复合益生菌对生长期湖羊生长性能、养分表观消化率和血液生化指标的影响

何韵秋，刘 程，陆琴月，叶均安，徐宁宁*

（1.浙江大学动物科学学院，浙江杭州 310058；2.嘉兴汇欣农业有限公司，浙江嘉兴 314300）

草畜转型政策促进了我国肉羊养殖产业的蓬勃发展，消费升级引起的羊肉供给缺口，大量研究集中于肉羊的快速育肥[1]。颗粒化全混合日粮（Pelleted Total Mixed Ration，PTMR）的推广应用可显著提高肉羊生长性能，减少人工和储存成本；但是PTMR 降低了瘤胃pH[2]，增加瘤胃酸中毒的风险，影响动物酸碱平衡[3]。瘤胃是反刍动物主要的消化器官，绝大多数的碳水化合物和蛋白质在瘤胃中被降解，尤其是淀粉等精料物质快速降解引起瘤胃pH 迅速降低，导致瘤胃功能紊乱[4]，进而影响动物健康和生长性能。反刍动物采食粗饲料，尤其是物理有效性纤维（Physically Effective Neutral Detergent Fiber，peNDF）对于稳定瘤胃pH、维持正常功能具有重要作用。但是PTMR 中缺少peNDF 的刺激，因此在PTMR 推广应用中，如何在缺失peNDF 条件下维持瘤胃稳态和动物健康成为研究热点。益生菌能够改善瘤胃微生态平衡[5]，抑制宿主肠道病原微生物的增殖[6]，提高营养物质消化率，并且作为饲料添加剂对各类动物具有显著促生长作用[7]。目前为止，尚未有探究PTMR 中添加益生菌对肉羊生长性能的影响报道。本试验旨在探究复合益生菌不同添加量对生长期湖羊生长性能、营养物质消化率及血液生化指标的影响，为优化PTMR 应用提供新的数据支撑和实践参考。

1 材料与方法

1.1 试验设计 选择体重（18.1±1.8）kg 的生长期公湖羊60 只，随机分成4 组，每组15 只，分别饲喂含有0、1、2、3 g/kg（干物质计算）复合益生菌的PTMR，其中0 g/kg组为对照组。复合益生菌由浙江大学研制，为灰褐色粉状物，主要包含地衣芽孢杆菌（≥2.0×109CFU/g）、枯草芽孢杆菌（≥2.0×109CFU/g）和米曲霉（≥2.0×104CFU/g）。

1.2 饲养管理 试验于2018 年10 月—12 月在嘉兴汇欣农业有限公司进行，预试期7 d，正试期45 d。预试期每天每只湖羊定量饲喂颗粒料700 g，正试期各组湖羊自由采食和饮水。颗粒饲料由浙江科盛饲料股份有限公司加工，PTMR 组成和营养成分见表1。

1.3 指标测定及方法

1.3.1 生长性能 试验开始前连续2 d 空腹称重，作为初始体重；试验结束时连续2 d 空腹称重，计算平均日增重（Average Daily Gain，ADG）。记录试验期间各组湖羊颗粒料采食量，计算平均采食量（Average Daily Feed Intake，ADFI）。试验期湖羊ADFI 与ADG 的比值为耗料增重比（F/G）。

表1 生长期湖羊PTMR 饲粮组成和营养成分（干物质基础）

1.3.2 表观消化率 试验结束前5 d 连续收集全部粪样，记录重量。每天混匀后采集500 g 粪样，65℃烘干后40目筛粉碎。日粮和粪样的干物质（Dry Matter，DM）和粗蛋白质（Crude Protein，CP）参考张丽英[8]方法测定，中性洗涤纤维（Neutral Detergent Fiber，NDF）和酸性洗涤纤维（Acid Detergent Fiber，ADF）按Van Soest等[9]的方法测定。

养分表观消化率=[（摄入养分量－排出养分量）/摄入养分量]×100%

1.3.3 血液生化指标 试验期最后一天，每组选取8 只试验羊，晨饲前采集颈静脉血液5 mL，3 000×g 离心15 min 制备血清，并于-20℃保存。采用全自动生化仪测定总蛋白（TP）、白蛋白（ALB）、球蛋白（GLOB）、血清尿素氮（BUN）、葡萄糖（GLU）、肌酐（CREA）、碱性磷酸酶（ALP）和超氧化物歧化酶（SOD），生化试剂盒购置于中山标佳生物科技有限公司。

1.4 统计分析 采用Excel 2013 初步整理试验数据，用SAS 软件（9.0）中Proc Mixed 模型进行方差分析，Tukey 进行多重比较，以P＜0.05 代表差异显著，P＜0.01 代表差异极显著。

2 结果与分析

2.1 复合益生菌对湖羊生长性能的影响 由表2 可知，ADG 和F/G 随复合益生菌添加量的提高呈二次性变化趋势（P＜0.01）。1 g/kg 和 2 g/kg 组 ADG 比对照组和3 g/kg 组高出约10%（P＜0.05），而F/G 显著低于对照组和3 g/kg 组，饲料转化效率显著提高；1 g/kg 和2 g/kg 组ADG 和 F/G 无差异，3 g/kg 组与对照组 ADG 和 F/G无差异。

2.2 复合益生菌对湖羊养分表观消化率的影响 由表3可知，DM 和CP 表观消化率随复合益生菌添加量呈二次性变化趋势（P＜0.01）。1 g/kg 组DM 表观消化率高于对照组（P＜0.05），3 g/kg 组低于对照组（P＜0.05）；2 g/kg 组CP 表观消化率高于对照组（P＜0.05），但1 g/kg 和3 g/kg 组与对照组无差异。复合益生菌添加量对NDF 和ADF 消化率无影响。

2.3 复合益生菌对湖羊血液生化指标的影响 由表4 可知，TP、GLOB 和A/G 随复合益生菌添加量提高呈二次性变化趋势（P＜0.01）。1 g/kg 组 TP 和 GLOB 浓度显著高于其余各组，且2 g/kg 和3 g/kg 组TP 和GLOB浓度无差异。白蛋白与球蛋白比值（A/G）在1 g/kg组最低（P＜0.05），表明机体免疫功能提高。1 g/kg组 BUN 含量显著高于 3 g/kg 组（P＜0.05），而血清ALB、GLU、CREA、ALP 和SOD 含量不受复合益生菌添加量的影响。

表2 不同添加量复合益生菌对湖羊生长性能的影响

表3 不同添加量复合益生菌对湖羊养分表观消化率的影响 %

表4 不同添加量复合益生菌对湖羊血液生化指标的影响

3 讨 论

3.1 不同剂量复合益生菌对湖羊生长性能的影响 益生菌的作用原理在于调控瘤胃内环境，提高饲料瘤胃降解率。杨华等[10]试验发现，基础日粮中添加0.5 g/kg 和1 g/kg 分离自羊瘤胃液的芽孢杆菌和双歧杆菌显著提高了肉羊ADG，降低F/G。吴家泉等[11]研究发现酵母菌、乳酸菌和枯草芽胞杆菌组成的微生态制剂显著提高了肉羊ADFI 和ADG，提高饲料转化率。但Rodríguez 等[12]研究发现地衣芽孢杆菌和枯草芽孢杆菌制成的复合菌对羊只体重没有影响。因此复合益生菌对肉羊生长性能的改变受到复合益生菌菌种和添加剂量的影响，其原因可能是不同益生菌之间存在协同或者拮抗作用。Zerby等[13]研究发现在干物质采食量相同的情况下，日粮添加米曲霉培养物提高了肉羊ADG。本试验结果显示，在PTMR 日粮中添加1 g/kg 和2 g/kg 的芽孢杆菌和米曲霉益生菌复合菌显著提高ADG 和饲料转化率，但是3 g/kg 复合益生菌添加组与对照组无显著差异，表明复合益生菌对湖羊生长性能的影响存在明显的剂量相关性。3 g/kg 组饲料转化效率和ADG 均与对照组无差异，可能原因是该复合益生菌添加量过高，反而造成养分降解率降低[14]，最终引起ADG 降低，故生长期湖羊PTMR 日粮中芽孢杆菌和米曲霉复合菌的适宜添加量为1～2 g/kg。

3.2 不同剂量复合益生菌对湖羊养分表观消化率的影响益生菌能够调节瘤胃发酵，并且有些益生菌还能够分泌外源降解酶，促进日粮瘤胃降解。芽孢杆菌是反刍动物生产中常用的益生菌，能够产生淀粉酶、蛋白酶、磷脂酶，促进动物对营养物质的降解[7]。米曲霉培养物在有效促进瘤胃细菌生长的基础上，还能促进真菌生长，提高纤维素酶、木聚糖酶、羧甲基纤维素酶和淀粉酶的活性，促进瘤胃发酵、挥发性脂肪酸形成和微生物蛋白合成[15]。肖怡等[16]研究表明，地衣芽孢杆菌可显著提高45 kg 的杜× 寒杂交成年羯羊DM、NDF 和CP 表观消化率，但Rodríguez 等[12]试验表明地衣芽孢杆菌和枯草芽孢杆菌制成的复合菌对羊的DM 及CP 消化率没有影响，对NDF 消化率有提高的趋势。添加米曲霉能够提高瘤胃体外DM、CP、NDF 消化率，米曲霉添加量≥1.2×106CFU/mL 时达到显著效果[17]。本试验发现，PTMR 中添加复合益生菌提高了DM 和CP 降解率，但是对NDF 消化率无影响，可能原因是本试验所用菌种不同，另一方面颗粒饲料中长纤维含量较低，益生菌提高NDF 消化率的作用效果可能受限，有待进一步研究。

3.3 不同剂量复合益生菌对湖羊血液生化指标的影响芽孢杆菌属于好氧或兼性厌氧菌，进入肠道后会迅速消耗氧气，营造肠道厌氧环境，抑制有害菌生长，而且芽孢代谢产物中含有多肽类抗菌物质，能显著抑制病原菌的生长，因此芽孢杆菌具有很好的提高动物免疫力、抗氧化功效[18]。Antunovic 等[19]研究发现地衣芽孢杆菌和枯草芽孢杆菌制成的复合菌降低了血清甘油三酯浓度以及丙氨酸氨基转移酶、天冬氨酸氨基转移酶和肌酸激酶的活性，提高了GLU 和ALP 含量，促进了羔羊代谢活动。本研究发现，1 g/kg 的复合益生菌添加量显著提高了血清TP、GLOB 浓度，降低A/G，提高生长期湖羊免疫能力，与Hussein 等[20]研究结果相同。但大部分试验表明，益生菌对血液生化指标没有影响[21]。张志军等[22]发现复合益生菌提高了哈萨克绵羊血清GLOB 浓度，但是对TP 浓度无显著影响。添加益生菌可以增强瘤胃细菌的活性，从而提高氮的利用效率，降低BUN 浓度[23]，但是本试验发现1 g/kg 复合益生菌组血清BUN 浓度显著高于3 g/kg 复合益生菌添加组，其余各组间无显著差异，间接表明益生菌对瘤胃微生物活性的影响存在明显的剂量效应。ALP 是反映肝功能的重要指标。本研究发现添加复合益生菌对血清ALP 浓度无影响，表明复合益生菌对生长期湖羊肝功能无影响。

4 结 论

本试验条件下，生长期湖羊PTMR 中复合益生菌的适宜添加量为1 g/kg，可显著提高生长期湖羊ADG，显著提高DM 和CP 降解率，降低F/G，提高饲料转化效率；提高血清TP 和GLOB 浓度，降低A/G，增强生长期湖羊的抗病力。