人类Pegivirus 感染与输血安全研究进展

陈斌

甘肃省红十字血液中心，甘肃 兰州730046

随着医疗水平的不断提高，临床对血液安全的要求越来越高。为保障临床用血安全，国家以法规、标准等多种形式对献血者血液ALT、HCV、HBsAg、HIV、梅毒螺旋体等进行了检测规定［1］。但对人类Pegivirus（HPgV，之前被称为庚型肝炎病毒GBV-C/HGV）是否纳入常规化检测至今未明确，对于经血液传播且在一般人群中广泛存在但与疾病的关系还不确定的HPgV因子的控制方法仍在研究之中。本文就HPgV 与输血安全研究进展作一综述。

1 HPgV 的发现

1967 年，Deinhardt F 等将急性黄疸型肝炎患者（G.B.）的血清接种入狨猴体内导致狨猴肝炎发生，将可能引起肝炎的致病因子命名为GB 病毒［2］。1995 年，美国Abbott 实验室的Simons 与Genelabs 实验室的Linnend 等采用分子病毒学技术分别分离出1 种可能引起人类非甲非戊型肝炎GB 病毒C（GBV-C）和庚型肝炎病毒（HGV）。1996 年，中国首次分离并报道了该病毒［3］。GBV-C 与HGV 的核苷酸及氨基酸的同源性非常接近，经分析基因组序列发现他们为同一种病毒的不同分离株，于是GBV-C 与HGV 统一命名为庚型肝炎病毒（hepatitis gvirus，HGV）［2，4］。2013 年，国际病毒分类委员会批准在黄病毒科下设一个新属Pegivirus genus，GBV-C/HGV 重新命名为HPgV［5-6］。

2 HPgV 基因型及分布

HPgV 为有包膜的单股正链RNA 病毒，属黄病毒科Pegivirus 属，直径50～100nm，其含有脂质包膜，上有包膜蛋白E1 和E2。含有一个开放读码框架（ORF），编码长约2900 个氨基酸多肽，5’端为结构区，3’端为非结构区［7］。目前，已经被鉴定的基因型有7 种，彼此间的差异性为11%～14%［8］，基因型1 在西非人中分离，基因型2 在美国、欧洲、南美、北非人群检测到，基因型3 在亚洲和美洲印第安人中及造血干细胞移植患者中流行，基因型4 通常发现于东南亚，基因型5 在南非发现［9-10］，可能涉及HPgV/HIV 共感染的基因型6 病毒在印度尼西亚人中发现［11-12］，在中国云南地区发现新的基因型暂命名GBV-C7 型，其在HIV-1 感染的静脉吸毒人群中主要流行［13］。

3 HPgV 在献血者中的感染情况

HPgV 在世界各地人群中普遍存在，在献血者中广泛流行，有偿献血人群感染率明显高于无偿献血人群［14］。发达国家HPgV-RNA 阳性率在0.5%～5%，抗-E2 阳性率为3%～14%。发展中国家HPgV-RNA 阳性率为5%～18.9%，抗-E2 阳性率为13.2%～24.2%［15，16］。我国HPgV-RNA 阳性率为2.35%～4.26%，抗-E2 阳性率为3.18%～4.71%［3］。金一鸣等［17］对苏州地区无偿献血员HPgV 感染调查认为，苏州地区无偿献血员HPgV 感染率极低，无血清流行病学意义，但由于目前检测技术的限制，仍应采取有效措施，防止疾病的输血传播，确保临床用血安全。由此表明献血人群中有HPgV 感染者存在，应重视HPgV 在献血人群中的预防工作。

4 HPgV 的血源性传播途径

HPgV 血源性传播途径主要通过血液、母婴及性接触等途径传播。Alter 等［18］1997 年调查了1972～1995年357 例受血者，其中9.8%输血患者HPgV-RNA 阳性。国内1998 年报告输血感染HPgV 的研究显示5.1%的输血患者感染HPgV［19］。静脉吸毒者中HPgV-RNA 的阳性率为33%［20］，HPgV-RNA 阳性的慢性乙型肝炎患者中75%为静脉注射毒品成瘾者。接受注射治疗的患者比例（16.5%）明显高于未接受注射治疗的患者（9.4%）［8］。母婴垂直传播HPgV 主要是在生产过程中感染，但剖宫产婴儿感染率明显下降［21］。国内报道HPgV在血液透析患者中的感染率为0～14.3%［22-23］，国外报道为19%～31%［24-25］，明显高于一般人群。HPgV 可能通过血液外其他体液传播。在血清中含有HPgV-RNA 个体的唾液和精液中可测得HPgV-RNA。

5 HPgV 感染的实验室检测

RT-PCR 检测标本中的HPgV 基因片段是目前检测HPgV 感染最常用的方法。目前已用真核系统表达了HPgV 包膜蛋白E2，并建立了检测E2 抗体的ELISA 法。

5.1 RT-PCR 检测病毒-RNA RT-PCR 把HPgVRNA 病毒逆转录成cDNA，再以cDNA 为模板进行PCR扩增，扩增产物通过凝胶电泳即可判读结果。RT-PCR可检测HPgV 病毒血症患者血清或血浆及体液中HPgV-RNA，引物为5’非编码区，NS5 和NS3 编码区。该方法是目前诊断HPgV 感染最准确的方法。

5.2 酶联免疫吸附试验检测抗体 酶联免疫吸附试验（ELISA）是将HPgV 的非结构区和结构区的高度抗原性的合成肽制成固相抗原吸附剂来捕获血清中的HPgV 抗体。一般HPgV 感染者在感染3 周后可检出抗体，血清抗-E2 抗体产生后病毒即被清除，故认为抗-E2 是宿主成功清除HPgV 感染的标志物，对其的检测意义明显［2，5］。ELISA 简单、快速、特异、价廉，适用于临床诊断以及献血员和健康人群的筛查。

6 HPgV 感染对受血者的影响

关于HPgV 的致病性目前尚不明确。有些学者认为，HPgV 能单独感染人类，是可以致病的，也有研究者认为HPgV 不是嗜肝病毒，无明显致病性，甚至认为它是一种“保护性病毒”［26］。研究显示，HPgV 感染者在非甲-非戊型肝炎患者中比例并不高且血清转氨酶大多正常。

6.1 HPgV 单独感染 HPgV 单独感染多表现为急性肝炎，其临床特性与转氨酶水平正常或低的亚临床特性和无黄疸肝炎相似。有国内学者在对HPgV 感染者的回顾性研究中发现，HPgV 存在持续性感染，单纯HPgV 感染以急性肝炎为主，而重叠感染以慢性肝炎、肝硬化为主［27］。

6.2 HPgV 与HBV、HCV、HIV 重叠感染 HPgV 与HBV和/或HCV 重叠感染的致病性一直存在争议，对重叠感染的病毒之间的相互作用机制尚不清楚。一些临床研究显示，HPgV 与HBV 或HCV 混合感染的患者较单一HBV 或HCV 感染者在病情的临床症状和肝功能损伤方面无加重，HPgV 与HCV 共感染不恶化慢性丙肝的临床进程，也不降低HCV 对抗病毒治疗的反应［2］。研究证实HPgV 与HIV 重叠感染，HPgV 的AIDS 患者可以延缓HIV 感染的病程，延长HIV 感染者的存活期，HGV 导致较低的HIV 病毒载量和较高数量的CD4+T细胞，抗病毒治疗有效性明显增加［28-30］。

6.3 HPgV 与肝损伤 最初，HPgV 因引起肝炎被发现，但HPgV 的嗜肝性目前仍然存在争议，大多数学者的观点是HPgV 非嗜肝性病毒，而是嗜淋巴细胞病毒［31，32］。Tucker 等［33］综述的14 项HPgV 嗜肝性研究中，仅有一项数据显示HPgV 存在肝复制，13 项认为HPgV 不是嗜肝性病毒。许家璋等［34］研究认为HPgV 是一种嗜肝性病毒，感染后可导致实验动物血清ALT 和AST 的系列变化和肝脏组织学损伤，有致病性。林彩文等［35］研究认为无论是急性肝炎、慢性肝炎还是重型肝炎，重叠感染HPgV，既不加重肝脏的损害，也不影响疾病的病程与预后。由此可见，HPgV 的致病性仍不确定。

6.4 HPgV 感染与原发性肝癌的关系 HPgV 在原发性肝癌发病中的作用尚未明确。Yuan 等［36］对144 名肝细胞癌（HCC）患者和252 名对照者的研究发现，感染HPgV 的患者发生HCC 的风险高5.4 倍。葛向华等［37］对原发性肝癌的病因进行了回顾性研究，表明中国肝癌诱发因素仍以HBV 为主，其次为HCV，而HPgV 在肝癌发病中的意义甚微。

6.5 HPgV 感染与其他疾病关系 小样本量研究表明，HPgV 感染能诱发非霍奇金淋巴瘤，与再生障碍性贫血、慢性肾功能衰竭等慢性疾病发生有关［5，38］。

7 HPgV 感染的预防措施

7.1 HPgV 感染预防存在的问题 目前，HPgV 感染预防还没有系统的策略。主要原因：首先，我国缺乏对HPgV 感染的流行病学调查。其次，尽管输血传播HPgV已经得到普遍认可，但由于对HPgV 的致病性存在质疑，世界卫生组织（WHO）、美国食品药品管理局（FDA）、欧洲质量理事会（EDQM）均未推荐献血者筛查HPgV，我国也没有在献血者中筛查HPgV。再次，对HPgV 的致病机制，临床缺乏系统性研究，对致病性没有确定的结论。

7.2 HPgV 感染的预防措施 ①普及HPgV 科学知识。开展预防和控制血液途径传播HPgV 的教育，通过献血者教育进行自我排除和自动延期献血以降低输血传播HPgV 的风险。②依法管理医疗机构和采供血机构，严格岗位资质。加强采血和血液制品的无菌技术操作，严格按照技术规程操作。③严格筛选献血者。从固定、自愿无偿献血者中采集血液，输血传播疾病发生的程度取决于献血人群中感染人数的比例和筛选工作的效能，防止输血传播疾病的首要方法是建立完整的筛选系统和选择低危的献血人群。加强献血前的征询，使曾经接受过输血或血制品的人员尽量延迟献血，开展血液HPgV 的筛查工作［39］。④对血液制品进行病毒灭活。对血液制品进行病毒灭活是保证输血安全的有效手段，是预防HPgV 经血制品传播的最直接途径，目前在人类还无法消除病毒感染的“窗口期”的情况下，对血制品进行病毒灭活，可以最大程度地防止HPgV 经血制品传播，确保输血安全。⑤加强临床用血的管理。减少不必要的输血，科学合理用血，倡导自体输血。⑥加强医院内部器官移植、血液透析等部门感染控制。严格执行国家标准，严格做好病区及各种物品的消毒，包括空气消毒，地面和物体表面消毒、各种器械用品及透析机消毒。医护人员要从思想上重视消毒工作，严格医务人员的规范操作，严格检查，互相监督，确保污染不扩散。