HSP90α、CEA、CA-199在大肠癌分期中的诊断价值及其临床意义

柳成将 路 亮 金 水 杨 宁 李仁君

大肠癌包括结肠癌和直肠癌，是消化系统常见的恶性肿瘤之一，在我国，大肠癌每年的发病率及病死率都呈上升的趋势[1]。研究表明早期大肠癌的术后5 年生存率达到了95%以上，因此，对于早期大肠癌的准确预测和早期手术可以明显降低大肠癌的病死率，改善预后[2]。但目前我国的早期大肠癌的检出率却仅仅只有5%，根本原因在于缺乏有效的检出手段。

大肠癌的筛查方法主要包括粪便隐血、肿瘤标志物的筛查、肠镜检查等方法，粪便隐血的特异性较差。肠镜为有创检查，价格昂贵，依从性差，一般无症状人群难以接受，不能大规模普及，而肿瘤标志物的价格相对便宜，检查也很方便，患者较容易接受。目前用于大肠癌筛查的肿瘤标志物较多，如CEA、CA-199 是大肠癌筛查中最常用的肿瘤标志物，但敏感性不高。有研究指出，联合检测可以提高预测的准确性[3]，寻找敏感性及特异性更佳及最优的检测组合的肿瘤标志物，对于大肠癌的早发现，早诊断，早治疗具有非常重要的临床意义[4～5]。本次研究旨在探讨新型肿瘤标志物HSP90α的诊断价值及联合检测HSP90α、CEA、CA-199 在大肠癌患者各分期中的表达情况。

1 资料与方法

1.1 一般资料 收集2015 年6 月-2018 年6 月初次在安徽医科大学附属巢湖医院消化内科、胃肠外科以及门诊就诊并术后病理确诊为大肠癌的150 例患者，以及大肠高危性腺瘤的108 例患者，年龄在50 岁以上作为研究对象。大肠高危性腺瘤的诊断应具备以下条件之一：数目在3 个或以上；腺瘤的直径≥1 cm；绒毛状腺瘤或高级别瘤变。另选取同期在我院的体检者共75 例。所有入组对象均资料完整，入院均检测HSP90α、CEA、CA-199的浓度。排除标准：合并有其他肿瘤的患者；缺乏病理诊断；资料不全者；已经接受过治疗的患者。此项研究由安徽医科大学附属巢湖医院伦理委员会批准。

1.2 研究方法

1.2.1 资料收集 信息包括患者的年龄、性别、地区、既往病史、发病时间、实验室检查、影像学检查、肠镜检查和术后病理诊断等资料。

1.2.2 测定方法 收集检测样本，HSP90α、CEA、CA-199 的浓度均由我院核医学科测量,热休克蛋白90α定量检测试剂盒购自烟台普罗吉生物科技发展有限公司，采用酶联免疫法（Elisa）测量，而CEA、CA199 的测量数据，采用电化学发光法测量，癌胚抗原定量检测试剂盒与糖类抗原19-9 测定试剂盒均购自上海罗氏诊断产品有限公司。HSP90α＞82 ng/mL为阳性，CEA＞5 ng/mL为阳性，CA-199 ＞37 ng/mL为阳性。将测量数据统一汇总至Excel表格中。

1.2.3 分组 将收集资料分为大肠高危性腺瘤组、早期大肠癌组、进展期大肠癌组和体检组，分别比较四组患者血清中HSP90α、CEA、CA-199的浓度。以及单独或联合检测时的敏感性，以及HSP90α与CEA、CA-199 联合检测对于早期大肠癌的预测效能，使用受试者工作特征曲线分析（ROC曲线）进行统计。

1.3 统计学方法 数据采用SPSS24.0 统计学软件进行统计分析，计量资料采用表示，采用LSD-t检验进行比较；计数资料采用例数（%）比较，采用配对卡方检验（χ2）比较单独及联合检测方法对大肠癌分期和大肠高危性腺瘤的诊断价值；采用受试者工作特征曲线（ROC）比较对早期大肠癌的诊断效能。将性别、年龄、病理分型、淋巴结是否转移以及TNM分期多因素Logistic回归分析三项肿瘤标志物的表达情况，P＜0.05 为差异具有统计学意义。

2 结 果

2.1 四组患者血清中HSP90α、CEA、CA199 的浓度比较 进展期大肠癌患者血清中HSP90α、CEA、CA199 的浓度明显高于正常体检者的浓度，也明显高于大肠高危性腺瘤及早期大肠癌患者的浓度，且具有统计学意义。大肠高危腺瘤和早期大肠癌患者的浓度总体高于体检者的浓度，但差异并无统计学意义（P＞0.05）。早期大肠癌患者浓度高于大肠高危性腺瘤，差异无进展期大肠癌明显。见表1。

表1 四组患者血清中HSP90α、CEA、CA199的浓度比较

表1 四组患者血清中HSP90α、CEA、CA199的浓度比较

注：*表示与健康对照组比较，P＜0.05。

组别 n HSP90α CEA CA199健康对照组 75 45.84±16.46 2.55±1.98 11.65±7.25大肠高危性腺瘤组 108 59.61±21.93 4.61±5.07 17.95±14.57早期大肠癌组 30 62.69±25.40 5.78±6.24 22.57±17.06进展期大肠癌组 120 129.4±120.6*59.58±71.86*210.45±164.92*

2.2 HSP90α及CEA、CA199 联合检测对诊断大肠高危腺瘤及早期大肠癌等敏感性分析 三项肿瘤标志物联合检测时对早期大肠癌、进展期大肠癌的阳性率均高于健康对照组，差异具有统计学意义（P＜0.05），大肠高危性腺瘤性疾病的阳性率与正常人相比阳性率升高不明显，差异无统计学意义（P＞0.05），均显著低于在大肠癌的表达。见表2。

表2 HSP90α及CEA、CA199联合检测对诊断大肠高危腺瘤及早期大肠癌等敏感性分析 例(%)

2.3 HSP90α及CEA、CA199 联合检测对早期大肠癌的诊断效能的比较 通过进一步的统计，设计受试者工作特征曲线分析（ROC曲线），见图1，计算曲线下面积比较各种检测手段对于早期大肠癌的诊断效能。使用SPSS软件计算出ROC曲线。根据表3 结果可见，联合检测HSP90α+CEA+CA199筛查方法对区域面积最大，且靠近左上角，对于早期大肠癌的诊断效能最好，而根据统计结果得出单独检测时HSP90α最好，ROC曲线面积大于CEA和CA199，证明了HSP90α对于早期大肠癌的筛查优于CEA和CA199。这也进一步验证了联合检测对于早期大肠癌病变的诊断效能最优。

表3 ROC曲线下的面积

图1 HSP90α及CEA、CA199联合检测的ROC曲线图

2.4 影响HSP90α、CEA、CA199 在150 例大肠癌患者中阳性表达的多因素分析 根据结果可得出，HSP90α、CEA、CA199 的表达差异与年龄、性别无明显的相关性（P＞0.05），而与病理分化程度越低，发生淋巴结转移及TNM分期越晚都一定的相关性，差异具有统计学意义（P＜0.05）。见表4。

表4 影响HSP90α、CEA、CA199在150例大肠癌患者中阳性表达的多因素分析

3 讨 论

大肠癌目前主要的筛查方法还是肿瘤标志物及粪便隐血等，而结肠镜+病理是诊断的金标准，但患者整体依从性不高。但单个肿瘤标志物对于早期大肠癌的诊断敏感性及特异性均欠佳。目前用于大肠癌早期筛查的肿瘤标志物主要包括CEA、CA50、CA-242、CA-199、HSP等，单独检测时的敏感性及特异性都不高，联合检测可提高检测的敏感性，因此寻找能够有效诊断大肠癌的肿瘤标志物是研究的重点。

3.1 HSP90α HSP90α作为一种新型的肿瘤标志物，既往研究表明在肺癌与肝癌中均有很好的表达，而在大肠癌中的表达情况的研究资料却很少。而据Kasanga M等[6]人在研究中指出，血清热休克蛋白90α在早期结直肠癌中有很好的诊断价值，主要研究的是Ⅰ期+Ⅱ期（TNM分期），并且研究结果显示差异具有统计学意义（P＜0.05）。且他研究的不足之处在于收集的样本为Ⅰ～Ⅱ期（TNM分期）共40 个样本，样本量偏少，且没有单独Ⅰ期的样本详细数据，而本次研究的不同之处在于主要采取的是针对Ⅰ期30 例早期大肠癌以及大肠高危性腺瘤联合检测HSP90α、CEA、CA199 的诊断价值。热休克蛋白质是一类分子伴侣蛋白质，负责分子正常的折叠，成熟和细胞内转运各种癌症相关蛋白，包括ErbB2 / Neu、Bcr-Abl、Raf-1、Akt、HIF-1 和p53[6]。当人体内的细胞受到某些不利因素刺激时，就会高诱导表达，参与保护生命活动，发挥细胞的保护作用。热休克蛋白最早在1962年有人发现，将果蝇的培养温度从25 ℃提高到30 ℃，30 分钟后可在多丝染色体上看到蓬松现象，提示这些区带的转录加强并可能有某些蛋白质的合成增加。血浆HSP90α是一个全新的肿瘤标志物，而且很容易分泌到细胞外，进入到血液中，肿瘤的恶性程度与血液中的HSP90α的浓度呈正相关[7]。另有研究结果表明[8]，患者血清HSP90α浓度与肿瘤的分化程度以及病理类型有一定的相关性，与局部的侵袭以及淋巴结转移有关。而本研究的结果也提示HSP90α在正常体检者和大肠癌患者中的表达存在较大的差异。

3.2 CEA CEA是目前临床应用最普遍，也是作为大肠癌筛查特异性较高的肿瘤标志物，对于筛查大肠癌起到了重要的作用，但单独检测时敏感性及特异性均欠佳，对早期大肠癌的诊断价值不高，对Ⅲ-IV期大肠癌的阳性表达率较高。有研究表明，单独检测CEA对于大肠癌诊断的敏感性在50%左右[9]，与本研究CEA在大肠癌中表达敏感性（57.3%）基本相符合。而CEA在早期大肠癌中的阳性表达更低，大部分患者检测为阴性，单独检测对于大肠癌的诊断意义不大。

3.3 CA199 CA199 是一种黏蛋白型糖类蛋白肿瘤标志物，主要分布在胰腺，肠道及胆囊等地方，临床常作为消化道肿瘤筛查的肿瘤标志物，此次收集资料中统计CA199 在大肠癌中表达的敏感性较低，与文献报道[10]有差异，可能由于统计量偏少造成。

本研究主要评估了三种肿瘤标志物HSP90α、CEA、CA199 在体检组、大肠高危性腺瘤、早期大肠癌及进展期大肠癌患者中的表达情况，HSP90α在早期大肠癌以及进展期大肠癌中显示出较高的敏感性和特异性，且优于CEA及CA199。而在大肠高危性腺瘤中的阳性率并不高。HSP90α在早期大肠癌ROC曲线下的面积也高于CEA和CA199，可认为HSP90α单独检测时的诊断效力优于CEA和CA199。之前报道认为，HSP90α在术前和术后的检测值呈现显著变化，且术后7天复查指标降至正常范围内[5]，证明HSP90α对大肠癌术后动态监测具有一定的价值。本次研究存在的不足之处在于早期大肠癌的数据较少，本研究结合了安医大一附院和安医大附属巢湖医院的数据，经过筛选后只有30 例病例符合要求。虽联合检测阳性表达率达到了56.7%，但因数据较少，可能真正的阳性率并不一定准确。早期大肠癌较难发现在于其发病较为隐匿，难以诊断，大多确诊的患者大部分有明显的临床症状，需要结合结肠镜+病理确诊。而且很多的大肠息肉患者术后病理诊断只有很少一部分是癌性息肉，局限于黏膜下层，大部分属于腺瘤，这部分患者肿瘤标志物阳性率不高，与体检组阳性率相比无明显升高。因此可以认为肿瘤标志物对大肠腺瘤的筛查无明显的诊断意义。建议有大肠癌发生高危因素的患者定期肠镜随访。

综上所述，HSP90α、CEA、CA199 在早期大肠癌中阳性表达率高于正常的体检者。且进展期大肠癌患者的阳性表达率高于早期大肠癌患者。三者的敏感性与大肠癌的分化程度、淋巴结转移及临床分期都有一定的相关性。单独检测时HSP90α检测较CEA，CA199 的阳性率更高，但联合检测优于单项检测，可联合CEA、CA199 用于大肠癌在高危人群中的筛查，检测有一项或多项阳性的有多种高危因素的人群，建议肠镜进一步明确诊断。这三项肿瘤标志物可作为大肠癌预后的动态检测指标[11]，并且各肿瘤标志物的表达与临床分期之间的关系密切，对于大肠癌的诊断提供一定的依据，动态检测数值越高，提示恶性程度可能越高。从研究中可以得出HSP90α在大肠癌中的阳性表达率较高，且特异性较好，可用于临床上大肠癌的筛查以及预后的评估，值得推广。