到40.32%，显然由伪狂犬病野毒感染所致，因为母源抗体一般维持约4个月[4]。肥育猪后期出现呼吸道疾病，日增重不理想等现象，这与伪狂犬病野毒感染肥育猪后表现的临床症状一致。

表3 2018年伪狂犬病野毒阳性猪场不同类别和阶段种猪gE抗体阳性率

表4 2018年伪狂犬病野毒阳性猪场不同生长阶段肥育猪gE抗体阳性率

3 分析与讨论

3.1 猪伪狂犬病仍是我国养猪业的主要传染病

本次调查持续1年。调查样品来自我国24个省市358个规模化猪场，共36 565份，是目前国内调查范围较广的规模化猪场伪狂犬病野毒感染血清流行病学调查。结果表明猪伪狂犬病在规模化猪场仍普遍存在，野毒感染较为严重。七大区域均存在伪狂犬病野毒的感染，其中华东猪场阳性率和样品阳性率均为最高，分别为93.85%和49.56%。

国内相关学者也对伪狂犬病野毒血清流行病学作了相关调查。胡睿铭等对9个省市2011—2013年692份血清样品进行gE抗体检测，结果显示血清样品阳性率为67.05%（464/692）[5]。邹敏等对来自18个省市2012—2013年393个送检猪场共14 801份血清样品进行检测，调查结果显示猪场阳性率为44.02%（173/393），样品阳性率为 16.13%（2 388/14 801），并发现阳性率有上升的趋势[6]。解伟涛在2014年第一季度的检测结果表明，血清样品gE抗体阳性率为37.92%（1 244/3 281），比 2013年上升 6.6%；猪场阳性率为 89.9%（124/138），比 2013 年上升 6.3%[7]。

不同的调查研究产生了不尽相同的结果，可能是采样地区、采样阶段、采样数量不同而产生差异，但是猪伪狂犬病的发生有维持上升趋势的结论是一致的，提示猪伪狂犬病在未来一段时间仍是中国养猪业的主要传染病，猪伪狂犬病的预防和净化不容乐观。

3.2 种猪带毒是猪伪狂犬病持续流行的重要原因

由表3可知，生产母猪gE抗体阳性率与胎次密切相关，胎次越高阳性率越高，提示猪场内野毒的循环感染压力较大，可能与公猪感染野毒有关，场内母猪人工授精时受到污染野毒的精液感染，随着人工授精的次数增加，感染的几率也随之增加，因为公猪精液可以携带伪狂犬病野毒。调查结果也表明，公猪确实存在猪伪狂犬病野毒的感染，比例为25.77%。后备母猪gE抗体阳性率为20.46%，提示补充的阳性后备母猪可能是猪场伪狂犬病反复发生的原因之一，提醒引种时必须进行gE抗体的检测，确保引进的种猪为gE抗体阴性，同时做好生物安全隔离区，保证后备母猪更新不受伪狂犬病野毒的感染，导致种猪的带毒率居高不下。

预防种猪感染伪狂犬病野毒是伪狂犬病防控和净化的关键问题。首先，要保证更新的公猪和后备母猪伪狂犬病野毒阴性，引种前进行gE抗体检测，确保引进的种猪为阴性猪。做好隔离等生物安全措施，稳定后首先免疫伪狂犬病gE基因缺失疫苗，转生产前免疫两次。为了提高中和抗体水平，提高抗感染能力，可免疫高效的伪狂犬病活疫苗，如2011年新分离的毒株C株。C株可有效提高中和抗体滴度，减少抗体离散度。两次免疫后产生的中和效价高于活疫苗+灭活疫苗+灭活疫苗的免疫组合方案产生的中和抗体，可能与疫苗毒株的免疫原性，疫苗的生产工艺和抗原含量、佐剂等有关系，提示C株可以作为防控猪伪狂犬病的高效疫苗[9]，有效简化现有“活+死”免疫组合方案，简化猪场免疫程序，降低疫苗成本。然后通过gE抗体筛查，淘汰阳性的生产公猪，保证生产公猪为阴性。因为伪狂犬病病毒可通过精液传播，通过人工授精快速传播[8]。其次，加强种猪免疫强度，年普免4次，可以有效减少种猪的带毒和排毒时间。最后，生物安全仍是很重要的防线。从表3我们得知，不同胎次的生产母猪都存在一定的野毒感染比例，为减少生产公猪的感染风险，必须禁止查情公猪返回公猪站，防止查情公猪成为伪狂犬病野毒传播的媒介。

3.3 重视生长肥育猪的伪狂犬病疫苗免疫，减少肥育后期的感染

由表4可知，肥育猪gE抗体阳性率从16周开始上升。一般来讲，gE母源抗体维持时间在120 d左右[4]。如没有野毒的感染，随着母源抗体的消退，16周开始gE抗体阳性率应该出现下降，不降反升说明在13~16周这个阶段有伪狂犬病野毒的感染导致阳性率的上升，同现实生产相吻合。现实生产很多猪场只重视母猪的免疫，往往忽视仔猪的免疫。有的猪场只免疫母猪，不免疫仔猪。有的猪场母猪免疫进口疫苗，仔猪免疫国产疫苗，对仔猪伪狂犬病疫苗的选择也比较随意。有的猪场仔猪只在出生滴鼻免疫一次。随着母源抗体的消退，肥育猪后期缺乏保护力，感染伪狂犬病野毒，在生产上往往出现呼吸道疾病，继发细菌感染，如传染性胸膜肺炎等，抗生素治疗效果不明显。此外，感染的肥育猪进入后备猪群，形成循环感染，这也是部分猪场伪狂犬病持续存在、难于净化的重要原因。据我们的经验，在伪狂犬病防控压力较大的现状下，仔猪滴鼻一次和两次肌注伪狂犬病活疫苗，可以有效维持阳性场的生产稳定，减少肥育猪的感染机会，进而减少猪场的病毒载量（对一点式生产的猪场尤为重要），阳性场获得阴性仔猪也是有可能的。

3.4 猪伪狂犬病的防控

本次的调查结果表明猪伪狂犬病在未来一段时间仍是中国养猪业的重要传染病。结合检测猪场免疫程序的分析，发现肥育后期有伪狂犬病野毒的再感染通常执行类似的免疫程序：小猪初生滴鼻，45 d首免，70 d二免。建议每个猪场根据检测结果制定自己合适的免疫程序，考虑母源抗体的干扰作用及明确场内的感染时间点，毕竟阳性场和阴性场的免疫程序是有区别的。

An等在免疫Bartha K61疫苗后仍然暴发猪伪狂犬病的猪场分离到猪伪狂犬病毒变异株[1]，说明该疫苗株对变异株不能提供完全的保护，可能是变异株的gB抗原表位发生了变化，导致了免疫失败[10]。本次调查也发现免疫Bartha K61疫苗的规模化猪场gE抗体阳性率居高不下，提示变异株的出现对现有疫苗的保护效果提出了巨大的挑战。在这种流行趋势下，选用优质高效的伪狂犬病gE基因缺失的变异株活疫苗，区别自然感染或疫苗免疫的猪只，制定科学的免疫程序是预防和控制猪伪狂犬病的主要手段。