长双歧杆菌BB68S对便秘人群的通便和调节肠道菌群作用

李桂花，葛绍阳，桑跃，刘治麟，王然

（1.北京食品营养与人类健康高精尖创新中心，中国农业大学，北京 100083；2.河北省畜产食品技术创新中心，廊坊 065201；3.北京和益源生物技术有限公司，北京 100089）

随着饮食结构的改变和社会生活压力的增大，便秘已成为困扰现代人健康的主要问题之一，严重影响着人们的生活质量。最近的调查显示，在亚洲便秘的发病率为9.6%[1]。我国便秘的发病率为5%～16%[2,3]。大多数便秘可以独立发生，也可与许多系统性疾病相关，例如帕金森综合征、老年痴呆[4～6]等。目前治疗便秘通常采用服用泻药的方法，如西沙必利和塞纳，但是长期服用此类复方制剂具有很大的副作用[7,8]，因此找出安全有效的缓解便秘的方法至关重要。研究表明，益生菌可通过平衡和调节肠道菌群实现通便的效果，已成为近年来健康治疗功能性便秘大量采用的方法[9,10]。

大量的研究表明，肠道中足够的双歧杆菌可以发酵寡糖，产生乙酸和乳酸，促进肠道蠕动和粪便排泄，从而缓解便秘[4]。Whorwel等[11]研究表明婴儿双歧杆菌可以缓解便秘型肠易激综合征妇女的便秘症状，Urita等[12]研究表明含有双歧杆菌的发酵乳可以缓解便秘。

目前，将益生菌作为发酵剂或功能因子生产含有益生菌的乳制品，如活菌型酸奶、益生菌奶粉等，受到广大消费者的认可与欢迎。所以，本研究以牛奶为介质，通过人群试验评价长双歧杆菌BB68S的润肠通便和调节肠道菌群功能，为开发长双歧杆菌BB68S相关产品奠定基础。

1 材料与方法

1.1 菌种及试验样品

长双歧杆菌BB68S保藏于中国普通微生物菌种保藏管理中心，菌株号CGMCC No. 14168，由中国农业大学功能乳品实验室提供。

1.2 受试对象与试验设计

纳入者与排除者标准、试验设计同文献[13]。

1.3 食用剂量及时间

将添加有BB68S的牛奶样品于低温4℃放置，每天早饭和午饭后1h内由受试者服用，每天服用两次，每次50mL，活菌浓度约为1010CFU。连续服用28d。试验期间不改变原来的饮食习惯，正常饮食。

1.4 观察指标及试验方法

安全性指标、功能性观察项目及日常饮食情况均同参考文献[13]。

采用气相色谱法测定粪便中短链脂肪酸含量，N2000型色谱工作站收集信号并检测。按照《保健食品检验与评价技术规范（2003年版）》检测肠道菌群，对粪便内双歧杆菌、乳杆菌、肠球菌、肠杆菌、拟杆菌和产气荚膜梭菌进行计数。

1.5 数据统计分析

利用 SPSS 20.0软件对结果进行统计分析。各项指标结果以“平均值±标准差”(mean±SD)表示。自身对照资料采用配对t检验，P＜0.05视为显著性差异，具有统计学意义。

2 结果与讨论

2.1 受试者一般情况

受试者试食前一般情况见表1。

表1 受试者试食前一般情况

2.2 受试者排便状况变化情况

排便次数、排便状况积分、粪便性状积分是反映便秘状况的有效指标。从表2可以看出，试食后与试食前比较，受试者排便次数极显著增加（P＜0.001），最后一次粪便性状积分极显著降低（P＜0.01）。上述结果表明试食含长双歧杆菌BB68S的牛奶有利于提高排便次数，减少排便不适，利于形成软便，改善粪便质量。

表2 试食前后受试者排便情况比较（±SD）

表2 试食前后受试者排便情况比较（±SD）

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2.3 试食期间受试者各类食物的摄入情况

采用膳食记录法调查受试者在试食前、试食中期（第14～15天）和末期（第27～28天）的主要食物摄入，计算和统计受试者主食类、果蔬类、肉蛋类食物及其膳食纤维的平均日摄入量，结果显示试食期间各类食物及其膳食纤维平均摄入量均没有显著差异。

2.4 受试者安全性指标检测情况

试食前后，受试者血常规和血生化变化、尿常规和便常规指标、心率和血压、肝、肾功能检查、胸透、心电图、腹部B超等各项指标均在正常范围。试食后未见到受试者出现不良反应和过敏反应症状。

2.5 受试者粪便短链脂肪酸含量变化情况

图1 BB68S干预前后受试者粪便短链脂肪酸的变化

乙酸、丙酸、正丁酸等短链脂肪酸（SCFAs）的含量是益生菌缓解便秘效果的重要评价指标。SCFAs是肠道微生物的最终代谢产物，能通过降低肠道pH值抑制致病菌的生长，促进有益菌的增殖，从而改善肠道微环境；SCFAs为肠黏膜细胞提供能量来源，促进肠上皮细胞增殖，有利于维护肠屏障，抵抗炎症，从而缓解便秘[14]。研究表明，乙酸、丙酸等有机酸可直接刺激肠壁神经，加快肠道蠕动；乙酸是微生物的主要代谢产物，其浓度增加可使肠管内渗透压增大，肠道内水分吸收增加，从而使粪便质量和润滑度增加，使其更易运输与排出[15]。

试食前后差异分析结果表明（见图1），试食后受试者粪便中乙酸、丙酸、丁酸含量显著增加（P＜0.05），总酸（三者总和）含量极显著增加（P ＜0.01）。

以上结果说明食用BB68S能增加肠道SCFAs含量。结合排便状况综合分析，说明便秘程度与肠道中SCFAs含量相关，与Wang等的研究结果一致[16]。

2.6 受试者粪便中菌群变化情况

图2 BB68S对便秘人群粪便中五种细菌的影响

由图2可以看出，便秘人群试食BB68S后，粪便中的益生菌（双歧杆菌和乳酸杆菌）数量与试食前相比显著增加（P＜0.05），有害菌肠杆菌、肠球菌和产气荚膜梭菌的数量显著减少（P＜0.05）。

3 总结

试验结果显示，受试者按要求试食含BB68S纯牛奶28d后，排便次数显著增加（P＜0.001）；最后一次排便状况积分显著降低（P＜0.01）；最后一次粪便性状积分显著降低（P＜0.01）。试食期间，受试者的食物及其膳食纤维摄入量没有差异。综上所述，BB68S能够有效缓解功能性便秘。

乙酸、丙酸和丁酸含量在试食后与试食前相比显著增加（P＜0.05），说明试食BB68S可以显著改善人粪便中短链脂肪酸含量。粪便中益生菌双歧杆菌和乳酸杆菌的数量与试食前相比显著增加（P＜0.05），有害菌肠杆菌、肠球菌和产气荚膜梭菌的数量显著减少（P＜0.05）。

综上，长双歧杆菌BB68S具有缓解便秘和调节肠道菌群的作用，而其缓解便秘的机制仍需进一步研究。