Visfatin在结直肠癌中的表达及其意义

荣玮 徐晨 李雪松

【摘要】目的：本研究目的是探讨visfatin结直肠癌组织中的表达及其与临床各个病理因素之间的关系。方法：以184例结直肠癌标本作为观察组，对应远切端正常肠粘膜组织作为对照组进行visfatin免疫组化检测。结果：visfatin结直肠癌对照组和观察组阳性率分别为315%（58/184）、684%（126/184），两者比较具有统计学意义（P<005），visfatin的表达与患者年龄、性别和肿瘤的部位、大小无相关性，与肿瘤的分化程度、浸润深度、淋巴结转移、及TNM分期有关（P<005）。visfatin阳性表达组和阴性表达组5年生存率分别为302%和776%。Kaplan-Meier生存分析及log-rank顯著性检验（χ2=33757，P<0001）结论：Visfatin在结直肠癌高表达及与肿瘤的分化程度、浸润深度、淋巴结转移、及TNM分期的相关性，表明Visfatin影响结直肠癌的进展； visfatin阳性表达与结直肠癌患者5年生存期密切相关，是影响结直肠癌预后的因素，visfatin可能成为结直肠癌的独立预后指标。

【关键词】结直肠癌；Visfatin；免疫组化；

【中图分类号】R821.4+1

【文献标志码】A

【文章编号】

1005-0019（2019）16-038-01

结直肠癌（colorectalcancer，CRC）为现今高发的肿瘤之一，而在CRC的发病危险因素中，肥胖具有明显的独立性[1]。

Visfatin是 Samal 等在 1994 年筛选淋巴细胞cDNA文库时克隆成功的，人类该相关基因位于第7号染色体，长约3741 kb，含 11个外显子和 10 个内含子，可编码 473 个氨基酸，是一类具有类胰岛素作用、促炎、促进脂肪组织分化和合成等多种生物学活性的脂肪细胞因子，广泛表达于体内多种组织器官。Visfatin血浆水平升高是中国患者早期和晚期结直肠癌的一个重要危险因素[2]。但在能否成为结直肠癌的预后判断指标国内报道很少。

11标本来源

随机选取2012年1月～2013年12月期间在齐齐哈尔医学院临床病理检验中心根治性切除术的结直肠癌原发病例184例作为观察组，术前均未经任何系统的放疗和化疗。对照组为大肠癌远切端正常组织184例。所有病例均有五年以上随访资料，且用于分析的各项指标记录完整。其中男性94例，女性90例；发病年龄发病年龄42～78岁，中位年龄575岁；发生部位结肠89例，直肠95例；高中分化119例，低分化65例；浸润小于肌层90例，浸及或超过肌层94例；有淋巴结转移者103例，无淋巴结转移者81例；TNM分期中Ⅰ期-Ⅱ期85例，Ⅲ-Ⅳ期99例，生存期大于等于5年者83例，小于5年者101例。

12主要试剂

鼠抗人CD151、MT1-MMP多克隆抗体购自北京博奥森生物技术有限公司，工作液浓度为1∶600，免疫组织化试剂盒及DAB显色液为福州迈新生物技术公司产品。

13实验方法

切片常规脱蜡，水化后，3%H2O2-甲醇封闭内源性过氧化物酶20min，枸橼酸高压修复10min，PBS洗3×3分钟，一抗4℃冰箱过夜，第二天切片恢复室温后，依次滴加试剂A：反应增强液，试剂B：酶标抗小鼠/兔IgG聚合物，室温各孵育15min， 中间PBS洗3×3分钟，DAB显色，苏木精复染。以PBS代替一抗作阴性对照。

14结果评定

采用半定量积分法判定结果，显色度按细胞着色深浅计分：0分基本无着色；1分浅黄；2分浅棕，3分深棕。根据阳性细胞所占百分比计分，无阳性细胞为0分；阳性细胞<10%为1分；阳性细胞≥10%～50%为2分；阳性细胞>50%～75%为3分；阳性细胞>75%以上为4分。

15统计学方法

使用 IBM SPSS Statistics 250 软件对数据进行统计分析。visfatin的表达与临床病理参数间的比较采用χ2检验或Fisher确切概率计算，visfatin的表达与生存时间的关系采用Kaplan-Meier生存率曲线及log-rank检验，显著性检验水准α值等于005。

2结果

21visfatin在结直肠癌组织中的表达

visfatin免疫组化阳性产物呈棕褐色颗粒状位于细胞核和细胞质（图1-2）。visfatin visfatin结直肠癌对照组和阳性率分别为315%（58/184）、684%（126/184），两者比较具有统计学意义（P<0005）。

22visfatin表达与结直肠癌的临床病理因素的关系

visfatin的表达与患者年龄、性别和肿瘤的部位、大小无相关性，与肿瘤的分化程度、浸润深度、淋巴结转移、及Dukes分期有关（P<005） 见表1。

23visfatin表达与患者生存期的关系

184例结直肠癌患者根据visfatin阳性表达的情况分为阳性组和阴性组进行Kaplan-Meier生存分析。visfatin阳性表达组和阴性表达组5年生存率分别为302%和776%，生存分析函数曲线和风险函数曲线（图3-4）及log-rank显著性检验（χ2=33757，P<0001）可知， visfatin与结直肠癌患者5年生存期密切相关，是影响结直肠癌预后的因素。

3讨论

Visfatin在CRC患者血清中的水平明显增高，对CRC的诊断灵敏度和特异度均在70%左右；Visfatin水平上升与CRC发病风险相关，与疾病恶化程度和 肿 瘤 分 期 也 有 关[3]。本研究通过免疫组化半定量积分法证实了visfatin在结直肠癌过表达，与肿瘤的分化程度、浸润深度、淋巴结转移、及TNM分期有关（P<005）。新近研究表明visfatin在胃癌本研究显示，抵抗素和Visfatin协同促进胃癌细胞增殖，增强端粒酶基因表达。这些数据表明，胃癌组织中这两种激素可以通过增强端粒酶作为癌基因的表达，协同促进癌细胞的生长[4]。乳腺癌组织内脂素、淋巴结转移、肿瘤分期、年龄和肿瘤大小，被确定为高度相互作用并与乳腺癌进展相关[5]。子宫内膜癌高visfatin血清水平预测子宫内膜癌患者预后差[6]。本研究通过对visfatin表达与患者生存期的关系的研究表明visfatin与结直肠癌患者5年生存期密切相关，是影响结直肠癌预后的因素（χ2=33757，P<0001）。visfatin可能成为结直肠癌的独立预后指标。

参考文献

[1]JayasekaraH， EnglishDR ，HaydonA，etal. Associations of alcoholintake ，smoking，Physical activity and obesity with survival following colorectal cancer diagnosis by-stage， anatomic site and tumor molecular subtype[J].IntJ Cancer，2018，142（2）：238-250

[2]Chen M1， Wang Y1， Li Y2，etal. Association of plasma visfatin with risk of colorectal cancer： An observational study of Chinese patients. Asia Pac J Clin Oncol. 2016 Mar；12（1）：e65-74 doi： 101111/ajco.12090

[3]孫一帆. Visfatin与消化系统肿瘤的关系研究进展[J]. 检验医学与临床，2016，13（16）：2388-2390 Doi：103969/j.issn.1672-9455201616063

[4]Mohammadi M1， Zarghami N2， Hedayati M1， et al. Synergistic Effects of Resistin and Visfatin as Adipocyte Derived Hormones on Telomerase Gene Expression in AGS Gastric Cancer Cell Line.Acta Med Iran. 2017 Oct；55（10）：621-627

[5]Moi SH#1， Lee YC#2，3， Chuang LY4， et al. Cumulative receiver operating characteristics for analyzing interaction between tissue visfatin and clinicopathologic factors in breast cancer progression.Cancer Cell Int. 2018 Feb 9；18：19 doi： 101186/s12935-018-0517-z.

[6]Cymbaluk-Poska A1， Chudecka-Gaz A1， Pius-Sadowska E2， et al. Circulating Serum Level of Visfatin in Patients with Endometrial Cancer. Biomed Res Int. 2018 Jan 4；2018：8576179 doi： 101155/2018/8576179