前列腺癌组织中环氧化酶-2 和细胞周期蛋白D1 的表达水平及临床意义

程肇平，程钰，卢柳

安康市中心医院病理科，陕西 安康7250000

前列腺癌是临床上常见的男性恶性肿瘤，多见于70～80 岁老年男性，由于人口老龄化加剧，前列腺癌在中国的发病率逐年升高，严重威胁男性的生命健康[1-3]。为了解前列腺癌的生物学行为，目前医学工作者在不断寻找前列腺癌发生发展的分子机制[4]。本研究比较了前列腺癌组织和前列腺增生组织中环氧化酶-2（cyclooxygenase-2，COX-2）和细胞周期蛋白D1（cyclin D1）的表达情况，并分析不同临床特征前列腺癌患者前列腺癌组织中COX-2 和cyclin D1 的表达情况，现报道如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料

选择2015 年4 月至2018 年10 月安康市中心医院收治的前列腺癌患者。纳入标准：①接受手术治疗；②经病理检查确诊为前列腺癌；③手术前未接受相关内分泌治疗、放疗或化疗。排除标准：①合并其他恶性肿瘤；②未能耐受或完成手术；③合并严重的心血管系统疾病。依据纳入和排除标准，本研究共纳入47 例前列腺癌患者。患者的年龄为58～83 岁，平均年龄为（73.97±7.34）岁；术前血清前列腺特异性抗原（prostate specific antigen，PSA）水平为（42.73±12.55）ng/m；依据Gleason 病理分级系统[5]，7 分以上（低分化腺癌）19 例，7 分（中分化腺癌）16 例，4～6 分（高分化腺癌）12 例；依据Whitmore-Jewett 分期标准[6]，A 期7 例，B 期14 例，C期16 例，D 期10 例。另 选择2015 年4 月至2018 年10 月安康市中心医院收治的前列腺增生患者。纳入标准：①接受手术治疗；②经病理检查确诊为前列腺增生；③术前未行抗前列腺增生治疗；④无肿瘤病史及家族史。排除标准：①合并其他前列腺病变；②未能完成全系统前列腺增生治疗。依据纳入和排除标准，本研究共纳入31 例前列腺增生患者。患者的年龄为57～81 岁，平均年龄为（71.55±6.95）岁；术前血清PSA 水平为（1.72±0.23）ng/ml。两组患者的年龄比较，差异无统计学意义（P＞0.05），具有可比性。分别收集前列腺癌患者和前列腺增生患者的前列腺癌组织47 例和前列腺增生组织31 例。

1.2 实验方法

1.2.1 主要试剂 鼠抗人COX-2 和cyclin D1 单克隆抗体及链菌素-生物素标记（labeled streptavidin biotin，LSAB）免疫组化试剂盒均购自福州迈新生物技术开发有限公司，均为即用型。

1.2.2 免疫组织化学染色方法 采用微波-EliVi‐sionTM（MW-EliVisionTM）免疫组织化学染色方法[7]检测前列腺癌组织和前列腺增生组织中COX-2 和cyclin D1 的表达情况，实验步骤按照试剂盒说明书进行，采用H2O2-二氨基联苯胺（diaminobenzi‐dine，DAB）显色[8]。采用已知COX-2 和cyclin D1阳性的前列腺癌组织作为阳性对照，采用枸橼酸缓冲液代替一抗工作液作为阴性对照。

1.2.3 结果判定标准 COX-2 和cyclin D1 阳性均为棕黄色，COX-2 在细胞质中表达，cyclin D1 在细胞核中表达[9-10]。每张切片随机选取10 个高倍视野，计算阳性细胞数。无阳性细胞为（-），阳性细胞数＜25%为弱阳性（+），25%≤阳性细胞数≤50%为中等阳性（++），阳性细胞数＞50%为强阳性（+++）。阳性表达率=（中等阳性+强阳性）例数/总例数×100%。

1.3 统计学方法

采用SPSS 18.0 软件对数据进行统计分析，计量资料以均数±标准差（±s）表示，组间比较采用t检验；计数资料以例数及率（%）表示，组间比较采用χ2检验，等级资料的比较采用秩和检验。以P＜0.05 为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 前列腺癌组织与前列腺增生组织中COX-2 和cyclin D1 表达情况的比较

前列腺癌组织中COX-2 的阳性表达率为80.85%（38/47），明显高于前列腺增生组织的16.13%（5/31），差异有统计学意义（χ2=31.632，P＜0.01）。前列腺癌组织中cyclin D1 的阳性表达率为61.70%（29/47），明显高于前列腺增生组织的19.35%（6/31），差异有统计学意义（χ2=13.542，P＜0.01）。（表1、表2）

表1 前列腺癌组织与前列腺增生组织中COX-2的表达情况

表2 前列腺癌组织与前列腺增生组织中cyclin D1 的表达情况

2.2 不同临床特征前列腺癌患者前列腺癌组织中COX-2 表达情况的比较

不同年龄、肿瘤直径前列腺癌患者前列腺癌组织中COX-2 的阳性表达率比较，差异均无统计学意义（P＞0.05）。不同分化程度、临床分期、转移情况前列腺癌患者前列腺癌组织中COX-2 的阳性表达率比较，差异均有统计学意义（P＜0.05）。（表3）

表3 不同临床特征前列腺癌患者前列腺癌组织中COX-2表达情况的比较（n=47）

2.3 不同临床特征前列腺癌患者前列腺癌组织中cyclin D1 表达情况的比较

不同年龄前列腺癌患者前列腺癌组织中cy‐clin D1 的表达情况比较，差异无统计学意义（P＞0.05）。不同肿瘤直径、分化程度、临床分期、转移情况前列腺癌患者前列腺癌组织中cyclin D1 的表达情况比较，差异均有统计学意义（P＜0.05）。（表4）

表4 不同临床特征前列腺癌患者前列腺癌组织中cyclin D1表达情况的比较（n=47）

3 讨论

前列腺癌是发生于前列腺的上皮性恶性肿瘤，包括腺癌（腺泡腺癌）、导管腺癌、尿路上皮癌、鳞状细胞癌和腺鳞癌等类型，绝大部分为腺癌[11-12]。本病起病隐匿，早期无明显症状，随着肿瘤发展，可表现为进行性排尿困难、尿频、尿急、尿失禁等，侵及膀胱可出现血尿，骨转移可引起病理性骨折、截瘫等。前列腺癌的治疗方法主要包括手术、内分泌治疗、放化疗等，但本病起病隐匿，发病时多为晚期。近年来有研究表明，COX-2 和cyclin D1在前列腺癌的发生发展中具有重要作用，为临床治疗前列腺癌带来了新的方向[13]。

本研究结果显示，COX-2 和cyclin D1 在前列腺癌组织中的阳性表达率分别为80.85%、61.70%，分别明显高于前列腺增生组织的16.13%、19.35%，差异均有统计学意义（P＜0.01）。表明COX-2 和cyclin D1 的表达情况均与前列腺癌的发生具有密切联系。不同年龄、肿瘤直径前列腺癌患者前列腺癌组织中COX-2 的阳性表达率比较，差异均无统计学意义（P＞0.05）。低分化、临床分期为C～D期、肿瘤出现转移患者的COX-2 阳性表达率分别为94.74%、92.31%、95.00%，肿瘤出现转移、分化程度越低、临床分期越晚，COX-2 的阳性表达率越高。不同年龄前列腺癌患者前列腺癌组织中cy‐clin D1 的表达情况比较，差异无统计学意义（P＞0.05）。肿瘤直径≥5 cm、低分化、临床分期为C～D期、肿瘤出现转移患者的cyclin D1 阳性表达率分别为76.00%、89.47%、84.62%、85.00%，肿瘤出现转移、肿瘤直径越大、分化程度越低、临床分期越晚，cyclin D1 的阳性表达率越高。表明前列腺癌的恶性程度越高，COX-2 和cyclin D1 的表达水平越高，提示在前列腺癌的发生发展过程中，COX-2 和cy‐clin D1 具有协同作用。

环氧化酶（cyclooxygenase，COX）又称前列腺素内氧化酶还原酶，可促进前列腺素生成，具有参与炎症反应的作用，COX 有两种同工酶COX-1 和COX-2，COX-2 定位于核膜，其产物可进入核内，对靶细胞的基因转录具有调节作用，具有抑制免疫反应、促进肿瘤血管生成及抑制肿瘤细胞凋亡等作用[14]。因此，COX-2 水平升高时，机体对肿瘤细胞的免疫力下降，而肿瘤血管增多、肿瘤细胞凋亡减缓更容易促进肿瘤组织的发展[15]。研究显示，在前列腺癌组织中可检测出COX-2 高表达，且恶性程度越高其表达水平越高，反映了COX-2 对前列腺癌的发展具有促进作用[16]，与本研究结果一致。cyclin D1 是调控细胞进行分裂增殖的蛋白，在细胞分裂由G1期进入S 期的过程中具有重要作用，其表达异常会引起细胞周期调节失控，细胞增殖发生异常。因此当cyclin D1 过度表达时，前列腺细胞不断由G1期进入S 期，发展为癌，前列腺癌细胞不断增殖，进一步促使肿瘤组织发展、恶化[17]。

综上所述，前列腺癌患者中COX-2 和cyclin D1的表达水平相对较高，COX-2 和cyclin D1 可能参与前列腺癌的发生发展。