血清Ang-2、VEGF、PCDGF在非小细胞肺癌中的诊断价值

孟凡亮 陈亚新 高建荣

摘要：目的  探讨血清血管生成素2（Ang-2）、血管内皮生长因子（VEGF）、 畸胎瘤细胞衍生生长因子（PCDGF）及癌胚抗原（CEA）、鳞状细胞癌抗原（SCC）与非小细胞肺癌临床病理参数的关系，判断其在非小细胞肺癌联合诊断中的价值。方法  收集2017年9月～2018年4月就诊于安医大附属巢湖医院呼吸内科，经病理确诊的48例原发性非小细胞肺癌患者，收集患者临床病理资料，年龄、性别、吸烟、病理、分期、轉移程度，并采用ELISA 法检测48例非小细胞肺癌患者血清中Ang-2、VEGF、PCDGF含量及电化学发光检测CEA、SCC的含量。诊断效能评价指标用ROC曲线分析，以敏感度、特异度、正确率表示。结果在鳞癌患者中Ang-2含量高于腺癌患者（P<0.05）;PCDGF在年龄≤60岁的患者中的水平低于年龄>60岁的患者（P<0.01）;对于局部转移的非小细胞肺癌患者血清VEGF含量高于远处转移患者（P<0.05）;Ang-2+PCDGF联合检测诊断肺鳞癌灵敏度和正确率均为最高，分别为82.76%和75.00%。结论  Ang-2、PCDGF联合检测对于肺鳞癌的诊断价值最高，VEGF能够更好预测非小细胞肺癌局部转移，CEA仍然是腺癌的最敏感的标记物。

关键词：血清血管生成素2;血管内皮生长因子;畸胎瘤细胞衍生生长因子;非小细胞肺癌

中图分类号：R734.2                                  文献标识码：A                                DOI：10.3969/j.issn.1006-1959.2019.15.021

文章编号：1006-1959（2019）15-0066-04

Abstract：Objective  To investigate serum angiopoietin 2 （Ang-2）， vascular endothelial growth factor （VEGF）， teratoma cell-derived growth factor （PCDGF） and carcinoembryonic antigen （CEA）， squamous cell carcinoma antigen （SCC） and non-small The relationship between clinical pathological parameters of lung cancer and its value in the combined diagnosis of non-small cell lung cancer.Methods  From September 2017 to April 2018， we received 48 patients with primary non-small cell lung cancer diagnosed by pathology in the Department of Respiratory Medicine， Chaohu Hospital， Anyang University. The clinical and pathological data were collected. Age， sex， smoking， pathology， The levels of Ang-2， VEGF and PCDGF in serum of 48 patients with non-small cell lung cancer were detected by ELISA. The contents of CEA and SCC were detected by electrochemiluminescence. The diagnostic efficacy evaluation index was analyzed by ROC curve and expressed by sensitivity， specificity and correct rate.Results  The level of Ang-2 was higher in patients with squamous cell carcinoma than in adenocarcinoma patients（P<0.05）; the level of PCDGF in patients aged ≤60 years was lower than that in patients >60 years old （P<0.01）; the serum VEGF level in patients with locally metastatic non-small cell lung cancer was higher than patients with distant metastasis （P<0.05）; the sensitivity and correct rate of Ang-2+PCDGF combined detection for lung squamous cell carcinoma were the highest， 82.76% and 75.00%， respectively.Conclusion  The combined detection of Ang-2 and PCDGF has the highest diagnostic value for lung squamous cell carcinoma. VEGF can better predict the local metastasis of non-small cell lung cancer. CEA is still the most sensitive marker for adenocarcinoma.

Key words：Serum angiopoietin 2;Vascular endothelial growth factor;Teratoma cell-derived growth factor;Non-small cell lung cancer

肺癌（lung cancer，LC）是全球癌症和与癌症相关的死亡的主要原因。非小细胞肺癌（Non-small cell lung cancer，NSCLC）占大多数，约85%[1]，其余大部分為小细胞肺癌，LC的早期诊断和适当的治疗对预后的改善至关重要，治疗的关键问题是病理组织学诊断和分期[2]。新的生物标志物的发现不仅可以作为新疗法的一部分，而且可以了解和评估哪些患者可以从哪些治疗中受益[3]，肿瘤标志物在许多恶性肿瘤的患者管理中发挥着关键作用。血清肿瘤标志物的潜在用途包括帮助早期诊断、确定预后、前瞻性地预测对特定治疗的反应或耐药性、初级手术后的监测以及监测晚期疾病患者的治疗。目前血管生成素-2（angiopoietin-2，Ang-2）、血管内皮生长因子（vascular endothelial growth factor，VEGF）和畸胎瘤源性细胞生长因子（PC cell-derived growth factor，PCDGF）都是机体内重要的细胞因子，Ang-2 是近年来发现新型的与肿瘤血管生成相关一种细胞因子，促进新生血管的形成[4];VEGF是血管生长调节因子，可以调控肿瘤细胞组织周围血管的增生过程[5];PCDGF 是一种分泌型糖蛋白，具有促进细胞增殖、发育的能力[6]。已有研究证实Ang-2及VEGF、PCDGF在NSCLC组织、血清中异常表达，然而其表达与肺癌细胞增殖、侵袭、转移等临床病理参数之间的关系仍有待探究，对寻找NSCLC早期诊断及治疗的新靶点有重要指导意义。本研究分析了48例非小细胞肺癌患者血Ang-2、VEGF、PCDGF 、CEA、SCC水平，及其与肺癌的分期及病理类型相关性，拟探寻一组对非小细胞肺癌诊断及预后最佳的肿瘤标记物。

1资料与方法

1.1一般资料  收集2017年9月～2018年4月就诊于安医大附属巢湖医院呼吸内科，经病理确诊的48例原发性非小细胞肺癌患者，研究标本采集前均未抗肿瘤治疗。本研究经安医大附属巢湖医院伦理委员会同意进行，患者在首次就诊时均签署书面知情同意书。患者中男37例，女11例，年龄47～87岁，平均年龄67.63岁，鳞癌29例，腺癌19例。临床分期依据国际癌症控制联盟和国际肺癌研究协会于2017年的《国际肺癌分期指南》第八版进行评估。

1.2方法

1.2.1资料收集  收集患者临床病理资料，包括年龄、性别、吸烟、病理、分期、转移程度。

1.2.2指标检测  Ang-2、VEGF、 PCDGF含量检测采取固相夹心ELISA法，具体步骤按照试剂盒说明书进行，用酶标仪在450 nm波长测量各孔的吸光度（A）值，通过绘制标准曲线计算出样品中Ang-2、VEGF、 PCDGF的实际浓度。CEA、SCC采用罗氏Elecsys2010免疫测定分析仪并用电化学发光免疫测定试剂，按照检测系统操作步骤执行。

1.3统计学分析  用SPSS 19.0软件进行数据分析，对不符合正态分布的数据以M（P25，P75）表示，两组间比较采用非参数检验，多组间比较用Kruskal-Wallis H检验分析。诊断效能评价指标用ROC曲线分析，以敏感度、特异度、正确率表示。以P<0.05为差异有统计学意义，P<0.01表示统计学意义显著。

2结果

2.1血清Ang-2、VEGF、PCDGF含量与非小细胞肺癌临床病理参数的关系  鳞癌患者中血管生成素2高于腺癌患者，差异有统计学意义（P<0.05），但与年龄、吸烟、性别均无关;在非小细胞肺癌患者中对于年龄≤60岁的患者中的PCDGF水平明显低于年龄>60岁的患者（P<0.01）;局部转移的患者血清VEGF含量高于远处转移患者（Z=2.070，P<0.05），见表1。

2.2 Ang-2、PCDGF、VEGF、SCC在鳞癌诊断中的价值分析  Ang-2、PCDGF、SCC对于鳞癌有一定诊断价值，但VEGF在鳞癌中的诊断价值不高;Ang-2、PCDGF、VEGF、SCC对应的ROC曲线下面积 分别为0.68（95%CI：0.53，0.83），0.62（95%CI：0.46，0.79），0.46（95%CI：0.28，0.63），0.77（95%CI：0.63，0.91）。Ang-2、PCDGF、VEGF、SCC的cutoff 值分别为559.52 pg/ml，553.12 μg/ml，234.17 μg/ml，1.76 μg/ml。Ang-2+PCDGF灵敏度和正确率均为最高，Ang-2在单个指标中的正确率低于SCC，高于PCDGF和VEGF，见表2。

2.3 CEA对腺癌的诊断效能比较  CEA对应的ROC曲线下面积为0.73（95%CI：0.57，0.88），cutoff 值为3.38 ng/ml，灵敏度为0.84，特异度为0.59，正确率为68.90%。

3讨论

随着对血清学肿瘤标志物的深入研究，Ang-2、PCDGF及VEGF及受到越来越多的研究者们的广泛关注。本研究中，非小细胞肺癌患者外周血清中Ang-2、PCDGF及VEGF的表达水平与非小细胞肺癌临床病理参数具有相关性，且联合检测肺鳞癌的灵敏度、特异度以及准确性均较高，说明此3项指标对非小细胞肺癌患者具有重要的临床价值。

PCDGF又称上皮素-颗粒素前体，是生长调节因子家族中的成员之一，具有很强的致癌作用，通过参与体内多种信号通路在肿瘤细胞的粘附、增殖、血管形成和细胞外基质降解中都发挥重要作用，从而促进肿瘤细胞的浸润和转移[7]。在正常机体中，PCDGF主要促进血管内皮细胞的增殖和创伤口愈合等，表达水平较低，但其在肿瘤患者体内为高表达水平[8]。PCDGF在恶性肿瘤性疾病包括肺癌中异常表达，参与了肺癌的侵袭、转移以及血管生成过程[9]。赵玉泽等[10]报道，PCDGF在老年肺鳞癌中的表达量较其余各组比较显著高表达，且阳性表达率在不典型增生组、鳞状上皮化生组、炎症对照组的表达依次下降。本研究中年龄≤60岁的NSCLC 患者其PCDGF水平低于>60岁的患者（P<0.01），在鳞癌中ROC曲线下面积为0.62（95%CI：0.46，0.79），单独诊断鳞癌的特异度为63.16%，灵敏度62.07%，正确率62.50%，对肺鳞癌的诊断有一定的临床价值，联合血管生成素检测可以避免单项检测的漏诊率。这些研究结果都表明PCDGF在肿瘤形成中发挥重要的调控作用，或许可作为肺癌诊断一个新的血清学辅助检测指标。

目前，VEGF是一種重要的促血管内皮生长的细胞因子，其不仅能够促进内皮细胞增殖，还可以促进血管渗漏。近年研究发现，PCDGF可以上调VEGF的表达，因此PCDGF可能作为上游蛋白通过促进VEGF的表达调节血管生成[11]。有研究发现[12]与肺部良性病变及健康者比较，肺癌患者VEGF表达量显著升高，且肺癌临床TNM分期越高，其表达量越高;淋巴结转移患者的表达量高于未转移者，提示VEGF或许在肺癌患者早期诊断及预后判断中发挥重要作用。体外动物模型实验表明[13]，通过抑制肿瘤中VEGF的表达，能够明显抑制肺癌癌细胞组织血管形成、减少肿瘤体积和提高裸鼠的生存时间。此研究结果与既往报道基本相符合。本研究中肺癌局部转移的患者VEGF含量高于远处转移的肺癌患者，VEGF对于判断非小细胞肺癌预后有一定价值。在鳞癌中ROC曲线下面积为0.46（95%CI：0.28，0.63），单独诊断鳞癌的特异度为42.11%，灵敏度79.31%，正确率64.59%。VEGF单独诊断肺鳞癌的准确率不是很高，联合PCDGF及血管生成素检测显著提高了诊断肺鳞癌的准确率、特异度及灵敏度。

Ang-2是一种与肿瘤血管生成相关的细胞因子，能特异性地与内皮细胞特异的酪氨酸激酶受体（Tie-2）相结合从而促进新血管的生成[14]。目前研究发现，Ang-2和VEGF相互协同作用共同调节肿瘤组织周围新生血管的生成，Ang-2可以上调VEGF的表达，而VEGF亦可反过来影响Ang-2的分泌[15]。2017年Xu Y等[16]报道的一项荟萃分析纳入了1911例肺癌病例，结果显示血清高Ang-2水平与较晚的临床分期（Ⅲ期、Ⅳ期）、淋巴结转移有关，而与组织学类型、年龄、吸烟、性别均无关，并且高表达的患者预后显著较差，这表明Ang-2在肿瘤侵袭、淋巴性转移方面起到重要作用，Ang-2的表达水平或许可作为肺癌预后预测因子。本研究结果显示肺鳞癌患者中血管生成素显著高于腺癌患者（P<0.05）。在鳞癌中ROC曲线下面积为0.68（95%CI：0.53，0.83），单独诊断鳞癌的特异度为73.68%，灵敏度65.52，正确率68.75%，联合PCDGF检测可以减少单项检测的漏诊率。

本研究中由ROC曲线分析得出PCDGF、VEGF和Ang-2三项指标联合检测，对肺鳞癌诊断的敏感度和正确率分别为82.76%和72.92%，显著高于任一单项指标的敏感度和正确率。因此，此三项指标联合检测可以弥补单项指标的漏诊率。ROC曲线分析得出CEA对于肺腺癌的诊断，其 AUC为0.73（95%CI：0.57，0.88），灵敏度为0.84，特异度为0.59，正确率为68.90%。CEA对肺腺癌诊断的正确性中等，具有一定的临床价值。

综上所述，PCDGF、VEGF、Ang-2作为新发现的生物分子，在肺癌中与多项临床病理参数密切相关，提示PCDGF可能通过调控VEGF、Ang-2的表达而促进肿瘤细胞新生血管生成，从而在NSCLC的发生发展及侵袭转移中发挥重要作用。故联合检测PCDGF、VEGF、Ang-2的表达对NSCLC的早期诊断、病情的进展评估提供依据。本研究尚存不足之处：样本量偏小，后续工作需要进一步扩大样本量。PCDGF、VEGF、Ang-2之间通过怎样的生物信号通路相互作用参与NSCLC的发生发展、侵袭转移过程仍需要更加深入的探究。但是，PCDGF、VEGF、Ang-2的联合检测对肺鳞癌的早期诊断、病情进展的评估仍具有一定的临床价值。

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收稿日期：2019-5-23;修回日期：2019-6-3

编辑/肖婷婷