索氏抽提法测美国大豆粗脂肪含量的影响因素分析

楚屹然　郭静　卢美娟

摘 要：本文以GB 5009.6-2016《食品安全国家标准 食品中脂肪的测定》第一法索氏抽提法为依据，以美国大豆为研究对象，在测定大豆粗脂肪时，对标准中变量条件所造成的检测结果差异进行对比分析。结果表明，在其他条件相同时，大豆粉碎细度越小，其粗脂肪含量测得值越高;抽提时间越长，其粗脂肪含量测得值越高;用无水乙醚作抽提剂比用石油醚作抽提剂，测得的粗脂肪含量值高。用此国家标准方法锝出的大豆粗脂肪检测结果应备注标准中未具体说明的试样粉碎细度、抽提试剂、抽提时间等具体检测条件。

关键词：美国大豆;粗脂肪;索氏抽提

Abstract：Based on the first method traditional soxhlet extraction of GB 5009.6-2016 National food safety standards The determination of fat in food， Soybeans in the United States as the research object， In the determination of soybean crude fat， can be caused by the variable condition of standard test results differences were analyzed. The results show that， other conditions being the same： soybean crushing fineness is smaller， the higher crude fat content measured values; The longer the extraction time， the crude fat content measured value is higher; With anhydrous diethyl ether as extraction agent than using petroleum ether as extraction agent， the crude fat content of measured value is high. With the national standard method quoted soybean crude fat test results should note in the standard does not specify the sample grinding fineness， extraction reagent， extraction time and other specific testing conditions.

Key words：U.S. soybean; Crude fat; Soxhlet extraction

中圖分类号：TS207.3

粗脂肪含量是油料作物的重要质量指标，而我国进口美国的大豆几乎全部用来生产大豆油、豆粕及其他副产品，因此准确测定大豆粗脂肪含量，对计算大豆出油率、以质论价和评定车间生产工艺效果都有非常重要的意义。

大豆粗脂肪含量的测定方法有多种，但通常采用国家标准GB 5009.6-2016《食品安全国家标准 食品中脂肪的测定》[1]第一法索氏抽提法，也是仲裁方法，该方法具有实验成本低、操作简单、重现性好、结果准确等优点。但该方法也存在明显的缺点：①检验时间长，仅抽提这一步就需要6 h以上。②测定结果影响因素多，如抽提试剂、抽提时间、粉碎细度、抽提样含水量、抽提液回流速度等[2-6]，因此在检测时应对上述影响因素进行详细规定。国家标准GB 5009.6-2016对抽提试剂的规定是在无水乙醚和石油醚中自选，抽提时间6～10 h，对试样粒度未做说明，这就存在由于实验人员操作条件的不同，给检验结果造成一定影响。本文以国家标准索氏抽提方法为基础，用不同的抽提试剂和抽提时间，对不同粉碎细度的美国大豆样品进行测定，分析其粉碎细度、抽提试剂、抽提时间对抽提效果的影响，探讨大豆样品在测定粗脂肪时更加准确可靠的样品制备和抽提方法，填补国家标准方法在具体针对大豆粗脂肪检测中的不足之处有重要意义。

1 材料与方法

1.1 材料与仪器

（1）材料。美湾大豆、美西大豆;无水乙醚（分析纯）;石油醚（分析纯，沸程30～60 ℃）。

（2）仪器。JFSD-100植物粉碎磨，上海嘉定粮油仪器有限公司生产;FW100高速万能粉碎机，天津市泰斯特仪器有限公司生产;ZM200莱弛磨，德国Retsch公司生产;玻璃索氏抽提装置;DHG-9145A电热鼓风干燥箱，上海一恒科学仪器有限公司生产;AL204分析天平（感量0.1 mg），梅特勒托利多生产;DZKW-4恒温水浴锅，北京中兴伟业仪器有限公司生产。

1.2 试验方法

1.2.1 国家标准法

大豆粗脂肪的测定方法按照GB 5009.6-2016执行，扦样、分样按照GB 5491-1985执行。

1.2.2 样品制备

①抽提瓶在105 ℃烘箱中烘至恒重，取出，置于干燥器中冷却后称量，精确至0.000 1 g。②取去除杂质的美湾大豆和美西大豆样品各100 g，使用莱驰磨制样，样品95%以上通过60目筛网，装入样品袋中备用。取去除杂质的美湾大豆和美西大豆样品各100 g，使用植物磨+万能磨粉碎的方式制样（植物磨加装20目筛网粉碎后，再用万能磨粉碎3次，每次粉碎5 s），样品75.6%以上通过40目筛网，装入样品袋中备用。2种粉碎方式分别粉碎的是混合均匀的同一样品，在同一条件下进行试验。③取备用样品，用滤纸桶（滤纸筒底部塞一层脱脂棉）称取试样2～5 g，精确至0.000 1 g（滤纸筒上部塞一层脱脂棉），做好编号。

1.2.3 样品抽提与烘干

①将滤纸筒放入索氏抽提器的抽提筒内，连接已干燥至恒重的接收瓶，由抽提器冷凝管上端加入无水乙醚或石油醚至瓶内容积的2/3处，于水浴上加热，使无水乙醚或石油醚不断回流抽提。提取结束时，抽提至抽提管内的提取液用磨砂玻璃棒检查无油斑表明提取完毕。②取下接收瓶，回收无水乙醚或石油醚，待接收瓶内溶剂剩余1～2 mL时在水浴上蒸干，用脱脂棉蘸无水乙醚擦净抽提瓶外部，再于（100±5）℃干燥1 h，放干燥器内冷却0.5 h后称量。重复以上操作直至恒重（2次称量的差不超过2 mg），抽提瓶增加的质量即为粗脂肪的质量。③抽提过程用不同的抽提试剂和抽提时间，对不同粉碎细度的美国大豆样品进行测定。抽提试剂分别用无水乙醚和石油醚，抽提时间分别做抽提5、8 h和10 h，粉碎方式分别用莱池磨制样和植物磨+万能磨粉碎的方式制样（见样品制备）。3个变量进行组合，完成抽提试验。

1.3 粗脂肪湿基含量

粗脂肪湿基含量计算公式：

式（1）中，X-湿基粗脂肪含量，单位%;m2-干燥后抽提物与抽提瓶的质量，单位g;m1-抽提瓶的质量，单位g;m-试样的质量，单位g。

1.4 实验数据处理方法

所有实验重复2次，如2次实验结果之差不超过0.4%，则取2次测定的算术平均值为测定结果。如果2次实验结果之差超過0.4%，则另取2份试样进行测定。如测定结果仍超过0.4%，而前两次测定平均值与后两次测定值之差不超过0.4%，则取4次测定的平均值作为测定结果。

2 结果与分析

2.1 同一方法同一样品不同检测机构的粗脂肪检测结果分析

将一份美西大豆实验样品，混合均匀后，用标准分样器均匀分成6份同时寄往6家不同的第三方检测机构，这6家检测机构的检测依据都是GB 5009.6-2016《食品安全国家标准 食品中脂肪的测定》第一法索氏抽提法，给出的检测结果见表1。为了考察检测结果的一致性，本文将A机构检测结果与其他机构检测结果之间的相对相差进行了计算，计算结果见表1。

2.2 不同条件下大豆粗脂肪含量检测结果对比

选取两个不同轮船的美西大豆和美湾大豆作为试验样品，用不同的粉碎细度、抽提试剂和抽提时间，对不同粉碎细度的美西大豆样品进行测定，结果见表2和表3。在GB 5009.6-2016《食品安全国家标准 食品中脂肪的测定》第一法索氏抽提法7精密度中明确说明，在重复性条件下获得的2次独立测定结果的绝对差值不得超过算术平均值的10%，也就是方法的相对相差不超过10%，但通过表1可知，A第三方检测机构的粗脂肪检测结果与D、E、F第三方检测机构的检测结果的相对相差已经超过方法的正常允许范围，尤其是A机构与F机构，其结果相对相差超出了允许值的50%，说明国标方法在大豆粗脂肪检测的实际应用中存在很大的操作条件选取误差，在用此国标方法报出的大豆粗脂肪检测结果中应备注标准中未定量规定但影响检测结果的条件。

由表2、表3可知，其他条件相同时，大豆粉碎细度越小，其粗脂肪含量测得值越高;其他条件相同时，用无水乙醚进行抽提比用石油醚进行抽提，测得的粗脂肪含量更高;其他条件相同时，抽提时间越长，其粗脂肪含量测得值越高。因此，在使用GB 5009.6-2016《食品安全国家标准 食品中脂肪的测定》第一法索氏抽提法进行大豆粗脂肪测定时，测定结果受试样粉碎细度、抽提时间、抽提试剂的影响，在给出结果时，应标注上述条件。

3 结论

采用GB 5009.6-2016《食品安全国家标准 食品中脂肪的测定》第一法索氏抽提法进行大豆粗脂肪测定时，易受试样粉碎细度、抽提时间和抽提试剂的影响，造成不同实验室之间测定结果差异明显。试验表明，大豆粉碎细度越小，抽提时间越长，其粗脂肪含量测得越高;用无水乙醚进行抽提比用石油醚进行抽提，测得粗脂肪含量更高。在使用上述国家标准方法给出结果时，应标注试样的粉碎细度、抽提时间、抽提试剂等条件。

参考文献：

[1]国家卫生和计划生育委员会，国家食品药品监督管理总局.GB 5009.6-2016 食品安全国家标准 食品中脂肪的测定[S].北京：中国标准出版社，2016.

[2]万延岩，刘 建，高 爽.大豆含水量和粉碎细度对索氏抽提法测粗脂肪含量的影响[J].口岸卫生控制，2011，16（2）：31-33.

[3]苗霖兴，苗 佳.大豆粗脂肪含量测定中影响因素的分析[J].粮食科技与经济，2011，36（3）：42，47.

[4]张愉佳，张 伟，佟庆龙.进口大豆粉碎细度对索氏抽提法测粗脂肪含量的影响[J].粮食储藏，2017，46（1）：52-53.

[5]山 瑛.索氏抽提法检测脂肪应注意的问题[J].中国卫生检验杂志，2007（6）：1138.

[6]吴礼娥.两种大豆中粗脂肪测定方法的对比[J].农业科技与信息，2018（2）：46-47.