30%吡丙醚·虫螨腈悬浮剂的高效液相色谱分析

陆东亮，卜德红，苑志军

（1.上海杜邦农化有限公司，上海200137；2.上海生农生化制品股份有限公司，上海201619）

吡丙醚又称蚊蝇醚，是苯醚类昆虫生长调节剂，属保幼激素类的新型杀虫剂，具有内吸转移活性、低毒、对生态环境影响小和持效期长等特点，对苍蝇、蚊虫等卫生害虫具有很好的防治效果，同时对烟粉虱、介壳虫、小菜蛾、木虱、蓟马等也有良好的防治效果，能够有效抑制幼虫化蛹和羽化。虫螨腈是新型吡咯类杀虫剂，作用于昆虫体内细胞的线粒体，在昆虫体内多功能氧化酶的作用下转变为杀虫活性化合物，通过抑制二磷酸腺苷向三磷酸腺苷的转化，使细胞合成因缺少能量而停止生命活动，该药具有胃毒和触杀作用、杀虫广谱、与其他杀虫剂无交互抗性等特点[1-2]。但有关吡丙醚·虫螨腈悬浮剂的高效液相色谱分析方法，目前尚未见到公开报道。

该实验建立使用的是Kromasil C18柱和紫外可变波长检测器，以乙腈-水为流动相的液相色谱分析方法，用外标法对有效成分进行定量分析。该方法同时适用于吡丙醚和虫螨腈原药及制剂的分析，具有简便、快速、准确、分离效果好的特点，用于产品质量的检测分析。

1 实验部分

1.1 仪器与试剂

Agilengt 1260高效液相色谱仪，具有紫外检测器和自动进样器；Agilengt色谱工作站；色谱柱：Kromasil C18 250 mm×4.6 mm（id）不锈钢柱；紫外分光光度计；乙腈：色谱纯；水：二次蒸馏水；吡丙醚、虫螨腈标准品：已知质量分数；30%吡丙醚·虫螨腈悬浮剂（上海生农生化制品股份有限公司）。

1.2 色谱条件

流量：1.5 mL/min；柱温：25℃；检测波长：254 nm；进样体积：5 μL；流动相：乙腈 + 水 =65+35（V/V）；保留时间：虫螨腈约12.4 min，吡丙醚约14.6 min。

上述参数可根据仪器特点进行适当调整，以期获得最佳效果，典型液相色谱分离图见图1。

图1 30%吡丙醚·虫螨腈悬浮剂液相色谱图

1.3 测定步骤

1.3.1 标样溶液的配制

准确称量吡丙醚和虫螨腈标样各约0.05 g（精确至0.000 2 g）于100 mL容量瓶中，用乙腈溶解、定容后备用。

1.3.2 试样溶液的配制

准确称量试样约0.33 g（精确至0.000 2 g）于100 mL容量瓶中，用乙腈溶解、定容，用0.45 μm过滤膜过滤后备用。

1.3.3 测定

在上述操作条件下，待仪器基线稳定后，连续注入数针标样溶液，直至相邻2针吡丙醚和虫螨腈的相对响应值变化小于1.5%后，按照标样溶液、试样溶液、试样溶液、标样溶液的顺序进样测定。

1.3.4 计算

将测得的两针试样溶液以及试样溶液前后两针标样溶液中吡丙醚（虫螨腈）峰面积分别进行平均。吡丙醚（虫螨腈）质量分数X（%）按下式计算：

式中：A1—标样溶液中吡丙醚（虫螨腈）峰面积的平均值；A2—试样溶液中吡丙醚（虫螨腈）峰面积的平均值；m1—吡丙醚（虫螨腈）标样的质量，g；m2—试样的质量，g；P—吡丙醚（虫螨腈）标样的质量分数，%。

两次平行测定结果之差应不大于0.3%，取其算数平均值作为测定结果。

2 结果与讨论

2.1 色谱条件选择

2.1.1 检测波长的选择

对吡丙醚和虫螨腈标样溶液分别用紫外分光光度计进行全波长扫描，得到相应的吸收波长与吸光度的紫外吸收光谱图。当选用254 nm作为检测波长时，两者均具有较强的吸收峰，同时杂质干扰小，流动相无吸收。因此，为兼顾两者，将检测波长定为254 nm[3-5]。

2.1.2 流动相的选择

根据吡丙醚和虫螨腈的特点，以不同比例的甲醇-水和乙腈-水作为流动相进行分离检测，结果发现，在乙腈-水体积比为65∶35（V/V）时，分离效果好，峰型对称，基线平稳[6-7]。

2.2 线性相关性测定

分别称取99.5%吡丙醚标样0.134 2 g和98.0%虫螨腈标样0.255 8 g于500 mL容量瓶中，用乙腈溶解并稀释至刻度。准确吸取 5 mL、10 mL、15 mL、20 mL、25 mL于5只100 mL容量瓶中，用乙腈稀释至刻度，摇匀后进样分析。以标样浓度为横坐标，峰面积值为纵坐标，绘制标准曲线，得回归方程：吡丙醚Y=2.2298X+2.9000，相关系数r=1.0；虫螨腈Y=5.233 2X+4.418 7，相关系数r=1.0，数据见表1。

表1 20%吡丙醚·虫螨腈悬浮剂线性测定

2.3 方法精密度测定

对同一30%吡丙醚·虫螨腈悬浮剂按上述色谱操作条件下重复测定6次，吡丙醚、虫螨腈含量平均值分别为10.26%和20.22%，标准偏差吡丙醚、虫螨腈分别为0.013%和0.019%，变异系数吡丙醚、虫螨腈分别为0.130%和0.094%，结果见表2。

表2 20%吡丙醚·虫螨腈悬浮剂精密度测定

2.4 方法准确度测定

采用标准加入法，在已知含量的30%吡丙醚·虫螨腈悬浮剂中加入一定量的吡丙醚和虫螨腈标准品，按上述色谱条件分析测定，计算回收率，结果如表3。吡丙醚添加回收率在99.33%～100.63%之间，平均回收率为99.78%；虫螨腈添加回收率在99.16%～99.95%之间，平均回收率为99.43%。由表3可知该法准确度较高，可准确测量。

表3 30%吡丙醚·虫螨腈悬浮剂回收率测定

3 结论

综上所述，实验建立的30%吡丙醚·虫螨腈悬浮剂中有效成分质量分数的高效液相色谱分析方法线性关系良好，精密度和准确度高，并具有操作简便、快速、分离效果好等优点，可适用于产品质量分析检测的需要。