加味白头翁颗粒对鸡大肠杆菌病的疗效观察

李连缺,高红梅,赵 达,刘 明,于合宅

(1.河北工程大学生命科学与食品工程学院,河北 邯郸056000;2.石家庄市兽药监察所,河北 石家庄 050000;3.石家庄江山动物药业有限公司,河北 石家庄 050000;4.河北省望都县动物疫病预防控制中心,河北 保定 071000)

鸡大肠杆菌病是家禽养殖业中常见疾病,普遍存在于我国各个养殖场,具有发病率高、死亡率高的特点,若不得到及时有效的治疗,会带来严重的经济损失。目前主要应用抗生素来防治鸡大肠杆菌病,但长时间大量使用抗生素导致耐药菌株不断出现,动物产品抗生素残留严重[1-2]。近年来研究表明,中药防治鸡大肠杆菌病具有独特的优势。我们研制开发出加味白头翁颗粒,通过对自然感染大肠杆菌病鸡的治疗效果,考察和评价加味白头翁颗粒防治鸡大肠杆菌病的有效性,为兽医临床应用提供依据。

1 材料

1.1 试验药品 加味白头翁颗粒,由白头翁、黄连、黄柏、秦皮、白芍、甘草、当归、木香、木通组成,每1 g相当于原生药1 g,石家庄江山动物药业有限公司研制生产(批号20171023);磺胺间甲氧嘧啶钠可溶性粉(10%,批号20170308),石家庄江山动物药业有限公司生产;不含任何抗生素的全价饲料,石家庄江山饲料有限公司提供。

1.2 试验动物 选择石家庄平山中山种鸡场自然发生大肠杆菌病的鸡,经临床及实验室诊断为鸡大肠杆菌病,共250 只。

2 方法

2.1 自然发病病例的确诊

2.1.1 临床症状 观察并记录鸡大肠杆菌病病鸡临床症状,主要表现为精神沉郁、食欲下降、羽毛松乱、两翅下垂、闭眼缩颈,拉黄白色稀粪,有的鸡出现瘫痪和轻微神经症状。

2.1.2 病理剖检 将疑似为大肠杆菌感染的病死鸡随机选10 只进行剖检观察,进一步确诊鸡是否为致病性大肠杆菌感染并做好记录,同鸡大肠杆菌病剖检特征变化进行对比观察。鸡大肠杆菌病剖检特征变化：气囊增厚,表面有纤维素性渗出物;肝充血肿大易碎,浆膜增厚,有大量渗出物且见出血点或坏死灶;脾肿大,有小出血点;心脏呈心包炎,心包内有大量纤维素性渗出物,从肝、脾中均可分离出大肠杆菌。

2.1.3 实验室诊断 剖检病鸡,无菌取心血进行涂片,并将其进行革兰染色,显微观察鉴定。无菌取肝脏细菌接种到普通营养琼脂表面,37 ℃培养12 h,如果有菌落长出,再划线接种于麦康凯及伊红美蓝培养基上做细菌鉴定。将分离纯化后的致病菌,接种至生化培养基中,37 ℃培养48 h 后观察记录结果。

2.1.4 动物试验 将纯培养物用无菌生理盐水洗下,以0.2 mL/羽口服感染幼雏,观察可否引起急性败血症死亡。

2.2 加味白头翁颗粒防治鸡大肠杆菌病试验

2.2.1 试验分组及处理 将250 只病鸡随机分成5 组,每组50 只,试验分组及处理见表1。各组鸡自由采食,连续给药7 d,同时各组给予相同的饮水、光照、温度等饲养环境。试验期内每天对试验鸡进行疗效观察,记录患病鸡的精神状态、食欲,粪便状态,死亡率,死亡剖检变化,明确病因,统计其治疗情况并进行统计分析,直到给药第7 天。

表1 试验动物分组及处理

2.2.2 疗效判定标准 治愈：精神状态、采食饮水、粪便等恢复正常,且病理症状完全消失;经剖检后肝脏渗出物经接种分离,不能检查出大肠杆菌且肝脏及肠道无明显大肠杆菌所致病理变化。有疗效：精神状态、饮食、排粪有好转,症状明显减轻;经剖检后肝脏渗出物经接种分离,能或不能检查出大肠杆菌且显肝脏及肠道无或有轻微大肠杆菌所致病理变化。无疗效：症状无好转甚至死亡,剖检有明显的心包炎、肝周炎等典型大肠杆菌病症状;经剖检后肝脏渗出物能分离出大肠杆菌且显肝脏及肠道有明显的大肠杆菌所致病理变化。

3 结果

3.1 临床诊断 该鸡场病鸡精神沉郁,喜睡呆立,运动迟缓,羽毛杂乱,不时发出不正常叫声,饲养房吵闹,粪便黄白色,有时混有血液,有部分鸡出现呼吸困难、卧地不起、跛行症状。

3.2 剖检症状 打开胸腹腔可见气囊壁混浊、增厚,有黄白色干酪样渗出物附着,心包膜增厚,附着有大量渗出物,心包膜和胸腔粘连;肝肿大,表面有淡黄色纤维蛋白膜附着;胸腔内有许多纤维素性渗出物,肠系膜粘连。

3.3 实验室诊断 镜检可见红色、单个或并排存在、两端呈钝圆、短杆状的细菌菌体。肝脏致病菌在普通营养琼脂上长出灰白色、半透明、圆形的菌落;麦康凯培养基上长出桃红色的圆形菌落;伊红美蓝培养基上长出带金属光泽的菌落;生化试验显示：葡萄糖、乳糖、蔗糖、麦芽糖、甘露醇产酸产气,甲基红试验阳性。

3.4 动物试验 观察发现,被感染幼雏全部死亡,取病料涂片、染色、镜检及分离培养,所获结果与前相同。根据临床症状、剖检变化和实验室检查结果,最后确诊为鸡大肠杆菌病。

3.5 加味白头翁颗粒防治鸡大肠杆菌病试验 各药物试验组鸡在24～48 h 间死亡较多,72 h 后精神开始好转,采食饮水逐渐恢复正常。空白未治疗组在整个试验期间大部分精神不振、食欲减少,出现死亡。试验结果见表2。

表2 加味白头翁颗粒对鸡大肠杆菌病治疗效果

由表2 可知,加味白头翁颗粒中、高剂量组和磺胺间甲氧嘧啶钠可溶性粉组对鸡大肠杆菌病均有较好的防治效果。加味白头翁颗粒中、高剂量的治疗效果略强于磺胺间甲氧嘧啶钠可溶性粉,二者的无效率均低于磺胺间甲氧嘧啶钠可溶性粉,差异显著(P＜0.05)。加味白头翁低、中、高剂量组中以中剂量组有效率最高,疗效最好。

4 讨论

根据鸡大肠杆菌病的临床表现、病理变化,按中兽医辩证施治理论,鸡大肠杆菌病是疫毒内侵、血淤气滞、肺胃热盛、湿热下注膀胱引起[3-4]。对症施治时应该考虑施以清热解毒、凉血燥湿、利水通尿的中药为主。试验中加味白头翁颗粒是在经典方剂“白头翁散”的基础上研制而成。复方中白头翁、黄连、黄柏、秦皮能清热燥湿、泻火解毒。而现代药理研究资料表明,该四味中药对痢疾杆菌和大肠杆菌有较强的抗菌杀菌作用。另外白头翁、秦皮二药兼具对肠道有收敛止泻的作用。白芍、甘草同用,有缓急止痛的功效。当归、木香等既有行气、活血、通经、止痛功效又有引诸药入经的作用。木通具有清心火、利小便、通经下火等功效。故本方具有清热燥湿,行气止痛,利水通尿作用。因此,对鸡大肠杆菌病具有明显的疗效。

本试验以加味白头翁颗粒对患大肠杆菌病鸡的治愈率、有效率和无效率进行统计分析,是为了方便考察单个试验鸡,无效反映了病情没有减轻反而加重甚至死亡;有效是相对于无效而言,病情有所减轻但各种健康指标还没有完全恢复,这部分鸡在延长用药后可能逐渐治愈。该试验中所用的加味白头翁颗粒对自然感染大肠杆菌所致的鸡大肠杆菌病的有效率均达到86%以上,疗效显著,且以中剂量组的治疗效果最理想。该药为纯中药制剂,残留少,不易产生耐药性,是治疗鸡大肠杆菌病较好的药物之一。