丹参的活性成分筛选及体外活性测试

2020-06-15 06:58计雅佳强围那文钰孔书悦祝霖露西北民族大学化工学院兰州榆中730124
化工管理 2020年14期
关键词:脂肪酶奥利酚酸

计雅佳 强围 那文钰 孔书悦 祝霖露(西北民族大学化工学院,兰州榆中730124)

随着人们生活水平的提高和生活习惯的改变,高血脂症的发病率明显增加,受到人们广泛关注,降低血脂,抑制动脉硬化的发展是防止由心脑血管等疾病引起死亡的重要手段。丹参是一种天然植物,具有降血脂的功效,本文章主要研究丹参的主要成分丹酚酸的降血脂功效,利用紫外分光光度法测定丹酚酸对脂肪酶的降血脂活性,并与市售药物奥利司他相比较。

1 筛选部分

1.1 用ADME筛选筛选成分

如果一个分子符合Lipinski 的“五定律”,那么它具有良好的吸收和渗透性。从TCMSP 数据库中筛选符合条件的成分,OB被用来确定生物活性分子作为治疗剂的类药物性质。用DL参数估计了预期化合物的溶解度和化学稳定性本文筛选出OB≥50%,DL≥0.18,ALog P≤5,Caco-2≥0.40,MW≤500 的SDC 有效化学成分。然后,Pubchem 数据库(https://Pubchem.ncbi.nlm.nih.gov/)进一步规范了结构和名称。所得分子如表1所示。

通过上述表格,我们了解在丹酚酸中活性较好的成分是丹酚酸B,所以我们选择丹酚酸B来进行如下实验。

2 体外活性测试部分

2.1 胰脂肪酶活力的测定

称取PNP 标准品70mg,使用二甲基亚砜溶解,定容到100ml,制成浓度为5mmol/L的母液。使用上述母液配制不同浓度的pnp溶液,以缓冲液做对照,使用紫外分光光度法在405nm波长处测吸光度,每个浓度下测定三次,做出A-c 的浓度坐标图。

配制不同浓度的丹酚酸B和奥利司他溶液,吸取不同浓度的以上溶液0.5ml、Tris-HCL 缓冲液3ml 和脂肪酶溶液1.5ml 于37℃下保温10min,加入已预热的PNPP 底物溶液起始反应,37℃反应10min后加入6ml乙醇和0.5ml 浓盐酸终止反应,在紫外分光光度计405nm下测定其吸光度。根据标准曲线,计算抑制率,以奥利司他为对照,测定。

抑制率计算:抑制率%=(Aa-Ab)/Ae(Ae:不加样品时吸光度 Ab:加入样品但未加底物和酶时 Aa:加入样品时吸光度)

3 结果及讨论

3.1 4-硝基苯酚的标准曲线

将PNP稀释成不同浓度,利用紫外分光光度计在405nm处测定其吸光度,以不同浓度为横坐标,吸光度为纵坐标,绘制标准曲线,如图

图1 4-硝基苯酚的标准曲线

表1 SDC中选定候选化合物的信息

获得的曲线方程为y=13.307x+0.0908,此标准曲线的相关性为0.9707,证明实验相关性很好,实验可行性高。

3.2 不同浓度抑制剂对胰脂肪酶的影响

由图2可知,对丹酚酸B来说,浓度越大,抑制率越高,抑制效果越好。图3随着奥利司他浓度的增加,抑制率在不断提高,但之后随着浓度的增加,抑制效果趋于平缓,这说明抑制剂对脂肪酶抑制作用具有浓度依赖性,证明奥利司他对胰脂肪酶具有一定的抑制作用,但是抑制效果有待进一步提高。由图2图3对比可知,丹酚酸B与奥利司他相比,丹酚酸B的抑制效果明显比奥利司他要好

图2丹酚酸B对胰脂肪酶抑制作用的影响

图3奥利司他对胰脂肪酶抑制作用的影响

猜你喜欢
脂肪酶奥利酚酸
胰脂肪酶升高的检测及临床意义
猪一样的室友
双咖酚酸在小鼠体内的药物代谢动力学与组织分布
氟桂利嗪联合丹参多酚酸盐治疗急性偏头痛的疗效研究
Supreme的潮牌故事——奥利奥联名饼干一块卖出7000美元
新疆紫草总酚酸提取物指纹图谱建立及4种成分测定
MCM-41分子筛固载脂肪酶的研究
脂肪酶Lip2在蚕丝表面交联固定及其催化性质
是谁唤醒了春姑娘(上)
一句话等