快速测试片在食品微生物检测中的应用

崔雨明

（盘锦检验检测中心（盘锦市疾病预防控制中心） 辽宁盘锦 124010）

1 前言

食品作为人类生活的物质基础，与人们的身体健康息息相关。因此，食品安全至关重要。微生物是影响食品安全的主要因素，本文对快速测试片法在食品微生物检测中的应用进行分析，为食品微生物检测探究更为有效的方法，以期保证食品卫生的安全。

2 方法与结果

2.1 传统检测方法

筛选白色、无毒、中速、密度均匀、吸附力合格的滤纸，将滤纸裁剪成合适的尺寸。将灭菌氯化三苯四氮唑（TIC）加入到无菌培养基后，将无菌滤纸浸入其中，根据需要控制滤纸的培养基吸附量，在适宜的温度下干燥，分装于已灭菌的聚丙烯塑料口袋内，密封备用。TIC是氧化还原指示剂，接受氢后可形成非水溶性的红色三苯甲脂。在滤纸上形成红色点状物出现，对红点进行计数，即得细菌总数。

2.2 快速测试片检测法

检验前需要做好准备工作，合理选择快速测试片进行食品微生物检验工作。测试片可以采用培养基系统和冷水可溶性凝胶进行制备，并在同时准备好指示剂。在进行菌落总数测试时，必须使用白色无毒、密度均匀、中速且吸附力合格的测试片。除此之外，还要合理裁剪滤纸，大小控制在1～5 cm左右。在无菌培养基中加入2，3，5-氯化三苯基四氮唑（TTC）灭菌，再将无菌滤纸缓慢浸入；滤纸浸入后，对滤纸吸附量及干燥温度进行合理控制；最后，用灭菌聚丙烯塑料袋进行分装，密封处理。使用时，需要在纸片上方加入1 mL待测液，经压平处理后，放置于37℃培养箱中培养16～20 h，然后计数。由于滤纸间隙较大，纤维之间会存在菌体，此变化肉眼不可见，同实际菌数进行比较后，结果显示，菌落程度减小。检测试片使用后要进行焚烧处理，不可重复使用。

在食物微生物检测中，以对大肠杆菌、大肠菌群和金黄色葡萄球菌的检测作为普遍检测技术。传统方法需要较多人力、物力，且培养时间过长，而选择大肠杆菌计数纸片、大肠菌群和金黄色葡萄球菌测试片进行检测，培养时间在24～48 h[3]。通过测试，可对大肠杆菌及大肠菌群数进行确定。

2.3 结果

传统检测法一般需要较长的时间，且需要在相对稳定的温度下进行，但是采用测试片法，可以在短时间内无固定温度条件下进行操作，提升了检测效率，结果详见表1。

表1 食品微生物检测时间分析（单位：h)

2.4 讨论

通过以上食品微生物的检测结果可以看出，快速测试片法有检测率高、培养时间短、操作较为简单等优点。但是快速测试片法也存在一定的问题，仍需不断进行探索，以实现快速测试片法的广泛应用。

3 快速测试片在食品微生物检测中的应用

3.1 以滤纸为基础的测试片

大肠菌群、大肠杆菌纸片荧光法中所用的测试片由上海医科大学研制。此方法利用细菌会产生代谢酶或代谢产物这一特点，建立了一种酶底物反应法。通过检测大肠菌群、大肠杆菌产生的相关酶的活性，达到检测目的。目前，2种测试可以分别检测大肠菌群和大肠肝菌，在37℃培养箱中培养24 h后可以在荧光灯下得到相应的结果，方法用时短、操作简单，被广泛应用于我国的食品微生物检测中。

3.2以Petrifilm作为基础的测试片

Petrifilm测试片主要由上、下2层薄膜组成，下层的聚乙烯薄膜上有网格，覆盖在培养基上，上层是聚丙烯薄膜。微生物生长以及生化试验所需的营养试剂，由冷水可溶性凝胶剂附着在上、下2层膜上。Petrifilm纸片已经通过国际认可，我国已经有400多个实验室使用此测试片进行微生物检测，主要研究对象为大肠菌群、金黄色葡萄球菌。此检测片的检测率较高，检测数据准确有效，被广泛运用于食品微生物的检测中。

4 结语

快速测试片可测量少量样品，整个操作过程较为简单，便于消毒保存和运输携带。快速测试片的价格较低，不会对环境造成污染，在减少工作量的同时降低了成本，适用于我国食品实验室微生物的检测[4]。

另外，快速测试片法可以在取样的同时进行接种，在一定程度上避免了细菌繁殖造成的数量增多现象，可以反映样品的真实细菌数。快速检测法不须特定温度，检测前也无须进行大量的准备工作，缩短了试验过程，提高了测试效率，能及时将检测结果反馈给食品企业。

目前，我国对快速测试片法的研究已有部分成效，但快速测试片法仍存在许多问题。例如，滤纸滤孔过大，双面都有菌落生长，无法计数，且滤纸保水性较差，在检验过程中，不能保持合适的湿度，导致菌体的生长较差；另外，滤纸检验卡上营养物质分布不均匀，样品中的细菌不能迅速扩散，进而导致菌体生长分布不均匀；快速测试片的显色指示剂系统较为单一，不能对细菌、真菌进行有区别的计数，因此，很难全面推广；Petrifilm测试片上覆盖有一层薄膜，如果细菌产气、产粘液较多，会出现菌落的扩散和融合，也会使最终结果存在一定的误差[5]。

虽然测试片已经在我国食品微生物的检测中有了一定的发展，但其仅局限于几个单一的指标检测，因此，需要开发更为优质的载体以及更高效的显色物质，做进一步研究，为食品微生物的检测提供不同类型的测试片。相关人员应该重视快速测试片在食品微生物检测中的应用，研究更多新型的高分子聚合物，弥补现有方法的不足，推出更为有效、准确的优质快速测试片，让快速测试片法充分发挥其作用，提高食品微生物的检测质量，从而保证食品卫生安全。