发酵型扶正解毒口服液对保育猪生长性能抗氧化和免疫球蛋白含量的影响

汤法银,史洪涛,乔宏兴,于江旭,边传周

(1.河南牧业经济学院,河南 郑州450046;2.郑州市益生菌发酵中药重点实验室,河南 郑州 450046;3.河南省益生菌生物转化工程技术研究中心,河南 郑州 450046;4.河南省微生物生物转化中药工程实验室,河南 郑州 450046)

保育猪生产是规模化养殖过程中的重要一环,因其生长速度较快,并且受到母源抗体消失、病原微生物感染及应激等多种因素的影响,导致猪只对疾病的易感性较高,容易发病死亡。利用抗生素保健是猪场生产中常用的疾病防控措施,但由于抗生素类药物的滥用,易造成动物肠道菌群失调、产生耐药菌株以及畜产品药物残留超标等问题。某些中药在增强机体免疫力、抗菌、抗病毒、抗氧化和抗应激等方面具有良好的作用[1-2],益生菌如乳酸菌等则在改善肠道菌群平衡、维持肠道功能和结构完整性等方面有显著效果[3-4]。发酵中药则是在中医药理论指导下,结合现代微生物发酵技术,利用益生菌对中药进行生物转化制备的具有安全低毒、高效及适口性较好的中药制剂,具备中药和益生菌的双重作用。扶正解毒散具有清热解毒、扶正驱邪的功效,研究表明,发酵扶正解毒口服液能明显提高肉鸡的生长性能和免疫力,并且效果优于普通扶正解毒口服液[5]。本试验将发酵扶正解毒口服液应用于保育猪,旨在研究其对保育猪生长性能、血清抗氧化能力等的影响,为发酵中药在畜禽养殖业中的推广应用提供科学依据。

1 材料与方法

1.1 试验材料 扶正解毒口服液(生药含量1 g/mL)、发酵型扶正解毒口服液(生药含量1 g/mL,乳酸菌含量为1.0×109CFU/mL)、乳酸菌液(活菌含量为1.0×109CFU/mL)均由河南牧业经济学院发酵中药实验室提供;谷胱甘肽过氧化物酶(GSHPx)、丙二醛(MDA)、过氧化物酶(CAT)、超氧化物歧化酶(SOD)、总抗氧化能力(T-AOC)、IgG 和IgM检测试剂盒,购自南京建成生物工程研究所;超低温冰箱(DW-HL3985),购自中科美菱低温科技股份有限公司;电热恒温培养箱(HH-B11·360-BS-Ⅱ),购自上海跃进医疗器械有限公司;台式离心机(KA-1000),购自上海安亭科学仪器厂;全自动酶标仪(SILFTA),购自美国伯腾仪器有限公司。

1.2 试验动物与分组 采用单因子试验法,依据“胎次相近、品种相同、体重相当、公母各半”的原则,选取断奶仔猪180 头,随机分为4 组,每组3 个重复,每个重复15 头仔猪,分别为空白对照组、试验Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ组。空白对照组仔猪不投喂任何药物或添加剂,试验Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ组仔猪饲料中分别添加扶正解毒口服液、发酵型扶正解毒口服液、乳酸菌液,试验期25 d。

1.3 生长性能指标的测定 试验开始时称量每组仔猪的初重,于试验第25 天早晨空腹称量仔猪的末重,记录每组每天喂料量。计算出各重复仔猪的平均初重、平均末重、平均日采食量、平均日增重、料肉比。平均日采食量=总采食量/试验天数;平均日增重=(末重-初重)/试验天数;料肉比=总采食量/总增重。

1.4 抗氧化及免疫球蛋白指标的测定 于试验第25 天,从每组每个重复随机选3 头仔猪,前腔静脉采血5 mL,分离血清,用于总抗氧化能力(T-AOC)、超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)、谷胱甘肽过氧化酶(GSH-Px)、丙二醛(MDA)、IgG 和IgM 指标的测定。

1.5 数据分析 采用IBM SPSS 22.0 统计软件对数据差异性进行分析,结果以平均值方差来表示,P＜0.05 表示差异显著。

2 结果

2.1 发酵型扶正解毒口服液对保育猪生长性能的影响 结果如表1 所示,试验Ⅱ组平均末重最高,分别比对照组、Ⅰ、Ⅲ组提高了11.35%(P＜0.05)、5.00%(P＞0.05)和8.41%(P＜0.05),试验Ⅲ组与对照组相比差异不显著(P＞0.05)。各试验组平均日增重以Ⅱ组最高,比对照组提高了19.44%(P＜0.05),试验Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ组差异不显著(P＞0.05),试验Ⅰ、Ⅲ组与对照组之间差异不显著(P＞0.05)。各试验组的平均日采食量与对照组相比差异不显著(P＞0.05)。与对照组相比,试验Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ组料肉比分别降低了5.61%(P＞0.05)、14.95%(P＜0.05)和3.88%(P＞0.05),试验Ⅱ组分别比Ⅰ、Ⅲ组降低了9.90%(P＞0.05)和11.65%(P＜0.05)。

2.2 发酵型扶正解毒口服液对保育猪血清抗氧化能力的影响 结果如表2 所示,各试验组T-AOC 以Ⅱ组最高,比对照组、Ⅰ、Ⅲ组分别提高了205.02%、26.08%和103.72%(P＜0.05),试验Ⅲ组与对照组之间差异不显著(P＞0.05)。与对照组相比,试验Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ组的CAT 活力分别提高了30.73%(P＜0.05)、54.62%(P＜0.05)和12.54%(P＞0.05),试验Ⅱ组比试验Ⅰ、Ⅲ组分别提高了18.26%(P＞0.05)和37.40%(P＜0.05);试验Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ组的SOD 活力均显著高于对照组,分别提高了46.23%、49.54%、24.57%(P＜0.05),试验Ⅱ组分别比试验Ⅰ、Ⅲ组提高了2.26%(P＞0.05)和20.05%(P＜0.05);各试验组GSH-Px 活力Ⅱ组最高,分别比对照 组、Ⅰ、Ⅲ组 提 高 了98.02%、32.70%、80.16%(P＜0.05),试验Ⅰ、Ⅲ组分别比对照组提高了49.14%(P＜0.05)和9.91%(P＞0.05)。与对照组相比,试验Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ组MDA 含量分别降低了41.62%(P＜0.05)、50.15%(P＜0.05)和17.49%(P＞0.05),试验Ⅱ组比试验Ⅰ、Ⅲ组分别降低了14.62%(P＞0.05)、39.59%(P＜0.05),试验Ⅰ、Ⅲ组之间差异不显著(P＞0.05)。

表1 发酵型扶正解毒口服液对保育猪生产性能的影响

表2 发酵型扶正解毒口服液对保育猪血清抗氧化指标的影响

2.3 发酵型扶正解毒口服液对保育猪血清免疫球蛋白含量的影响 结果如表3 所示,试验Ⅰ、Ⅱ组IgG 含量均显著高于对照组,分别提高了122.13%和143.51%(P＜0.05),试验Ⅲ组与对照组之间差异不显著(P＞0.05),试验Ⅱ组分别 比Ⅰ、Ⅲ组 提 高 了9.62%(P＞0.05)和128.73%(P＜0.05)。试验Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ组IgM 含量分别比对照组提高了35.10%(P＜0.05)、41.43%(P＜0.05)和7.07%(P＞0.05),试验Ⅰ、Ⅱ组分别比试验Ⅲ组提高了26.18% 和32.09%(P＜0.05),试验Ⅰ组与Ⅱ组之间差异不显著(P＞0.05)。

表3 发酵型扶正解毒口服液对保育猪血清免疫球蛋白的影响

3 讨论

3.1 发酵型扶正解毒口服液能提高保育猪的生产性能 保育阶段是猪只正处于母源抗体迅速衰减而自身免疫系统尚未发育完全的一个转折阶段,此时的猪只生长发育较快,再加上断奶应激以及转群等因素的变化,会对保育猪的生长状况产生较大的影响[6]。在现今整个养殖行业禁抗的大趋势之下,中药具有的多种优势使其逐渐作为一种较好的替抗品被应用于养殖实践中。张婷等[7]研究发现,在保育猪基础日粮中添加0.65%由黄芩、厚朴、黄芪、白芍、白术、山药、陈皮、山楂、六曲等10 余味中药按一定比例配制而成的中药添加剂,与对照组相比,能显著提高保育猪日增重及采食量(P＜0.05),并显著降低料肉比(P＜0.05)。益生菌制剂作为一类高效、无耐药性、无残留、无毒副作用、低成本的绿色饲料添加剂,受到了畜禽养殖行业高度的重视。闻爱友等[8]用不同的益生菌制剂饲喂断奶仔猪,试验结果表明,与对照组相比,乳酸菌制剂组和枯草芽孢杆菌制剂组均显著提高了仔猪日增重、降低了料肉比(P＜0.05),且以二者按照1∶1比例混合在日粮中添加0.1%剂量效果最佳。中药在益生菌的发酵作用下可以产生新的活性成分,能够增加疗效,减少使用剂量,因此发酵中药制剂作为新型饲料添加剂应用于畜禽生产具有广阔的发展前景。史洪涛等[4]研究发现,在肉鸡的基础日粮中添加乳酸菌发酵中药提取液,与对照组及未发酵组相比,发酵中药组肉鸡的平均日采食量和日增重均得到了明显提高(P＜0.05),料肉比显著降低(P＜0.05)。韩战强等[9]报道,在围产期母猪基础日粮中添加生物发酵中药翔福莱(补中益气散),可明显提高仔猪平均日增重和存活率,降低母猪患病率和腹泻率(P＜0.05)。本研究的发酵型扶正解毒口服液能显著提高保育猪生产性能(P＜0.05),并且效果优于未发酵中药组和乳酸菌组,可能是由于发酵型扶正解毒口服液具备了中药的抗病毒、提高免疫力等方面的能力,同时又具备了益生菌改善肠道菌群平衡的功效,使其作用效果得到了提升。

3.2 发酵型扶正解毒口服液提高保育猪血清抗氧化指标 T-AOC(总抗氧化能力)是机体清除活性氧、自由基能力的综合指标,与机体健康程度有着密切的关系,其数值的高低反映了机体抗氧化能力的强弱。CAT(过氧化氢酶)是动物机体内分解氢氧自由基(OH-)的酶,氢氧自由基是一种可以与细胞内多种有机物发生化学反应的活性氧自由基,因此机体内CAT 的含量与细胞内环境的稳定性密切相关;SOD(超氧化物歧化酶)是参与机体清除自由基的重要酶,具有保护机体细胞完整性的作用;GSH-Px(谷胱甘肽过氧化物酶)是参与机体还原反应、清除有害过氧化物的酶,其含量的高低体现了机体清除过氧化物的能力。丙二醛(MDA)是脂质过氧化反应的终产物,具有细胞毒性,能够使组织细胞受损,因而其在机体内含量越高,对机体产生的危害越大。有研究表明,某些中药在提高动物机体的抗氧化能力上有显著的效果,具有良好的替代抗生素的应用前景。徐盛明等[10]用黄芪多糖配合基础日粮饲喂断奶仔猪,试验结果表明,与对照组相比,试验组能显著提高断奶仔猪血清抗氧化能力(P＜0.05);靳录洋等[11]研究发现,对1 日龄雏鸡连续皮下注射7 d 黄芪多糖,能明显提高雏鸡的血清抗氧化能力(P＜0.05)。本试验的发酵型扶正解毒口服液能显著提高保育猪T-AOC 和CAT、SOD、GSH-PX的活力(P＜0.05),并且能显著降低保育猪血清MDA 的含量(P＜0.05)。

3.3 发酵型扶正解毒口服液提高保育猪血清免疫球蛋白水平 血清中的免疫球蛋白含量反映了动物机体免疫力的高低,大量研究表明,中药在提高动物机体免疫力、抑菌抗病毒等方面具有良好的疗效。在本试验中,发酵中药组的血清IgG 含量和IgM 含量与对照组相比均显著升高(P＜0.05),且高于中药组和乳酸菌组。周昭希等[12]研究发现,在肉仔鸡基础日粮中添加菟丝子饲喂42 d 后,能显著提高其血清球蛋白水平(P＜0.05)。王志龙等[13]将大豆异黄酮(SI)和黄芪多糖(APS)按照1∶5的比例混匀后添加到哺乳母猪饲粮中,发现与对照组相比能显著提高血清中IgA、IgG 的含量以及血清总蛋白含量(P＜0.05),且以按照200 mg/kg 的用量添加时效果最好。而本研究的发酵型扶正解毒口服液能显著提高保育猪血清免疫球蛋白水平,且效果优于未发酵扶正解毒口服液和乳酸菌,说明扶正解毒口服液具有提高动物机体免疫力的功效,同时因发酵型扶正解毒口服液富含乳酸菌等活性菌种,促进了保育猪机体的体液免疫反应,从而提高了机体的免疫力。

4 结论

由试验结果可知,发酵型扶正解毒口服液的临床应用效果优于未发酵扶正解毒口服液和乳酸菌,能显著提高保育猪的生产性能、血清免疫指标和血清抗氧化能力,进而改善保育猪健康水平,适合作为饲料添加剂应用于动物生产。