妊娠期高血压患者内脂素、网膜素在胎盘组织中的表达及意义

黄蓉 王桃桃 祁文瑾

摘要：目的  探讨内脂素和网膜素在HDCP患者胎盘的表达情况及胎盘异质性对其表达的影响。方法  以昆明医科大学第一附属医院2015年7月～2016年7月产科住院分娩的53例合并妊娠期高血压HDCP产妇作为研究对象，根据病情轻重分为GH组、MPE组、SPE组，统称HDCP组，另选正常妊娠晚期妇女53例为对照组。采用酶联免疫吸附法（ELISA）检测两组不同部位、不同层次胎盘组织中内脂素、网膜素含量并进行比较。结果  ①HDCP组胎盘组织中表达的内脂素（177.79±156.43）pg/ml高于对照组（116.89±99.63）pg/ml，统计学意义显著（P<0.01）。②对照组和GH组胎盘网膜素水平分别为（393.69±223.35）ng/L、（389.55±272.14）ng/L，高于MPE组（323.58±180.33）ng/L及SPE组（242.91±202.64）ng/L， MPE组胎盘网膜素水平（323.58±180.33）ng/L高于SPE组（242.91±202.64）ng/L，差异均有统计学意义（P<0.05）。③胎盘组织中内脂素和网膜素的表达无相关关系。结论  HDCP患者胎盘组织中内脂素表达水平显著升高而网膜素表达水平显著降低，其可能与HDCP发生、发展相关;胎盘异质性对内脂素和网膜素的表达存在影响。

关键词：妊娠期高血压疾病;胎盘;内脂素;网膜素

中图分类号：R714.2                                 文献标识码：A                                 DOI：10.3969/j.issn.1006-1959.2019.06.024

文章編号：1006-1959（2019）06-0075-04

Abstract：Objective  To investigate the expression of visfatin and retinal in placenta of HDCP patients and the effect of placental heterogeneity on its expression. Methods  From the first affiliated hospital of Kunming Medical University， from July 2015 to July 2016， 53 patients with gestational hypertension with HDCP were enrolled in the study. According to the severity of the disease， they were divided into GH group， MPE group and SPE group.Collectively referred to as the HDCP group， 53 women with normal late pregnancy were selected as the control group. Enzyme-linked immunosorbent assay （ELISA） was used to detect and compare visfatin and retinal content in placenta of different sites and different levels. Results  ①The visfatin （177.79±156.43） pg/ml expressed in the placenta of HDCP group was higher than that of the control group （116.89±99.63） pg/ml， which was statistically significant （P<0.01）. ②The levels of placental reticulum in the control group and GH group were （393.69±223.35） ng/L， （389.55±272.14） ng/L， higher than the MPE group （323.58±180.33） ng/L and the SPE group （242.91±202.64）ng/L，The level of placental reticulum in the MPE group （323.58±180.33） ng/L was higher than that in the SPE group （242.91±202.64） ng/L，the difference was statistically significant （P<0.05）.③There was no correlation between the expression of visfatin and retinal in the placental tissues. Conclusion  The expression of visfatin in placenta of patients with HDCP is significantly increased and the expression of retinal is significantly decreased， which may be related to the occurrence and development of HDCP. Placental heterogeneity has an effect on the expression of visfatin and retinoid.

Key words：Hypertensive disorder of pregnancy;Placenta;Visfatin;Retinoid

妊娠期高血压疾病（hypertensive disorder of pregnancy，HDCP）是妊娠与高血压并存的一组疾病，与母体围生期发病率及围产儿死亡率密切相关，但其发病机制尚不明确。据有关资料报道近几年新发现的细胞因子：内脂素[1]（visfatin）和网膜素[2]（omentin）可能作用于HDCP的发生和发展，但具体机制及结论尚存争议。本研究拟对HDCP患者胎盘组织内脂素、网膜素的含量变化进行测定，探讨内脂素、网膜素是否参与HDCP发病及进展，明确二者是否可作为HDCP预测因子。

1对象与方法

1.1研究对象  以昆明医科大学第一附属医院2015年7月～2016 年7月住院分娩的53例合并妊娠期高血压HDCP產妇作为研究对象，本研究经医院伦理委员会审核批准，研究对象均知情同意。其中的根据病情轻重分为妊娠期高血压（gestational hypertension，GH）组、轻度子痫前期（mild preeclampsia，MPE）组、重度子痫前期（severe preeclampsia，SPE）组，统称HDCP组，因MPE组例数较少，结果分析时将MPE及SPE合为PE组进行分析。另选同期正常妊娠晚期妇女53例为对照组。

1.2纳入与排除标准

1.2.1纳入标准  所有对象均不吸烟、饮酒，饮食和生活习惯无特殊，HDCP诊断及分组严格参照《妇产科学》第八版[3]及中华医学会妇产科学分会《妊娠期高血压疾病诊治指南（2015）》[4]。

1.2.2排除标准  所有对象均排除妊娠期其它合并症和并发症，且随访至产后12周，排外慢性高血压合并妊娠。

1.3方法

1.3.1标本采集  在胎盘娩出30 min内，避开肉眼可见的纤维化、梗死及钙化区，以脐带附着部胎盘即为中心部（center，C），胎盘边缘处即为边缘部（boarder，B），两者连线中点即为中间部（middle，M），取1 cm×1 cm×3 cm大小胎盘组织各 1 块，并将这 3 块胎盘组织按照母体面层（maternal，M）、绒毛层（villus，V）和胎儿面层（fetal，F）分为上、中、下三层，即：近脐带胎儿面（CF）、近脐带绒毛层（CV）、近脐带母体面（CM）、脐带与边缘中间胎儿面（MF）、脐带与边缘中间绒毛层（MV）、脐带与边缘中间母体面（MM）、边缘胎儿面（FF）、边缘绒毛层（FV）、边缘母体面（FM）。无菌盐水反复冲洗，滤纸吸干。分别放入灭菌无酶冻存管中，放置于液氮中速冻24 h，去除并转入-80 ℃冰箱中保存待测。实验前解冻剪碎胎盘组织，用微量电动组织匀浆仪匀浆，按500 μl PBS（pH=7.4）/g比例稀释，低温高速离心机离心20 min（3000 r/min），离心后收集上清液待检测。

1.3.2指标测定  ELISA检测妊娠妇女胎盘组织内脂素和网膜素含量，ELISA试剂盒均购自美国R&D公司，操作均严格按说明书进行。

1.3.3临床资料收集  收集研究对象的年龄、孕次、产次、孕前身高及体质量、入院时身高及体质量，分别计算孕前BMI和产前BMI。

1.4统计学方法  采用SPSS 21.0软件进行统计学处理，所有测定计量资料数据以（x±s）表示，两组间比较采用t检验，多组间比较采用单因素方差分析，相关性分析采用Pearson相关分析法。统计检验均为双侧概率检验（α=0.05），P<0.05为差异有统计学意义，P<0.01表示统计学意义显著。

2结果

2.1产妇一般资料比较  经统计学分析显示HDCP组及对照组年龄、孕产次、孕前BMI比较，差异无统计学意义（P>0.05）;HDCP组产前BMI显著高于对照组，孕周小于对照组，差异均有统计学意义（P<0.05），见表1。

2.2各组妊娠妇女胎盘组织内脂素、网膜素含量比较  HDCP组胎盘组织内脂素含量高于对照组，统计学意义显著（P<0.01）。GH组、MPE组、SPE组胎盘组织中内脂素水平均高于对照组，统计学意义显著（P<0.01），而GH组、MPE组、SPE组之间胎盘内脂素水平比较，差异无统计学意义（P>0.05）;对照组胎盘组织网膜素含量高于HDCP组，统计学意义显著（P<0.01）。对照组胎盘组织网膜素水平高于GH组，但差异无统计学意义（P>0.05）;对照组和GH组胎盘网膜素水平高于MPE组及SPE组，MPE组胎盘网膜素水平高于SPE组，差异均有统计学意义（P<0.05）。各组患者胎盘组织中内脂素、网膜素含量见表2。HDCP各组及对照组胎盘组织内脂素、网膜素含量见表3。

2.3内脂素和网膜素在胎盘不同位置、不同层次表达的比较  因MPE组例数较少，现将MPE及SPE合为PE组进行分析。结果显示：① HDCP组胎盘组织中CF、CM、MM、BM内脂素含量高于对照组;进一步分析显示：PE组胎盘组织中CF、CV、CM、MV、MM、

BF、BV、BM内脂素含量高于对照组（P<0.05）;但GH与PE组之间内脂素含量比较，差异无统计学意义（P>0.05）。②HDCP组胎盘组织中CV、BF、BV网膜素含量低于对照组;PE组胎盘组织中CF、CV、CM、MM、BF、BV、BM网膜素含量低于对照组（P<0.05）;其中CV、CM、BF、BV、BM网膜素含量低于GH组（P<0.05）;GH和对照组间网膜素含量比较，差异无统计学意义（P>0.05）。③同一患者胎盘不同位置，不同层次内脂素、网膜素的含量不同，但差异无统计学意义（P>0.05）见表4。

2.4胎盘组织中表达的内脂素和网膜素相关关系  对照组及HDCP组胎盘组织中内脂素和网膜素含量相关关系如图1，统计分析结果表明胎盘组织中表达的内脂素和网膜素无相关关系（P>0.05）。

3讨论

妊娠期高血压疾病是一种病因不明的病理妊娠，常发生于妊娠20周以后，以全身小血管痉挛、内皮细胞受损及局部缺血为特征，临床表现为高血压、蛋白尿，伴或不伴水肿，肝肾功能异常，严重者可出现抽搐、昏迷，甚至死亡，严重影响母婴健康，是孕产妇和围产儿病死率升高的主要原因[3，4]。本研究发现HDCP组和对照组孕产妇年龄、孕产次、孕前BMI之间无显著差异，而HDCP组妇女孕期体重增长高于对照组，分娩孕周小于对照组，提示孕期体重增长过多可能增加罹患HDCP的风险，导致分娩孕周提前，说明孕期良好体重控制对预防HDCP发生，改善胎儿结局具有积极意义，与国内外研究结果一致[5，6]。

内脂素是内脏脂肪组织分泌的一种特异性脂肪因子，本研究中HDCP患者中各组胎盘组织中内脂素含量均显著高于对照组（P<0.01），此结果与Alberico S等、Montico M等的研究结果一致[7，8]，表明胎盘组织高水平的内脂素可能与HDCP的发生、发展有关，究其原因可能为：①内脂素能增加hs-CRP、TNF-α及IL-6等表达，导致血管调节因子失衡，引起血管內皮细胞受损;②内脂素可激活胰岛素受体并具有胰岛素模拟作用，引起血脂代谢异常及胰岛素抵抗（insulin resistance，IR）加重，导致HDCP的发病;③内脂素可作为血管平滑肌细胞的生长因子，促进主动脉平滑肌细胞增殖，从而导致高血压的形成[9]。研究还发现GH组、MPE组、SPE组胎盘组织中内脂素的表达差异无统计学意义，表明内脂素在胎盘组织中的表达情况与HDCP的病情严重程度无相关关系。

网膜素是一种表达于网膜脂肪组织的一种特异性因子，本研究发现，HDCP组网膜素在胎盘组织的表达显著低于对照组，且网膜素在胎盘中的表达在GH组、MPE组、SPE组逐渐递减，表明网膜素在胎盘中的表达与HDCP患者的病情呈负相关关系。究其原因可能是：①网膜素可用于检测血管内皮功能是否存在异常，具有抗炎和舒张血管的作用[10];②网膜素可抑制 TNF-α诱发的 VCAM表达，主要机制为减少血管平滑肌细胞合成过氧化物及降低血管壁上淋巴细胞的粘附聚集[11];③网膜素能改善其胰岛素抵抗，增加肝糖摄取，刺激肌肉脂肪酸氧化[12]。总之，网膜素可能通过抑制血管炎症、舒张血管及改善胰岛素抵抗作用于HDCP的疾病进展。本研究还发现HDCP组胎盘组织中网膜素低于对照组（P<0.01），但胎盘组织中网膜素的表达在对照组和GH组中无显著差异，表明HDCP组胎盘网膜素含量明显低于正常组主要是由PE组的降低造成的，提示HDCP病情只有发展到某一程度，胎盘网膜素含量才会出现显著降低。网膜素含量的测定可作为预测HDCP发生及病情发展程度的指标。

胎盘是胎儿和母体间进行物质交换的场所。有学者将妊娠期高血压疾病称之为“胎盘病”，因其在胎盘娩出后常很快缓解或可自愈。胎盘主要由囊胚外围的滋养外胚层细胞发育而成，由间质滋养层细胞（i EVTs）侵入子宫蜕膜直至子宫肌层的上1/3，保证母胎界面血流灌注，为宫内胎儿生长发育提供必需营养物质[13]。本研究结果显示对照组、GH组、PE组患者胎盘不同位置，不同层次内脂素、网膜素的表达存在差异，母体面胎盘组织中内脂素含量显著高于对照组，而PE组患者除CF外，近脐带组及胎盘边缘组各点网膜素含量显著低于GH组和对照组。提示胎盘异质性对内脂素和网膜素的表达存在影响，可能与子宫螺旋动脉重铸不全、胎盘浅着床及胎盘不同部位脂代谢存在差异相关[14]。对照组和HDCP组胎盘组织中表达的内脂素和网膜素无相关关系，分析二者可能经过不同机制作用于脂代谢影响HDCP的发生与发展，但其确切机制需进一步大样本数据研究证实。且因本次研究MPE组实验例数较少，若分析两者于胎盘表达水平差异是否与疾病严重程度相关，还需大量分组实验研究。

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收稿日期：2019-1-17;修回日期：2019-1-28

编辑/肖婷婷