慢性乙型肝炎患者乙肝两对半及乙肝病毒DNA定量检测的临床意义

彭蘡 陈珊 徐燕 康厚纯

【摘 要】 目的：探讨乙肝两对半联合乙肝病毒DNA定量检测诊断慢性乙型肝炎的临床价值。方法：以2017年12月至2019年6月本院收治的133例慢性乙型肝炎患者为研究对象，全部患者均接受乙肝两对半和乙肝病毒DNA定量检测，回顾性分析检验结果。结果：乙肝两对半检测示HBsAg阳性124例（93.23%），HBsAb阳性11例（8.27%），HBeAg阳性42例（31.58%），HBeAb阳性89例（66.92%），HBcAb阳性132例（99.25%），乙肝DNA定量阳性19例（14.29%）。经统计，大三阳33例（24.81%），小三阳72例（54.14%），其余28例（21.05%）。结论：乙肝两对半联合乙肝病毒DNA定量检测可以有效诊断慢性乙型肝炎，判断乙肝病毒感染现状与转归情况，对本病临床治疗及防控具有重要指导价值。

【关键词】 慢性乙型肝炎;乙肝病毒;乙肝两对半检测;DNA定量检测

文章编号：WHR201908082

慢性乙型肝炎是由乙肝病毒感染所引起的慢性肝脏炎症性疾病，可通过密切生活接触、母婴、输血、医源性传染等途径传播，属我国法定乙类传染病[1]。本病呈世界性分布，我国是高度流行地区，数据统计显示，全球约3.5亿乙型肝炎表面抗原携带者，近30%分布于我国，其中慢性乙型肝炎患者约2000万例[2]。本病病程长，临床治愈困难，可进展为肝硬化甚至诱发肝细胞癌，严重影响患者的健康与生存质量[3]，因此早期诊断及干预治疗十分必要，是改善预后、控制传染的关键。乙肝两对半与乙肝病毒DNA定量检测是临床诊断慢性乙型肝炎、评估病毒传染性与疾病转归的常用方法，笔者现对检测结果进行分析，报道如下。

1 资料与方法

1.1 一般資料

以2017年12月至2019年6月为时限，择取本院收治的133例慢性乙肝患者。全部患者均符合中华医学会肝病学分会制定的相关标准，接受乙肝两对半和乙肝病毒DNA定量检测，资料及数据齐全，对本研究知情同意。病例排除急性乙肝、合并其他类型病毒性肝炎及传染病者。入选病例中，男92例，女41例，年龄最小21岁，最大71岁，平均49.7岁。

1.2 方法

1.2.1 标本采集及处理 使用真空采血管抽取患者静脉血4mL，温室静置30min，以3000rpm速率离心5min，取上清液备用。

1.2.2 乙肝两对半检测 乙肝两对半检测采用罗氏E601全自动电化学发光免疫自动分析仪及其配套试剂，质控品购自广州邦德盛公司。指标及正常参考值：1）乙肝表面抗原（HBsAg），参考值<1U/mL;2）乙肝表面抗体（HBsAb），参考值<10U/mL;3）乙肝e抗原（HBeAg），参考值<1U/mL;4）乙肝e抗体（HBeAb），参考值>1U/mL;5）乙肝核心抗体（HBcAb）参考值>1U/mL。本研究以指标值超过正常参考值上限或下限为阳性。

1.2.3 乙肝病毒DNA定量检测 试剂与仪器：采用中山大学达安基因股份有限公司的乙型肝炎病毒核酸定量检测试剂盒（PCR-荧光探针法）及美国ABI 7500型定量PCR仪。

试剂配制：从试剂盒中取出各管试剂，室温融化，2000rpm离心10s，设所需要的管数为n（n=样本数+1管阴性对照+1管强阳性对照+1管临界阳性对照+4管定量标准品），每份样本的测试反应体系配制为PCR反应液27μL，Taq酶3μL。

样本处理及上样：取1.5mL离心管，依次加入4μL内标IC、450μL DNA提取液、样本上清液200μL，振荡器剧烈震荡混匀15s，瞬时离心。将离心管置于干式恒温仪中，100℃下热浴10min，12000rpm下离心5min。在n个PCR反应管中分别加入处理过的样本上清液，定量标准品，阴性、强阳性及临界阳性对照各20μL。

设置PCR扩增循环条件，93℃：2min;93℃：45s，55℃：1min，10个循环;93℃：30s，55℃：45s，30个循环;40℃：20s。选择FAM通道和VIC通道;在55℃时电脑自动采集荧光信号进行数据分析，得出定量结果。以DNA定量检测无数值或<1.0E+02（1.0×102IU/mL）为阴性，反之为阳性，且指标值越大表示病毒复制越活跃、传染性越强。

1.3 统计学方法

以Excel 2016进行数据统计，计数资料以率（%）表示。

2 结果

乙肝两对半与乙肝病毒DNA定量检测结果见表1。经统计，HBsAg、HBeAb、HBcAb阳性72例（54.14%），HBsAg、HBeAg、HBcAb阳性33例（24.81%），HBsAg、HBeAg、HBeAb、HBcAb阳性7例（5.26%），HBsAg、HBcAb阳性7例（5.26%）;HBsAg、HBsAb、HBeAb、HBcAb阳性3例（2.26%），HBsAb、HBcAb阳性3例（2.26%），HBeAb、HBcAb阳性3例（2.26%），HBsAg、HBeAg阳性1例（0.75%），HBsAg、HBsAb、HBcAb阳性1例（0.75%），HBsAb、HBeAb、HBcAb阳性1例（0.75%），HBcAb阳性1例（0.75%），五项全阳性1例（0.75%）。

3 讨论

乙肝两对半也称乙肝五项，是临床诊断慢性乙型肝炎的重要血清学标志与实验室依据，五项指标不同阳性组合亦能用于判断乙肝病毒感染现状和疾病转归情况，对传染防控具有重要参考价值[4]。本研究对133例慢性乙型肝炎患者行两对半检测，结果示HBsAg、HBeAg、HBcAb阳性33例，为乙肝大三阳;HBsAg、HBeAb、HBcAb阳性72例，为乙肝小三阳;两者均证实为慢性乙肝，但前者传染性强，后者传染性弱，临床诊治本病应注重加强对大三阳患者病毒传染的防控。另检出HBsAg、HBeAg、HBeAb、HBcAb阳性7例，提示急性乙肝感染趋向恢复或慢性携带;HBsAg、HBcAb阳性7例，提示慢性HBsAg携带，此类患者乙肝症状体征均逐渐消失或已经消失，肝功能正常，但明确乙肝病毒感染，也是主要传染源。此外，HBsAb、HBcAb阳性3例，提示既往感染过乙肝，现仍有免疫力，属于不典型恢复期，患者体内已形成乙肝抗体，对病毒免疫，亦无传染性。HBeAb、HBcAb阳性3例，提示既往有乙肝感染，属于急性感染恢复期，有少数人仍有传染性，仍需引起重视，加强传染防控。由此可见，不同五项指标阳性结合者所处乙肝病程阶段不同，病毒传染性强弱有所差异，能够为患者个体化疾病治疗及传染防控提供有价值的依据和指导。此外，联合定量检测乙肝病毒DNA，能够有效反映病毒复制情况，评估乙肝病毒的活跃性与传染性，对于检测呈阳性的患者，应根据指标结果制定个体化保护隔离方案，以预防病毒传染扩散，更好地保障人群的安全[5]。

综上所述，乙肝两对半联合乙肝病毒DNA定量检测可以有效诊断慢性乙型肝炎、判断乙肝病毒的传染性与转归情况，对本病临床治疗及防控具有重要指导价值。

参考文献

[1] 岳枫.慢性乙型肝炎患者乙肝两对半检验的分析[J].中国医药指南，2017，15（12）：181-182.

[2] 罗晓慧.慢性乙型肝炎病人血清“两对半”检验结果模式与肝炎相关自身抗体的相关性研究[J].系统医学，2016，01（10）：20-22.

[3] 张国顺，孟冬梅，刘斌，等.乙型肝炎病毒标志物及DNA定量检测在慢性乙型肝炎病毒感染中的临床意义[J].中国老年学杂志，2018，38（18）：4592-4595.

[4] 谭丽.研究慢性乙型肝炎患者血清“两对半”检验结果模式与肝炎相关自身抗体的相关性[J].吉林医学，2017，38（05）：892-893.

[5] 花艳艳，许琳婧，李梦华.慢性乙型肝炎患者血清HBsAg定量和HBV-DNA检测在HBV基因型与耐药变异中的临床探讨[J].中国医药指南，2018，16（32）：121-122.