气相色谱法同时测定火龙果中三唑酮·异菌脲和醚菌酯残留

义国通 陆燕 农时锋

摘要 [目的]建立气相色谱同时测定火龙果中三唑酮、异菌脲和醚菌酯残留的分析方法。[方法]样品用乙腈提取，经弗罗里夕柱净化，气相色谱检测，外标法定量。[结果]在0.05～0.50 mg/kg添加水平范围内，三唑酮、异菌脲和醚菌酯的平均回收率在89.2%～104.6%，相对标准偏差（RSD）在5.7%～8.8%（n=6）;检出限分别为0.001、0.002、0.006 mg/kg。[结论]该方法前处理简便快捷，具有灵敏度高、检出限低和重现性好的特点，可满足火龙果中三唑酮、异菌脲和醚菌酯残留检测的要求。

关键词 气相色谱;三唑酮;异菌脲;醚菌酯;残留;火龙果

中图分类号 TS207.5+3  文献标识码 A

文章编号 0517-6611（2020）10-0171-02

doi：10.3969/j.issn.0517-6611.2020.10.046

Abstract [Objective] The research aimed to establish an analytical method for the simultaneous determination of triadimefon， iprodione and kresoximmethyl residues in Hylocereus undatus by gas chromatography.[Method]The samples were extracted with acetonitrile， purified by Florissian column， detected by gas chromatography， and quantified by external standard method.[Result]The average recoveries of triadimefon， iprodione and kresoximmethyl were 89.2%-104.6% when the spiked level range from 0.05 to 0.50 mg/kg， with relative standard deviations （RSD） in the range of 5.7%-8.8% （n=6）.The limit of detection of triadimefon， iprodione and kresoximmethyl were 0.001，0.002，0.006 mg/kg，respectively.[Conclusion]The method has the advantages of simple and fast pretreatment， high sensitivity， low detection limit and good reproducibility， and can meet the requirements for the detection of triadimefon， iprodione and kresoximmethyl residues in Hylocereus undatus.

Key words Gas chromatography （GC）;Triadimefon;Iprodione;Kresoximmethyl;Residues;Hylocereus undatus

  

火龙果（Hylocereus undatus Britt.）又名红龙果，是原产于中美洲的热带亚热带水果。20世纪90年代初引进我国南方试种，经改良后不断推广栽培。随着种植面积的不断扩大，火龙果病害发生日趋严重，其常见病害有茎腐病、软腐病、炭疽病、溃疡病、黑斑病等，这些病害通常依赖杀菌剂进行防治[1-2]。三唑酮（triadimefon）、异菌脲（iprodione）和醚菌酯（kresoxim-methyl）是目前常用杀菌农药，分别属于三唑类、二甲酰亚胺类和甲氧基丙烯酸酯类杀菌剂。这3种农药均为高效、低毒、内吸性强、持效期长的广谱性杀菌剂，在农业中广泛应用于致病菌引起的病害防治[3]。

目前，三唑酮、异菌脲和醚菌酯残留常用的检测方法有气相色谱法（GC）[4-6]、气相色谱-质谱法（GC-MS）[7-9]、气相色谱-串联质谱法（GC-MS/MS）[10-11]、液相色谱法（LC）[12-14]和液相色谱-串联质谱法（LC-MS/MS）[15-17]，但鲜见有利用气相色谱法同时测定火龙果中三唑酮、异菌脲和醚菌酯残留的报道。该试验采用乙腈提取、弗罗里夕柱净化，气相色谱电子捕获检测器（GC-ECD）检测，建立同时测定火龙果中三唑酮、异菌脲和醚菌酯残留量的方法。

1 材料与方法

1.1 仪器

7890A气相色谱仪（美国Agilent公司）;L530离心机（湖南湘仪公司）;T25高速分散机（德国IKA公司）;EH20D电热板（北京莱伯泰科公司）;N-EVAP-112氮吹仪（美国Organomation公司）;VORTEX-GENIE2漩涡混匀器（美国SI公司）。

1.2 试剂 三唑酮、异菌脲、醚菌酯标准溶液（100 mg/L）均购于天津阿尔塔科技公司;乙腈、丙酮、正己烷均为美国TEDIA公司色谱纯试剂;弗罗里夕固相萃取柱、复合石墨胺基柱均为美国Agilent公司生產;氯化钠为分析纯试剂。

1.3 样品前处理

1.3.1 样品提取。

准确称取20.00 g制备好的火龙果样品于100 mL螺口塑料离心管中，加入40.0 mL乙腈，于分散机上10 000 r/min匀浆1 min后加入7 g氯化钠继续匀浆1 min，然后以5 000 r/min离心5 min，取10.00 mL上清液于50 mL烧杯中，在70 ℃下蒸发近干，加入3 mL正己烷待净化。

1.3.2 样品净化。依次用丙酮与正己烷（1∶9）混合液5 mL、正己烷5 mL预淋洗活化固相萃取（SPE）柱，待溶剂液面到达固相吸附剂表面时，立即加入“1.3.1”中待净化溶液，用15 mL 比色管收集洗脱液，用5 mL丙酮与正己烷（1∶9）混合液冲洗烧杯后淋洗SPE柱，并重复1次。将收集完淋洗液的比色管置于氮吹仪上50 ℃氮吹至溶液小于5 mL，待比色管冷却至室温后用正己烷定容至5.0 mL，在漩涡混匀器上混匀，装入样品瓶待测。

1.4 气相色谱条件

色谱柱：DB-17MS（30 m×0.25 mm×0.25 μm）;进样口温度：250 ℃;分流比：10∶1;初始温度150 ℃，保持2 min，以10 ℃/min的速率升至280 ℃，保持5 min;载气：高纯氮;柱流量：1.5 mL/min;检测器温度：320 ℃;尾吹气流量：60  mL/min;进样量1 μL。

2 结果与分析

2.1 提取溶剂的选择

分别选取乙腈、丙酮、正己烷作为提取溶剂，以火龙果加标样品回收率为指标，比较不同溶剂对3种杀菌剂的提取效率。结果发现，乙腈提取3种农药加标回收率都在80%以上;丙酮提取时存在回收率偏高问题（大于120%），且杂峰较多影响测定;正己烷提取时有回收率低于80%现象。因此，该试验选取乙腈作为提取溶剂。

2.2 净化柱的选择 该试验选取弗罗里夕柱（Florisil）、复合石墨胺基柱（Carbon/NH2）作为净化柱，以对火龙果样品净化效果和加标回收率为考察指标，比较这2种常见固相萃取柱的净化效果。结果发现，经2种固相萃取柱净化后，加标样品中各添加组分都能很好出峰，样品基质干扰较少，3个不同水平（0.05、0.10、0.50 mg/kg）的加标回收率结果见图1。由图1可见，三唑酮和异菌脲的加标回收率均在80%以上，且相差不大;醚菌酯经弗罗里夕柱净化后的回收率都在80%以上，而过复合石墨胺基柱后存在回收率低于80%的情况，且整体比过弗罗里夕柱的回收率偏低。因此该试验最终选择弗罗里夕柱（Florisil）作为净化柱。

2.3 方法线性范围和检出限

分别配制0.01、0.02、0.05、0.10、0.20、0.50、1.00 mg/L浓度的3种杀菌剂混合标准溶液，按“1.4”条件测定，以各农药峰面积（Y）对其质量浓度（X，mg/L）作标准曲线，将标液用样品基质稀释以3倍信噪比（S/N=3）测定检出限（LOD）。结果表明（表1），在0.01～1.00 mg/L 浓度范围内三唑酮、异菌脲和醚菌脂这3种杀菌剂线性关系良好，相关系数（r）均大于0.999，检出限分别为0.001、0.002、0.006 mg/kg。

2.4 方法回收率和精密度 

称取火龙果空白样品，分别添加3个不同浓度（0.05、0.10、0.50 mg/kg）的3种杀菌剂混合标准溶液，按“1.3”方法提取、净化和检测，每个水平做6份平行试验，计算各添加水平的回收率和精密度，结果见表2。由表2可见，在3个添加水平下，3种杀菌剂的平均回收率在89.2%～104.6%，相对标准偏差（RSD）为5.7%～8.8%，说明该试验方法具有较好的准确度和精密度，能够满足日常检测分析需求。图2为火龙果空白样品和加标样品的色谱图。

3 结论

该研究建立了气相色谱电子捕获检测器（GC-ECD）同时测定火龙果中三唑酮、异菌脲及醚菌酯3种杀菌剂残留的方法。该方法前处理简便快捷，具有灵敏度高、检出限低及重现性好的特点，各项技术指标都满足果蔬中农药残留量的分析要求，适用于火龙果样品中3种杀菌剂的快速定性定量检测。

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