归脾汤有效成分与现代药理学的关联性

张楚洁 刘慧萍 杨璐瑜 张思敏 张韫玉 张国民

（湖南中医药大学中医方证研究转化医学实验室， 湖南 长沙410208）

归脾汤首见于《济生方》，为宋代严用和所著，用于治疗思虑过度、劳伤心脾、健忘怔忡之症，后由历代名医大家临证实践，不断补充，添入当归、远志等药材，治疗范围扩展到心脾气血两虚、脾不统血、血不养心等证，现代亦可应用于心脑血管、肝、胃、肿瘤、妇科等疾病。因此，研究归脾汤传统功效和现代药理，并探究其有效成分之间的关联性，有利于构建该方与现代医学之间的桥梁，更能促进临床推广应用。

目前，关于归脾汤的计算机生物学研究活跃，通过应用大量数据分析和基础理论、大规模数学建模、计算机仿真技术等，对该方组方原理和规律、相关作用靶点生物序列的片段拼接及序列对接进行分析，以寻求治疗新病症和药物组合的新途径。本文借助数据库资料，收集挖掘归脾汤传统功效及其有效成分发挥药效作用的关联性，利用Cytoscape 软件进行分析；基于归脾汤有效成分的类型和含有量，对归脾汤临床应用进行二次挖掘；根据 “君、臣、佐、使” 原则对归脾汤组成药物进行分类；采用GEO 数据库在线分析工具CEO2R 进行分析；应用DAVID（http：／ ／david.abcc.ncifcrf.gov／） 数据库中KEGG 筛选出相关信号通路；根据“疾病-药物-有效成分-信号通路-靶点” 的网络基础，利用Cytoscape 构建网络分析其相互作用，对归脾汤有效成分、主要功效及体内作用过程中主要影响靶点进行专业综合地分析，将中药传统理论与现代医学信息学研究相结合以加快中医药理论→验证→实践进程，为相关临床应用提供参考。

1 传统功效及应用

归脾汤现由白术、茯神、黄芪、龙眼肉、酸枣仁、人参、木香、甘草、当归、远志10 味药材组成，可用于心脾气血两虚证、脾不统血证。心藏神而生血，脾藏意而统血，思虑太过则两脏受伤，心血虚而火动，则心悸怔忡，健忘不安，夜寤不寐，脾不统血而血不归经，上下妄行，脾血不足，见倦怠嗜睡、面色萎黄，劳倦太过，损伤脾脏，气机不畅，则见少食肢痛。方中黄芪味甘性温，补脾益气，而龙眼肉甘平，补脾气，养心血，二者共为君药；人参、白术皆为益气补脾之要药，与黄芪相伍可助益气补脾之功；当归补血养心，酸枣仁宁心安神，二者与龙眼肉相伍时补心血、安神定志之力更强，均为臣药；佐以茯神、远志，奏养心安神，交通心肾之效；更佐以木香，理气醒脾，与诸补气养血药相伍，可使其补而不滞；炙甘草补益心脾之气，并调和诸药，用为佐使；引用生姜、大枣调和脾胃，以资化源，诸药配伍，使心脾得补，气血得养，诸症自除。

2 有效成分及其现代药理学

2.1 单味药 以蒙古黄芪、龙眼肉、人参、白术、当归、酸枣 仁、茯 苓、茯 神、远 志、木 香、甘 草、炙 甘草、化学成分、药理活性为中文检索词，Astragalus membranaceusvar.mongholicus、Longan Arillus、Panax、Atractylodes macrocephala、Angelica sinensis、Jujube Seed、Poria、Poria coco、Radix Polygala、Aucklandiae Radix、Glycyrrhizae、Zhigancao、Chemical Composition、Pharmacological Activity 为英文检索 词，在维普、CNKI、PubMed 数据库进行文献筛选。对获得的文献［1-22］及中国天然产物化学成分库中数据进行分析，得出上述药材所含具有生物、药理活性的有效成分，见表1。

表1 单味药有效成分的生物、药理活性

2.2 全方 崔景朝等［23］对归脾汤单煎、合煎后的药理作用进行对比，发现两者无明显差异，毒性亦然。由于汤剂贮存时间短，携带不便，故结合现代科技多将其制成丸剂或超微颗粒［24］。归脾汤单味药有效成分或有效部位分别为黄芪中黄芪甲苷、黄芪皂苷Ⅱ、黄芪多糖，龙眼肉中龙眼多糖、腺苷，人参中人参皂苷、人参多糖，白术中苍术酮、白术内酯、白术多糖，当归中藁本内酯、阿魏酸、当归多糖、二氢山芹醇当归酸酯，酸枣仁中酸枣仁皂苷、酸枣仁黄酮、酸枣仁油，茯神中茯苓多糖、茯神总三萜、茯苓酸，远志中远志皂苷、远志糖脂，木香中木香烃内酯、菜蓟苦素、去氢木香内酯、木香碱，炙甘草中甘草次酸、甘草酸、甘草黄酮。根据该方主要临床应用，以及现代医学中对其药理作用的研究结果［1-22，25-45］，发现黄芪甲苷、龙眼多糖、人参皂苷、白术多糖、阿魏酸、酸枣仁皂苷、茯苓多糖、远志皂苷、木香烃内酯、甘草酸是主要成分。本文对归脾汤现代药理学进行文献调研后发现，该方对神经系统、血液系统、消化系统、心血管系统等均有影响［25-33］，见表2。

表2 归脾汤现代药理作用

3 传统功效与现代药理学的关联性

3.1 脾气虚与心血虚的机制 归脾汤主要治疗因久病、情志失常、劳伤心脾、损耗气血导致的心脾气血两虚证，以及因脾虚日久、不能统摄血液、血行脉外的脾不统血证。脾旺则气血生化有源，气旺则血自生，心得所养［34］，故该方传统功效的实质是以健脾益气、养心补血，健脾益气为主。

3.1.1 脾气虚《灵枢·本藏篇》有“脾坚，则脏安难伤” 之说，脾为后天之本、气血生化之源，脾旺可扶助正气，维持人体健康。舒晴等［35］认为，脾是人体对抗疾病的基础，脾虚与T 淋巴细胞减少，淋巴细胞相关因子表达失常，酶母菌红细胞C3b 受体花环率（RBC-C3b-RR） 及红细胞免疫复合物花环率（RBC-IcRR） 降低，免疫球蛋白（IgA、IgG、IgM）、补体（C3、C4）、分泌型IgA（SIgA）水平减少有关。

脾主运化，将饮食水谷精微输送全身，外养四肢百骸，内养五脏六腑。现代医学认为，脾气虚证主要与消化系统功能失常、全身代谢障碍相关。李思琦等［36］研究表明，脾气虚证与消化道黏膜损伤，结构、运动异常，吸收功能障碍，胰酶活性降低，糖耐量降低，细胞线粒体功能异常，机体抗氧化能力降低相关。

3.1.2 心血虚《素问·灵兰秘典论》云：“心者，君主之官也，神明出焉”。心能统帅协调人体生命活动，主宰精神意识；心主血脉，可推动全身血液运行，若心血不足则失于濡养。扈新刚等［37］通过文献调研认为，情志与EPO、miR 191、Riok3、Mxi1 等变化有关，心血不足，心失所养，则情志、EPO 等变化异常。

3.2 关联分析 本文根据前期研究资料，结合脾气虚、心血虚相关机制考察，发现有效成分具有健脾益气、养心补血的作用，并收集归纳有效数据［1-4，9-11，13-20］，见表3。

除了白术多糖、木香烃内酯外，其他有效成分均增强SOD 活性；黄芪甲苷、人参皂苷、酸枣仁皂苷、茯苓多糖增加GSH 水平；黄芪甲苷、酸枣仁皂苷、茯苓多糖提高CAT 活性；黄芪甲苷上调VEGFR2 表达，与人参皂苷、木香烃内酯调节VEGF 水平。以上成分共同作用，发挥补血功效。

黄芪甲苷、茯苓多糖增加ATP、ADP、cAMP 水平；黄芪甲苷上调GLUT3 表达；黄芪甲苷、人参皂苷、阿魏酸上调BDNF 水平；阿魏酸、酸枣仁皂苷抑制5-HT 释放；阿魏酸抑制TXA2、FGFR1 生成；酸枣仁皂苷降低DA、NE 水平；茯苓多糖提高TXB2水平；远志皂苷抑制β-淀粉样蛋白产生。以上成分通过各自作用机制，发挥养心安神功效。

黄芪甲苷、龙眼多糖、人参皂苷、酸枣仁皂苷、茯苓多糖、远志皂苷、甘草酸抑制MDA 生成；黄芪甲苷、龙眼多糖、白术多糖、茯苓多糖、远志皂苷、甘草酸调节NO水平；黄芪甲苷、酸枣仁皂苷、茯苓多糖增强AOC 能力；人参皂苷、阿魏酸抗血小板凝聚；黄芪甲苷、人参皂苷、茯苓多糖减少NF-κB 核转位；阿魏酸降低LPO 水平。以上成分共同作用，发挥益气活血功效。

茯苓多糖提高 IL-2、TFN-β 水 平，抑 制 HBsAg、HBeAg、IL-10 分泌，并调节Th1、Th2 比例；黄芪甲苷、龙眼多糖、人参皂苷、甘草酸调节IL-1β 水平；黄芪甲苷、龙眼多糖、人参皂苷、白术多糖调节TNF-α 水平；龙眼多糖刺激IL-6 分泌；龙眼多糖、人参皂苷、白术多糖、茯苓多糖刺激IFN-γ 分泌；人参皂苷降低IL-4 水平；人参皂苷降低组胺水平；龙眼多糖、人参皂苷、白术多糖增强巨噬细胞吞噬作用；白术多糖、茯苓多糖上调Bcl-2／Bax 比值；黄芪甲苷抑制MPO 活性，抑制JNK1／2 磷酸化。以上成分共同作用，发挥健脾功效。

此外，部分有效成分发挥其各自临床作用。黄芪甲苷降低ICAM-1、AngⅡ、Ald 水平，与远志皂苷作用后减少ACE 表达；龙眼多糖提高NOS、LDH 活性，降低BUN、BLA 水平；人参皂苷降低TSLP 水平，抑制AchE 活性；白术多糖促进细胞迁移；阿魏酸上调NGF 水平；茯苓多糖、甘草酸共同抗纤维化；茯苓多糖降低XOD 活性。

表3 有效成分与健脾益气、养心补血中药的关联

4 有效成分组方结构及归类分析

归脾汤中黄芪、龙眼肉补益心脾为君药，人参、白术、当归、酸枣仁为臣药，佐以茯神、远志、木香，炙甘草用为佐使。为了从现代医学角度分析并证明本方组方结构的合理性，本文在 Scifinder 数据库中 10 种有效成分［3，9-13，15，19，38-45］进行查询，并对其进行信号通路和第二信使整合，见表4。

表4 有效成分组方结构分析

虽然归脾汤具有健脾益气、养心补血的功效，但健脾养心当先健脾，而益气补血当先益气，故该方在临床应用中以健脾益气为主。

对收集的作用靶点相关信息进行分析后发现，归脾汤中所有有效成分均可作用于NF-κB、NO 信号通路；黄芪甲苷作用的信号通路数目最多，并与其他有效成分作用的信号通路部分重合，范围广泛；人参皂苷、白术多糖、酸枣仁皂苷、阿魏酸除作用于上述2 条信号通路之外，其他作用的信号通路相互交叉重叠，互相协助发挥作用；除人参皂苷、白术多糖、茯苓多糖外，其他有效成分均可作用于MAPK 信号通路；黄芪甲苷、人参皂苷、白术多糖、甘草酸能影响消化系统、免疫系统、血液系统，从而发挥健脾补气的作用。

人参、黄芪、白术、甘草为归脾汤中主要健脾益气补虚药材，而龙眼肉、木香、当归、远志、酸枣仁、茯苓为辅药，综合黄芪甲苷、人参皂苷、白术多糖、甘草酸作用的信号通路发现，以上药材均可共同作用于消化系统、免疫系统、血液系统。其中，黄芪中黄芪甲苷作用数目最多，范围最广，为君药；人参、白术中人参皂苷、白术多糖作用范围与数量相对较小，两者信号通路与黄芪甲苷交错而共同发挥益气补虚的作用，为臣药；甘草中甘草酸作用信号通路范围广，发挥调和诸药的作用，为使药。

5 讨论

中药复方是中医临床和传承的重要组成部分，经过数千年的临床实践、删减更替，其疗效得到广泛肯定。如今随着现代医学的飞速发展，中医药现代化已成为必然趋势，但如何做好依旧是一条漫长的道路，这不仅需要将古方系统整理归纳，总结其理、法、方、药的规律，更需要将传统中医与现代西医相联系，探究中医方剂与现代药理学的关联性。

本文通过对归脾汤与现代药理学的文献调研，探究该方及其有效成分与现代药理学的临床关联性，在复方、单味药、有效成分、作用部位4个层次所获得的的信息进行深入挖掘，以探求其作用机理。

归脾汤主治心脾气血两虚证、脾不统血证，其主要功效为健脾益气、养心补血，以前者为主。本文经过大量文献调研发现，归脾汤主要通过黄芪甲苷、龙眼多糖、人参皂苷、白术多糖、阿魏酸、酸枣仁皂苷、茯苓多糖、远志皂苷、木香烃内酯、甘草酸等有效成分之间的相互协调来发挥作用，提示该方与现代临床药理之间必定有一定联系和规律。通过分析关于归脾汤有效成分及作用部位的文献，可对该方组方结构和药材配伍进行研究，进一步阐明中医复方与现代药理学之间的关联性，为中西医临床结合用药提供新思路及相应的理论基础。