2017―2018年棉花推广品种SSR标记纯度检测简报

付小琼，李超，李楚逸，彭军*

（1.中国农业科学院棉花研究所/ 棉花生物学国家重点实验室，河南安阳455000；2.郑州大学，郑州450001）

笔者多年利用简单重复序列（Simple sequence repeat，SSR）分子标记检测国家棉花区试参试品种的真实性和纯度， 同时也协助部分省种子管理站检测省级棉花区试品种的纯度，积累了一些经验。2017年、2018年继续承担了一些种子企业的杂交种和亲本纯度检测的工作，现总结如下。

1 材料与方法

1.1 材料

2017年受9 家棉种企业和科研单位等的委托，承担了杂交种和亲本纯度鉴定工作，接受杂交棉样品100 份，亲本样品161 份。

2018年受13 家棉种企业和科研单位等的委托，承担了杂交种、常规种和亲本纯度鉴定工作，接受杂交棉样品152 份，亲本样品21 份及常规品种样品13 份。

1.2 检测方法

水磨棉仁，离心后抽提上清液作模板，采用15对核心引物进行检测，具有快速、低污染的特点[1]。

1.3 判别方法

15 对核心引物扩增的图谱有2 对以上的图谱与标准图谱不一致判定为杂株。通过图谱与亲本比对可以判断杂株的不同类型，有母本、父本，有杂交杂株，也有混入的其他常规棉种子。 SSR 标记纯度为符合标准图谱的种子数占总检测数的百分率。 根据多年的检测经验， 杂交种在80%以上为合格，在生产上优势表现明显。 如果母本与杂交种形态差异较大的品种，母本漏制种的比例需要严格控制，SSR标记纯度应保证在90%以上才能判定为合格[2-5]。

2 结果与分析

2.1 杂交棉SSR纯度检测结果

2017年检测的100 份杂交种SSR 标记纯度均在80%以上， 均达到合格水平， 其中有82 份SSR标记纯度在90%以上（表1）；2018年检测的152 份杂交种均在80%以上， 均达到合格水平， 其中有132 份在90%以上（表2），总体制种质量较好。各制种公司所有杂交种批次中没有用F2冒充F1现象，没有人为掺杂现象，纯度较差的种子均是由自交造成的。

2.2 2013―2018年种子企业杂交种纯度检测的比较

由表3 可知，2013年杂交种纯度差，SSR 标记纯度在80%以上仅占39.9%；2014、2015年各批次的SSR 标记纯度均在80%以上；2016年有2 个批次SSR 纯度在80%以下，98.7%的批次在80%以上；2017、2018年各批次SSR 标记纯度均在80%以上，其中2018年SSR 标记纯度大于90%的比例为86.8%，为6年中最高。 可见，近几年生产上杂交棉种子质量不断提高， 纯度明显优于2014年之前的杂交种[2-5]。

表1 2017年各棉种企业委托鉴定杂交种的SSR 标记纯度检测结果

表2 2018年各棉种企业委托鉴定杂交种的SSR 标记纯度检测结果

表3 2013―2018年送检杂交种样品的纯度分布

2.3 制种亲本的检测结果

2017年检测了3 个公司的161 个批次的亲本纯度，SSR 标记纯度在 83.3%～100.0%，7 个批次的纯度在90%以下（表4）；2018年检测了4 个公司的21 个批次的亲本纯度，SSR 标记纯度在83.3%～100.0%，90%以下的批次仅为 2 个（表 5），总体情况较好。对纯度90%以下的亲本在制种前要加强去杂的工作。

表4 2017年杂交制种的亲本检测结果

2.4 常规品种的SSR纯度检测结果

2018年检测常规棉品种批次13 个，SSR 标记纯度在83.3%～100.0%，SSR 标记纯度在90%以下的批次有3 个（表6）。 常规棉保纯相对简单，但也要注意收获前的去杂，保证棉种的纯度，保持品种的种性，延长品种的使用年限。

表5 2018年杂交制种的亲本检测结果

表6 2018年棉花常规品种检测结果

3 结论与建议

3.1 亲本的纯度是保证杂交种纯度的前提条件

在亲本繁殖过程中要提纯复壮，收获时要单收、单晒和单轧，加工中的各个环节要注意清理机器，贮存时标签应详细。检测中发现，某些公司由于亲本纯度不高或发放亲本时发生错误，导致杂交种报废不能用作商品种子。 因此，来年制种前要认真去杂，保证制种时亲本的纯度高。

3.2 适度控制制种户的制种面积，减少自交铃

近几年纯度偏低的批次主要原因均为自交铃偏多，是由早晨剥大花现象导致的。 在人力缺少的情况下，应减少制种户的制种面积，以利于保证质量。而且制种地块布局应适当分散，以便解决用工问题。

3.3 职责分明，建立互信互利的制种合作机制

在亲本纯度较高的前提下制种，年终收种子时进行分子检测，合格的回收，不合格的不收，严格按合同执行，保障双方的利益。 种子公司适当减少一些监控环节，节省成本，让利于制种农户，提高农户的自觉性。

3.4 提高F1的质量，利于科学合理利用F2

目前西北内陆棉区为主栽棉区，有很大一部分为风险棉区，前期气温不稳定，后期降霜早，生产上要推广早发早熟的品种，杂交棉为首选类型，早熟品种（杂交种）易脱叶杂质少，有利于机采棉的发展。 但目前人工制种成本过高，在杂交一代不能满足生产需求的情况下，可考虑利用F2的剩余优势。而F2较大面积的应用依赖于F1的质量。

3.5 培养种子流通环节的诚信意识

种子企业在收获种子时送样检测，监控种子的制种质量是有必要的。 而在后期的流通经营环节中，一经换手又存在检测问题，这种互不信任的现象增加了检测的工作量， 增加了种子经营的成本。种子经营要以诚信为本， 避免中途调包或以次充好，形成良好的经营流通合作方式。