乳腺癌C-erbB-2、ER及PR的表达与临床病理特征的相关性分析

王久洁

（河北中石油中心医院 乳腺外科，河北 廊坊）

0 引言

乳腺癌是发生在乳腺上皮表皮组织的恶性肿瘤，且99.9%乳腺癌发生在女性人群中，男性患者仅占1%。乳腺癌疾病是仅次于胃癌与肺癌的恶性肿瘤疾病，其发病率较高[1]。由于乳腺癌病灶部位特殊，原位癌并不会致敏，但是随着病情的不断发展，将会造成乳腺癌细胞丧失正常的细胞特性，导致细胞之间连接松散、脱落，脱落的癌细胞将会参与血液、淋巴液播散，形成转移瘤，危及患者生命[2-3]。乳腺癌患者病情发生、发展与癌细胞扩散程度、淋巴结是否转移及孕激素水平存在一定联系。乳腺癌疾病作为一种临床差异性较为显著的疾病，其差异性是由多种基因改变与分子事件引起的。乳腺癌患者因其不同的预后效果，需给予不同的诊治方法。因此，加强乳腺癌患者的预后评估对其临床疗效的测评具有重要作用。病理组织检查是乳腺癌患者中常用的检查方法，虽然能帮助患者确诊，但是检查具有一定的风险性、创伤性，导致患者诊断依从性较差[4]。因此，本文以病例随机对照展开，探讨乳腺癌C-erbB-2、ER及PR的表达与临床病理特征的相关性，报道如下。

1 资料与方法

1.1 临床资料

选择2017年5月至2018年6月治疗的乳腺癌患者61例作为对象，所有患者均拟行手术治疗，年龄（34-67）岁，平均（53.59±5.71）岁；肿瘤直径（1-5）cm，平均（3.12±0.69）cm；肿瘤分期：I-II期51例，III-IV期10例；淋巴结转移：发生转移19例，未发生转移42例；分化类型：低分化23例，中分化30例，高分化10例。

所选患者及家属均对本次研究知情且同意。纳入标准：所选患者均经病理检验诊断为乳腺癌；所选患者在入院前，均给予放、化疗治疗；排除存在远处转移患者。

1.2 方法

（1）标本采集。所有乳腺癌患者均行手术治疗，术中留取病灶组织；取正常肺组织（癌旁组织），将其放置在10.0%中性甲醛中进行固定，石蜡包埋后制备3um连续切片；（2）方法。分别取不同病灶组织，加入蒸馏水及H2O2，室温下加入内源性酶10min灭火，PBS 3次洗涤。将获得的切片置入枸橼酸盐缓冲液中，加入生理盐水进行稀释，调节PH为6；将获得的溶液进行加热，间隔煮沸后常温下冷却。采用PBS2次洗涤，每次5min，最后加入5%BSA封闭液并加入兔抗人CD34、α-SMA抗体（1:100），兔抗人C-erbB-2、ER及PR一抗，一滴。滴加完毕后进行3次PBS洗涤；在1mL底物中加入兔抗人C-erbB-2、ER及PR二抗一滴，混合后常温下显色，苏木素复染后封片，每份标本测定三次，取平均值。判断方法：参考奥尔雷德评分标准分别从细胞的阳性数量（0-3分）、染色强度（0-3分）进行评估，总分16分，阳性率越高；（3）与病理相关性。查阅病例资料，记录乳腺癌患者肿瘤大小、分期、分化类型、淋巴结转移等，分析不同病理下乳腺癌C-erbB-2、ER及PR水平与临床病理特征的关系。

1.3 指标观察

当C-erbB-2、ER及PR为阳性时，其表达为棕黄色。利用Herry评分进行计分，将呈紫蓝色、淡黄色、淡黄色、黄色、深黄色及棕黄色的细胞核或细胞浆分别视为阴性、可疑阳性、弱阳性、阳性及强阳性，并分别计分为0分、1分、2分、3分及四分。当H评分大于等于2分，则表示阳性；当H评分小于2分，则为表示阴性。在高倍镜下，根据1000个癌细胞在细胞中所占比例统计其阳性表达，如果其小于1/3，则表示阴性，如果其在1/3-2/3之间，则表示弱阳性或阳性，如果其超过2/3，则表示强阳性。

1.4 统计分析

采用SPSS 18.0软件处理，计数资料行χ2检验，采用n（%）表示，计量资料行t检验，采用（±s）表示，P＜0.05差异有统计学意义。

2 结果

2.1 不同标本下C-erbB-2、ER及PR阳性率比较

观察组中C-erbB-2阳性率54.10%（33/61）、ER阳性率49.18%（30/61）及PR阳性率52.46%（32/61），均高于对照组（阳性率分别为 3.28%（2/61）、8.20%（5/61）及 6.56%（4/61））（P＜0.05）；观察组中C-erbB-2、ER及PR阳性率与肿瘤大小、分期、分化类型、淋巴结转移具有统计学意义（P＜0.05），见表1。

表1 不同标本下C-erbB-2、ER及PR阳性率比较

2.2 乳腺癌C-erbB-2、ER及PR阳性率影响多因素Logistic分析

多因素Logistic分析结果表明：乳腺癌组织中C-erbB-2、ER及PR阳性率与肿瘤大小、TNM分期、分化类型及淋巴结转移差异有统计学意义（P＜.05），见表 2。

3 讨论

人们生活水平的提高，逐渐改变了人们的饮食习惯与结构，也增加了乳腺癌疾病的发病风险，随年轻人生活压力的不断增多，乳腺癌患者正逐步年轻化。乳腺癌患者临床表现出来的差异性，离不开多种基因的改变与分子事件等因素的影响。

表2 乳腺癌C-erbB-2、ER及PR阳性率影响多因素Logistic分析

C-erbB-2基因位于染色体17q21位置，也叫人表皮生长因子相关基因，其具有胞内酪氨酸活性，通表皮生长因子受体同源性较高，对细胞的生长与分化具有调节作用。C-erbB-2基因通常情况处于未被激活状态，但一旦受到内外因素的影响，就会呈现激活状态，并以基因扩增与蛋白过度表达的方式，使细胞发生增殖、浸润及转移情况。C-erbB-2基因在上皮来源的恶心肿瘤中主要表现为高表达与扩增情况，但在正常组织中，却表现为低表达，甚至不表达。

乳腺上皮的正常生长、发育离不开雌激素、孕激素的调节与控制，当乳腺上皮细胞发生癌变时，雌激素（ER）、孕激素（PR）会出现部分缺失或全部缺失。如果患者乳腺癌细胞中保留了雌激素（ER）、孕激素（PR），那么表示乳腺癌的生长与繁殖离不开内分泌调控，这就是激素依赖性乳腺癌。雌激素（ER）、孕激素（PR）阳性患者对内分泌具有良好的治疗效果，且预后性较好，当C-erbB-2基因发生过度表达，则表示癌基因被激活，对癌变细胞内癌基因数量与性质具有改变作用，使激素受体功能与结构产生部分缺陷，并对乳腺癌依赖性生长特征具有抑制作用，使癌细胞分化逐渐降低，甚至出现停滞。

目前，临床上已经证明多种恶性肿瘤的发生、发展与17号染色体存在紧密的联系，包括：C-erbB-2、ER及PR等，发病后常伴有P53基因突变，在肿瘤耐药中发挥了重要的作用，能影响患者病情、预后及化疗作用[5-6]。乳腺癌属于是一种依赖激素生长的恶性肿瘤，其生长与体内雌、孕激素水平有关，而ER及PR则能反应机体内的激素水平状态及功能，测定其表达水平能为临床纠正内分泌治疗制定方案提供依据和参考。本研究中，观察组中C-erbB-2阳性率54.10%（33/61）、ER阳性率49.18%（30/61）及PR阳性率52.46%（32/61），均高于对照组（阳性率分别为3.28%（2/61）、8.20%（5/61）及 6.56%（4/61））（P＜0.05）；观察组中 C-erbB-2、ER及PR阳性率与肿瘤大小、分期、分化类型、淋巴结转移具有统计学意义（P＜0.05）。因此，C-erbB-2、ER及PR在乳腺癌患者中表达水平均相对较高，能参与疾病的发展、发展。

本研究中，单因素及多因素Logistic分析结果表明：乳腺癌组织中C-erbB-2、ER及PR阳性率与年龄、病理学类型差异无统计学意义（P＞0.05）；乳腺癌组织中C-erbB-2、ER及PR阳性率与肿瘤大小、TNM分期、分化类型及淋巴结转移差异有统计学意义（P＜0.05），说明乳腺癌患者中C-erbB-2、ER及PR表达水平受到的影响因素较多，且不同因素之间能相互作用、相互影响，加强C-erbB-2、ER及PR测定能反映患者疾病严重程度，为临床诊疗提供依据和参考。

综上所述，C-erbB-2、ER及PR在乳腺癌患者中呈高表达，且与临床病理存在明显的相关性，能指导临床诊疗。