双歧杆菌三联活菌联合XELOX 化疗对大肠癌术后肠道菌群及免疫功能的影响

刘 丹 粟文钊 吴忠良

苏州大学附属第二医院普外科，江苏苏州 215000

大肠癌是临床常见的恶性肿瘤，主要包括结肠癌和直肠癌[1]。该病早期临床症状不典型，随着病情的进展，可出现便血、腹泻及排便习惯改变；晚期时，患者出现体重骤降、贫血等威胁患者生命健康的并发症，预后较差[2]。手术治疗仍是治疗大肠癌的有效方式，但存在切缘癌残留、术后易发生远处转移等弊端。因此，术后化疗亦是大肠癌治疗的重要组成部分。奥沙利铂+卡培他滨（XELOX）方案是大肠癌术后的常用化疗方案之一，在改善患者临床症状、降低术后转移风险等方面具有一定效果[3]。但由于多数化疗药物对肿瘤细胞没有高度选择性，在杀灭肿瘤细胞的同时，也可杀灭或损伤正常组织细胞。此外，大肠癌切除手术不可避免的对患者肠道造成损伤，致使术后患者肠道微生态平衡失调，增加化疗毒副作用的发生风险。双歧杆菌三联活菌属于微生物制剂，可有效改善肠腔内环境，增强黏膜通透性[4]。本研究通过探讨双歧杆菌三联活菌联合XELOX 化疗对大肠癌术后的影响，旨在为临床大肠癌的治疗提供数据支撑。

1 资料与方法

1.1 一般资料

选取2016 年2 月～2019 年2 月苏州大学附属第二医院（以下简称“我院”）诊治的大肠癌术后患者93 例。依据随机数字表法将其随机分为研究组（47 例）、对照组（46 例），两组一般资料比较，差异无统计学意义（P ＞0.05），具有可比性，见表1。本研究经我院医学伦理委员会批准。

纳入标准：①经病理学及临床影像学确诊为大肠癌；②具备手术指征，且接受手术治疗者；③生存期均＞6 个月；④既往未接受过化疗者；⑤患者及其家属知情且签署知情同意书。排除标准：①影像学显示已存在远处转移者；②妊娠及哺乳期妇女；③治疗前存在肠梗阻、肠穿孔等症状；④对本次研究使用药物存在禁忌者；⑤合并血液系统、免疫系统、心肝肾等疾病者；⑥近期服用过抗生素、微生态制剂等影响肠胃动力者。

1.2 方法

两组均接受手术治疗，术后对照组患者予以XELOX化疗，具体如下：奥沙利铂（成都长青制药有限公司，生产批号：20151124）130 mg/m2，将其溶入500 mL 5%葡萄糖注射液静脉滴注，1 次/d，只在第1 天注射；卡培他滨（齐鲁制药有限公司，生产批号：20150823）800 mg/m2，2 次/d，在第1～14 天口服。研究组在对照组的基础上给予口服双歧杆菌三联活菌（上海上药信谊药厂有限公司，生产批号：20160117）0.63g，3 次/d。21 d 为一个治疗周期，为期2 个周期。

表1 两组一般资料比较

1.3 观察指标

1.3.1 免疫功能 取两组治疗前、治疗2 个周期后清晨空腹静脉血2 mL，Fascalibur 流式细胞仪（美国BD 公司，批号：20150624）检测患者T 淋巴细胞亚群：CD4+、CD8+，并计算CD4+/CD8+。

1.3.2 肠道菌群 取两组治疗前、治疗2 个周期后新鲜粪便0.1 g，经生理盐水倍比稀释混匀，分别接种至含有厌氧菌、需氧菌的培养基中。需氧菌包括双歧杆菌、乳酸杆菌，有氧环境，37℃，培养48 h，计数；厌氧菌包括大肠埃希菌、粪肠球菌，抽气换气法，培养72 h，计数。鉴定采用ALB 半自动生物检定系统（兰州生物制品研究所有限责任公司，批号：141205）。

1.3.3 肿瘤标志物 取两组治疗前、治疗2 个周期后清晨空腹静脉血4 mL，3300 r/min 离心11 min（离心半径8 cm），取上清液。酶联免疫试剂盒（上海恒远生物科技有限公司，生产批号：20141027）检测糖类抗原199（CA199）、癌胚抗原（CEA）水平。

1.3.4 安全性评价 记录两组治疗期间不良反应情况。

1.4 疗效判定标准

记录两组治疗2 个周期后的临床效果。疗效判定标准包括：①完全缓解，病灶直径缩小＞70%，且维持1 个月以上；②部分缓解，病灶直径缩小40%～70%，且维持1 个月以上；③疾病稳定，病灶直径缩小＜40%或直径未见明显变化；④疾病进展，病灶直径增大或见新病灶[5]。总有效=部分缓解+完全缓解。

1.5 统计学方法

采用SPSS 25.0 统计学软件进行数据分析，计量资料用均数±标准差（）表示，两组间比较采用t 检验；计数资料用率表示，组间比较采用χ2检验。以P ＜0.05 为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 两组临床效果比较

研究组治疗2 个周期后临床总有效率高于对照组，差异有统计学意义（P ＜0.05）。见表2。

表2 临床疗效比较[例（%）]

2.2 两组肠道菌群比较

两组治疗前双歧杆菌、乳酸杆菌、大肠埃希菌、粪肠球菌比较，差异无统计学意义（P >0.05）；两组治疗2 个周期后乳酸杆菌、双歧杆菌升高，大肠埃希菌、粪肠球菌降低，差异均有统计学意义（均P <0.05）；研究组治疗2 个周期后乳酸杆菌、双歧杆菌高于对照组，大肠埃希菌、粪肠球菌低于对照组，差异均有统计学意义（均P <0.05）。见表3。

表3 两组肠道菌群比较（IgCFU/g，）

表3 两组肠道菌群比较（IgCFU/g，）

注：与本组治疗前比较，*P <0.05；与对照组同期比较，#P <0.05

2.3 两组免疫功能比较

两组治疗前CD4+、CD8+、CD4+/CD8+比较，差异无统计学意义（P >0.05）；两组治疗2 个周期后CD4+、CD4+/CD8+降低，CD8+升高，差异均有统计学意义（均P <0.05）；研究组治疗2 个周期后CD8+低于对照组，CD4+、CD4+/CD8+高于对照组，差异均有统计学意义（均P <0.05）。见表4。

表4 两组免疫功能比较（）

表4 两组免疫功能比较（）

注：与本组治疗前比较，*P <0.05；与对照组同期比较，#P <0.05。

2.4 两组血清肿瘤标志物比较

两组治疗前CA199、CEA 比较，差异无统计学意义（P >0.05）；两组治疗2 个周期后CA199、CEA 均降低，且明显低于对照组，差异均有统计学意义（均P<0.05）。见表5。

2.5 安全性评价

治疗期间，对照组出现2 例白细胞减少、3 例胃肠道不适、2 例脱发、1 例肝功能损害，不良反应发生率为17.39%（8/46）；研究组出现3 例白细胞减少、3 例胃肠道不适、4 例脱发、2 例肝功能损害，不良反应发生率为25.53%（12/47）；两组不良反应发生率比较，差异无统计学意义（P >0.05）。

表5 两组血清肿瘤标志物比较（）

表5 两组血清肿瘤标志物比较（）

注：与本组治疗前比较，*P <0.05；与对照组同期比较，#P <0.05。CA199：糖类抗原199；CEA：癌胚抗原

3 讨论

大肠癌是位居我国第四位的恶性肿瘤，其发病率由低到高依次为横结肠、降结肠、升结肠、盲肠、乙状结肠、直肠，近几年有向近端发展的趋势[6]。手术切除是其主要治疗方案，但很多临床实践证实[7-8]，部分患者在行手术治疗时，已出现癌细胞扩散现象，同时手术操作也可能造成不同程度的癌细胞扩散现象。因此，单纯依靠手术切除无法达到根治效果，术后适度的化疗可有效降低肿瘤复发率，延长生存期。XELOX 方案是结直肠癌患者常用的化疗方案，但是手术及化疗均可对患者自身的抗肿瘤免疫应答带来负面冲击，极易出现毒副作用，同时手术切除还可造成术后肠道菌群结构发生改变，严重影响患者预后[9-10]。双歧杆菌三联活菌主要是用于治疗肠道菌群失调引起的腹泻和腹胀[11-12]。现临床有关其辅助治疗大肠癌术后化疗的相关报道并不多见，且效果尚存在一定争议，本研究就此展开探讨。

本研究结果显示，研究组治疗2 个周期后临床总有效率、肠道菌群改善情况均优于对照组，提示双歧杆菌三联活菌辅助大肠癌术后化疗，可进一步提高治疗效果。原因在于奥沙利铂在多种肿瘤模型系统包括人结直肠癌模型，都表现出广谱的体外细胞毒性及体内抗肿瘤活性作用。体内、体外试验也证实其通过形成链内链间的交联，产生烷化结合物，作用于DNA，分离或阻碍蛋白质合成，有效抑制肿瘤细胞增殖[13]。卡培他滨在体内转变成5 氟尿嘧啶，抑制细胞分裂、干扰RNA 和蛋白质合成[14]。既往研究证实[15]，肠道菌群失调是大肠癌发生的影响因素之一。而双歧杆菌三联活菌进入肠道后可直接在肠道定植，通过补充肠道益生菌改善肠道微环境，阻止致病菌产生[16-17]。两种治疗方式联合应用，在确保治疗效果的同时还可利用生物夺氧功能改善定植部位的氧浓度，抑制大肠埃希菌等致病菌的繁殖，同时促进双歧杆菌等有益菌的生长[18]。

本研究结果显示，两组免疫功能、血清肿瘤标志物水平均得到有效改善，且观察组的改善效果更佳。CD8+可抑制B 细胞抗体免疫反应及T 细胞增殖，CD4+可分泌对其他炎症细胞进行趋化、活化的细胞因子，CD4+/CD8+的动态平衡直观反映机体免疫功能状态[19]。另大肠癌在发生发展过程中，可激活多种肿瘤标志物，且该类肿瘤标志物血清水平与临床分期和预后密切相关。CA199 是一种糖链抗原，在多种恶性肿瘤中均明显升高[20]；CEA 是一种糖蛋白，主要用于调节肿瘤细胞对细胞毒性淋巴细胞的敏感性，使肿瘤细胞逃避免疫攻击[21]。分析其改善效果更佳原因，可能与双歧杆菌三联活菌通过调节肠道菌群保证肠黏膜屏障功能完整性，进而有效改善机体免疫功能有关[22-23]。比外，两组不良反应发生率比较，差异无统计学意义（P >0.05）。提示该治疗方式安全性较好，不会增加不良反应发生率。此外，本次研究尚存在样本数据偏小、未能观察患者远期预后等不足，后续将进行相关的深入报道。

综上所述，大肠癌术后患者经双歧杆菌三联活菌联合XELOX 化疗治疗后，效果确切，可有效改善患者肠道菌群、免疫功能，降低血清肿瘤标志物水平，安全性较好，临床应用价值较高。