血清INF-γ、sIL-2R、IL-12在原发性肝癌中的表达及临床意义

张高明，杨慧林，王 智，阎 雄，代鸿华△

(1.四川省邻水县中医医院外科，四川广安 638500；2.重庆医科大学附属第一医院綦江医院肝胆外科，重庆 401420)

原发性肝癌为中国常见恶性肿瘤之一，以肝区疼痛、消化道反应及肝大为主要临床表现，具有恶性程度高、预后差、病情进展快等特点，因此尽早诊治是改善此类患者生存质量的重要方式[1]。目前甲胎蛋白是临床上诊治原发性肝癌的最常用肿瘤标志物，但其假阴性及假阳性结果较高，诊断及筛查价值并不高[2]。相关研究报道，细胞因子网络和受体之间的调节失常与免疫性病变、肿瘤发生相关[3]。干扰素-γ(IFN-γ)、可溶性白细胞介素-2受体(sIL-2R)及白介素-12(IL-12)为多功能细胞因子，在抗肿瘤免疫及炎性反应中有重要作用。近年来有研究表明，原发性肝癌患者血清中INF-γ、sIL-2R、IL-12可能参与或者诱导肝内炎性反应，导致肝细胞损伤，从而引起并加剧肝细胞坏死，最终导致肝组织坏死及纤维化[4-5]。但目前临床上缺乏以上指标联合检测的报道，本研究旨在分析血清INF-γ、sIL-2R、IL-12在原发性肝癌中的价值，为此类疾病的诊断及治疗提供理论依据。

1 资料与方法

1.1一般资料 选择重庆市綦江区人民医院2015年4月至2017年10月收治的73例原发性肝癌患者，入选标准[6]：(1)均根据临床病史、症状、实验室指标、影像学检查及病理学检查确诊为原发性肝癌；(2)采集血液前无免疫抑制剂应用史，近期无病毒、细菌感染史；(3)心、脑、肾等脏器无明显异常。排除标准：(1)活动性肝病、转移性肝癌；(2)严重创伤、妊娠或者哺乳阶段。73例原发性肝癌患者作为原发性肝癌组，男41例，女32例，年龄32～73岁，平均(56.84±7.69)岁。同期选择该院收治的58例良性肝病患者作为良性肝病组，肝硬化26例、慢性乙型肝炎20例、病毒性肝炎12例，男35例，女23例，年龄29～72岁，平均(57.39±6.11)岁。并选择本院健康体检者46例作为健康对照组，男26例，女20例，年龄30～71岁，平均(56.99±8.05)岁。3组年龄、性别等资料比较均无统计学意义(P>0.05)。本研究患者及家属均签署知情同意书，且通过医院伦理委员会批准。

1.2方法 Ⅰa、Ⅰb、Ⅱa期原发性肝癌患者均接受肝癌根治性切除术治疗；Ⅱb期及Ⅲa期原发性肝癌患者，肿瘤数目>3枚，肿瘤局限在同侧半肝或者同一段者，予以手术切除，范围以外的病灶术中接受射频消融处理；合并分支癌栓或者门静脉主干，肿瘤局限在半肝内，预期术中癌栓能够取净或者完整切除，予以手术切除肿瘤并与门静脉取栓，术后接受经导管动脉化学栓塞治疗。记录以上患者1年内存活情况。采集原发性肝癌患者手术前1 d及手术后7 d、良性肝病组及健康对照组入院时空腹外周静脉血，采用 TD5A-WS 台式低速离心机(购自中国山东济南福的机械有限公司)3 000 r/min离心15 min，将上清液保存在-20 ℃低温箱中待检。采用DG5033B型全自动酶联免疫分析仪(购自中国南京普朗生物技术有限公司)检测血清INF-γ、sIL-2R、IL-12水平。

2 结 果

2.1各组血清INF-γ、sIL-2R、IL-12水平比较 原发性肝癌组血清INF-γ、IL-12水平低于良性肝病组，良性肝病组血清INF-γ、IL-12水平低于健康对照组；原发性肝癌组血清sIL-2R水平高于良性肝病组，良性肝病组血清sIL-2R水平高于健康对照组，差异有统计学意义(均P<0.05)。见表1。

表1 各组血清INF-γ、sIL-2R、IL-12水平比较

2.2原发性肝癌不同分期组血清INF-γ、sIL-2R、IL-12水平比较 原发性肝癌患者Ⅲ期组血清INF-γ、IL-12水平低于Ⅱ期组，Ⅱ期组血清INF-γ、IL-12水平低于Ⅰ期组，原发性肝癌患者Ⅲ期组sIL-2R水平高于Ⅱ期组，Ⅱ期组sIL-2R水平高于Ⅰ期组，差异有统计学意义(均P<0.05)。见表2。

表2 原发性肝癌不同分期组血清INF-γ、sIL-2R、IL-12水平比较

2.3原发性肝癌患者治疗前后血清INF-γ、sIL-2R、IL-12水平比较 原发性肝癌患者治疗后血清INF-γ、IL-12水平高于治疗前，sIL-2R水平低于治疗前，差异有统计学意义(均P<0.05)。见表3。

2.4原发性肝癌患者存活组及死亡组血清INF-γ、sIL-2R、IL-12水平比较 原发性肝癌存活组血清INF-γ、IL-12水平高于死亡组，sIL-2R水平低于死亡组，差异有统计学意义(均P<0.05)。见表4。

表3 原发性肝癌患者治疗前后血清INF-γ、sIL-2R、IL-12水平比较

2.5血清INF-γ、sIL-2R、IL-12水平对原发性肝癌预后的预测价值分析 血清INF-γ预测原发性肝癌预后的AUC为0.856；sIL-2R预测原发性肝癌预后的AUC为0.880；IL-12预测原发性肝癌预后的AUC为0.787；指标联合测定预测原发性肝癌预后的AUC为0.931。见表5、图1。

表4 原发性肝癌患者存活组及死亡组血清INF-γ、sIL-2R、IL-12水平比较

表5 血清INF-γ、sIL-2R、IL-12水平对原发性肝癌预后的预测价值分析

注：-表示此项无数据

图1 血清INF-γ、sIL-2R、IL-12水平预测原发性肝癌预后的ROC曲线

3 讨 论

原发性肝癌是严重威胁机体健康的恶性肿瘤之一，其发病隐匿，容易通过淋巴、血液系统转移，发病率及病死率极高[7]。目前临床对恶性肿瘤的筛查程度不高，患者就诊时多为中晚期，已错过最佳诊疗时机。因此非介入性、重复性高、操作简便的检查方法在肿瘤筛查中备受关注，近年来有研究认为，多种血液标志物对恶性肿瘤的诊断有良好的预测价值[8]。

IFN-γ为同源性二聚体糖蛋白，主要来自于T细胞、NK细胞、巨噬细胞及B细胞，其和细胞表面受体结合后能够引起信号传导，发挥生物学功能。IFN-γ通过多种途径起到抗肿瘤作用，可激活巨噬细胞并增强其活性，提高免疫系统对肿瘤的杀伤及清除能力，IFN-γ作为内源性血管生成抑制因子，通过诱导多种物质的表达抑制血管生成，阻断肿瘤血管供应，阻止肿瘤复发及转移[9]。IFN-γ可导致血管内皮细胞凋亡，出现出血性坏死，其浓度下降有利于肿瘤细胞的免疫逃逸，促进肿瘤细胞的修复，降低放化疗等治疗敏感性[10]。相关研究报道，原发性肝癌患者血清IFN-γ浓度显著下降[11]，本研究也支持此观点，且发现随着肿瘤分期的增加患者血清IFN-γ水平相应降低，说明测定机体血清IFN-γ水平有助于原发性肝癌的诊断，客观反映疾病的进展情况。同时本研究显示，治疗后患者血清IFN-γ水平显著高于治疗前，说明肿瘤的存在是抑制IFN-γ分泌的因素。

恶性肿瘤的发生发展和机体免疫功能有良好关系，sIL-2R是来自于活化单核细胞及淋巴细胞的多肽，为机体重要的免疫抑制物质，现已成为肿瘤免疫的监测指标[12]。sIL-2R和IL-2结合后可抑制T细胞增殖，影响机体免疫功能，其水平上升可能是因癌细胞刺激，在恶性肿瘤细胞表层脱落而释放入血，从而增加血清sIL-2R浓度[13]。本研究显示，原发性肝癌患者血清sIL-2R浓度显著高于良性肝病组及健康对照组，Ⅲ组上升最为明显，考虑与原发性肝癌患者随着病情进展，进一步加重肝细胞损伤，导致免疫功能低下有关，经有效治疗后sIL-2R浓度明显下降，死亡患者则浓度上升，和既往报道相似。以上结果说明，sIL-2R水平上升可反映原发性肝癌患病情的进展及恶化。

IL-12是由免疫活性细胞分泌的细胞因子，有正向调节细胞免疫功能，抑制肿瘤生长的作用。IL-12具有多种生物学功能，可增强T细胞毒作用，诱导激活毒T细胞及促进T细胞增殖、活化成NK细胞，提高其细胞毒作用，从而起到抗肿瘤的作用[14]。正常的IL-12水平是维持T细胞功能正常的重要因素，原发性肝癌患者血清IL-12下降可导致免疫调节网络失衡，产生病理性恶性循环，促进原发性肝癌发生、发展[15]。本研究显示，原发性肝癌组、良性肝病组血清IL-12浓度均有程度不一的降低，但原发性肝癌组浓度相对更低，说明血清IL-12浓度能较好反映肝脏病情进展及肝脏损伤程度。治疗后原发性肝癌患者血清IL-12水平有所上升，考虑与肿瘤缓解后可明显减轻肿瘤负荷，从而改善免疫功能，促进IL-12表达。进一步分析发现，INF-γ、sIL-2R、IL-12 AUC均大于0.50，说明INF-γ、sIL-2R、IL-12能够一定程度地预测原发性肝癌患者预后情况。

4 结 论

INF-γ、sIL-2R、IL-12参与原发性肝癌的发生发展，通过检测以上指标能够辅助原发性肝癌诊断，且可作为预后评价的参考指标。